摘要：MicroRNA(miRNA)是一类内源性的、能够特异性调控真核生物细胞内转录后基因表达的非编码单链RNA。近年来,miRNA的调控作用已被广泛应用于溶瘤病毒的设计。一方面,通过在病毒基因组中插入肿瘤内表达下调的组织特异性miRNA的靶序列,可以改变溶瘤病毒的组织趋向性,在达到减毒效果的同时保留其抗肿瘤活性。另一方面,通过在病毒基因组中插入表达天然或人工改造的miRNA,可以促进病毒复制,改善肿瘤微环境,从而增强溶瘤病毒的疗效。讨论目前miRNA调控在溶瘤病毒领域中的应用进展,为优化溶瘤病毒疗法策略提供参考。

摘要：昆虫杆状病毒表达载体系统(Baculovirus expression vector system,BEVS)已成功应用于多种蛋白的表达,并为疫苗开发提供了充足的原材料。相比其他表达系统,BEVS具有许多优势:杆状病毒专一寄生于无脊椎动物,安全性高;重组蛋白表达水平高;可对重组蛋白进行正确折叠和翻译后修饰,获得具有生物活性的蛋白;适应于多基因表达如病毒样颗粒(Virus-like particle)的复杂设计;适用于大规模无血清培养等。为了更好地理解BEVS在疫苗研究中的应用前景,文中将从BEVS的发展及其在疫苗研究中的应用等方面进行综述。

摘要：目的了解厦门市在校男性大学生对人乳头瘤病毒(HPV)疫苗的认知和接种意愿及其影响因素,为HPV疫苗的免疫策略提供基础数据。方法采用方便抽样的方法抽取厦门市5所高校1 209名学生,采用自行设计问卷调查研究对象的基本信息、行为习惯、HPV疫苗认知和HPV疫苗接种意愿,并采用Logistic回归分析HPV疫苗接种意愿的影响因素。结果男生中有221名(18.28%)听说过HPV疫苗。465名(38.46%)愿意接种HPV疫苗,城市户籍(OR=1.45,95%CI=1.13~1.86)、医学专业(OR=1.56,95%CI=1.01~2.41)、本科学校(OR=2.43,95%CI=1.69~3.49)、性取向中包括男性(OR=2.29,95%CI=1.27~4.11)、过去12个月有固定性伴侣(OR=2.20,95%CI=1.48~3.28)、听说过HPV疫苗(OR=2.24,95%CI=1.10~4.54)、知道男性可以接种HPV疫苗(OR=3.65,95%CI=1.78~7.46)、知道HPV疫苗接种最佳时期是初次性行为开始前(OR=2.67,95%CI=1.48~4.83)的在校男大学生有更高的HPV疫苗接种意愿。担心疫苗的安全性是男性大学生不愿接种的首要原因(46.12%)。结论厦门市男性在校大学生对HPV疫苗认识比较缺乏,接种意愿较低。有必要开展各种健康教育,以提高男性大学生对HPV疫苗的认知。

摘要：建立一种通用的检测不同物种来源A组轮状病毒的逆转录实时荧光定量PCR方法(RT-qPCR)。根据轮状病毒保守的NSP5基因的保守序列设计引物和探针,建立并优化RT-qPCR检测体系;同时通过9份轮状病毒毒株和96份临床标本的检测对该方法和目前常用的基于NSP3基因的2种RT-qPCR方法进行灵敏度和检出率的比较。新建立的RT-qPCR方法特异性高,重复性好;与基于NSP3基因的方法相比:(1)在临床标本检测中,检出率无差异;(2)9株培养病毒检测中,NSP5体系可全部检出,两个NSP3对照体系NSP3-1和NSP3-2的检出率分别为78.78%(7/9)和88.89%(8/9);(3)NSP5体系与对照NSP3-1体系灵敏度相当,检测下限比NSP3-2体系低100倍。本研究建立的基于NSP5的荧光定量PCR体系灵敏度高,可检测毒株范围广,为检测不同物种来源的A组轮状病毒提供一种新的选择。

摘要：单克隆抗体在生物医学领域中具有广泛应用,其特异性识别抗原的能力对于疾病治疗和疫苗设计至关重要。精确定位单克隆抗体识别表位有助于深入了解抗体与抗原的相互作用机制,可以为抗体药物的设计和优化以及疫苗设计提供重要依据。单克隆抗体表位分析技术的不断发展为抗体应用提供了有力支持。现有的单克隆抗体表位分析技术有丙氨酸扫描、多肽微阵列、结构域互换、X射线晶体衍射技术、冷冻电镜技术等。不同技术各具特色,在选择适合的分析方法时,需要综合考虑实验需求、样本特性及技术可行性等因素。综述了现有的单克隆抗体表位分析技术,比较了不同技术的优缺点,旨在为单克隆抗体表位分析的方法选择提供参考,推动单克隆抗体在生物医学领域的进一步发展。

