摘要：目的建立简便易行经济适用的乙醇脱氢酶2(ADH2)基因单核苷酸多态性检测方法。方法根据单碱基突变位点的碱基替代情况设计引物,其中一条引物根据突变位点邻近序列设计,人为引入错配碱基,使引物3′端和单碱基突变的一种突变型在PCR扩增后形成一个酶切位点,并应用相应内切酶进行酶切鉴定,通过PCR-RFLP技术判断ADH2基因SNP位点多态性。结果设计一对特异引物并PCR扩增含ADH2多态位点的DNA片段,使用限制性内切酶Bsh1236I酶切判断ADH2位点多态性,PCR和酶切效果均较好。结论应用创造酶切位点PCR-RFLP原理建立的ADH2多态位点检测方法具备简便、经济、快速的特点。

摘要：目的探讨FAS和FASL基因多态性与矿工矽肺遗传易感性的关系。方法采用病例对照设计，以183例男性矽肺患者为病例组，111例无矽肺的男性接尘矿工为对照组，调查研究对象的一般情况及职业史，收集现场粉尘浓度资料，估算工人既往累积总粉尘接触量；应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）技术检测FAS-1377、FAS-670及FASL-844位点的多态性，分析多态性与矽肺患病及矽肺期别的关系，基因间以及基因与环境因素间的交互作用以及单倍型。结果FAS-1377、FAS-670及FASL-844各位点基因型在病例组和对照组间的分布差异均无统计学意义（P〉0．05）：不同期别矽肺患者中FAS-1377、FAS-670及FASL-844位点多态分布差异无统计学意义（P〉0．05）；病例组中FAS-1377G／-670G单倍型分布频率为9．6％，明显高于对照组（3．6％），差异有统计学意义（P〈0．05）；各基因多态间、基因多态与累积总粉尘接触量以及基因多态与吸烟状况之间的交互作用分析结果均无统计学意义（P〉0．05）。结论FAS-1377、FAS-670及FASL-844多态性在矽肺发病的遗传易感性中不起主要作用。单倍型FAS-1377G／-670G可能是矽肺发生的易感性标记。

摘要：目的建立简便易行、经济适用的MGMT基因4个单核苷酸多态性位点的检测方法。方法应用碱基错配创造酶切位点原理设计引物,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术判断MGMT基因四个SNP位点多态性。结果设计一对引物PCR扩增含MGMT84多态位点的DNA片段,另一对引物PCR扩增含MGMT基因143、160、178三个多态位点的DNA片段,使用4种限制性内切酶分别酶切判断4个位点多态性,PCR和酶切效果均较好。结论应用创造酶切位点PCR-RFLP原理建立的MGMT四个多态位点的检测方法具备简便、经济、快速的特点。

摘要：目的探讨多重聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(多重PCR-RFLP)技术在单核苷酸多态性检测中的应用。方法应用多重聚合酶链反应(Multiplex)(多重PCR)原理设计人类X射线交错互补修复基因1(XRCC1基因)194、399位点引物,通过PCR-RFLP技术判断XRCC1基因2个SNP位点多态性。结果设计的两对引物可同时PCR扩增分别含2个多态位点的DNA片段,MspI限