摘要：目的:对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)广谱中和抗体XMA09进行性质鉴定,探究其广谱中和突变株的潜在机制,为SARS-CoV-2的疫苗设计与广谱中和抗体筛选提供参考。方法:通过ExpiCHO真核表达系统与Protein A层析柱表达纯化XMA09蛋白;冷冻电镜技术确定XMA09识别的受体结构域(RBD)上的关键氨基酸位点;间接ELISA与表面等离子共振(SPR)技术检测XMA09对SARS-CoV-2及其突变株Spike蛋白的亲和力;采用基于水疱性口炎病毒(VSV)的假病毒系统检测XMA09对SARS-CoV-2野生型及突变株的中和能力。结果:本研究发现XMA09识别的表位较为保守,对多种突变株Spike蛋白均具有强结合能力,能广谱中和关切突变株(VOCs),包括广泛流行的Omicron亚突变株BA.4/5。结论:XMA09是SARS-CoV-2广谱中和抗体,具有作为SARS-CoV-2治疗性抗体的潜力,并可为SARS-CoV-2的广谱疫苗设计与抗体药物开发提供参考意义。

摘要：目的制备抗寨卡病毒衣壳(Capsid,C)蛋白的单克隆抗体,并对该抗体的性质进行初步分析。方法设计并合成寨卡病毒C蛋白多肽,将多肽与BSA偶联后免疫小鼠,采用细胞融合技术融合、筛选杂交瘤细胞株,制备抗寨卡病毒C蛋白的单克隆抗体,并应用ELISA,Western blot及免疫荧光等方法对抗体的反应效价、亚型和特异性进行分析。结果筛选获得1株与C蛋白具有良好结合活性的小鼠单克隆抗体9C1,属于IgM亚型,其重链约为50 ku,轻链约为25 ku,该抗体能够与寨卡病毒感染细胞后表达的C蛋白反应。结论筛选获得了抗寨卡病毒C蛋白的单克隆抗体,该抗体具有良好反应性和特异性,为开展C蛋白的功能和寨卡病毒病的相关防治方法奠定了实验基础。

摘要：新冠疫情使得RNA疫苗得到了迅速的发展。本文依据RNA分子形式的不同将RNA疫苗分为三种类型:非复制型传统mRNA疫苗、环状RNA疫苗和自复制型RNA疫苗,并对其技术特点及在新冠病毒领域的研究进展进行综述。

摘要：呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是引起5周岁以下儿童下呼吸道感染的主要病原体.目前常用的试剂盒是美国Diagnostic Hybrids公司研发的7项呼吸道病毒检测试剂盒,但其价格昂贵,且需荧光显微镜辅助诊断,不利于在基层医疗机构中推广,国内尚无上市的快速诊断试剂用于临床检测.为此建立用于RSV抗原检测的早期快速诊断试剂,并以反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测为参比,同时使用酶联免疫吸附分析(ELISA)双抗夹心法和免疫荧光法对112份临床鼻咽抽吸物(NPA)样本进行检测.ELISA双抗夹心法和免疫荧光法的灵敏度分别为79.31%和74.14%,特异度分别为100%和96.30%,Kappa值分别为0.787 1和0.689 5,两者均与RT-PCR检测结果具有高度一致性.此外,将ELISA双抗夹心法与免疫荧光法比较,两者无显著差异(p>0.05).综上,ELISA双抗夹心法操作简便,特异性高,有望代替进口检测试剂盒完成RSV感染的早期快速诊断.

摘要：人呼吸道合胞病毒(Human respiratory syncytial virus,HRSV)是引起5岁以下儿童急性下呼吸道感染的主要病原体之一,至今尚无安全有效的预防RSV感染的疫苗。融合(F)蛋白是目前RSV疫苗研发的主要抗原靶标,存在prefusion(pre⁃F)构象和postfusion(post⁃F)构象,而pre⁃F构象蛋白上含有诱导机体产生高效中和抗体的中和表位。因此,在靶向pre⁃F蛋白疫苗研发前期工作中,对于F蛋白两种构象形式相对含量的评估可以进一步指导RSV疫苗免疫原再设计。目前已报道的F蛋白抗体大多识别pre构象,本研究拟开发出一种特异性识别post⁃F蛋白的工具抗体,希望能够评估post⁃F蛋白的相对含量。通过RSV A2 post⁃F重组蛋白免疫小鼠获得了特异性识别post⁃F蛋白的鼠源抗体12A12,结果显示12A12对于post⁃F蛋白具有良好的广谱结合活性,并且对不同来源的post⁃F蛋白在不同方法学应用上都有一定的检测能力,表现出成为特异性检测post⁃F蛋白工具抗体的潜力。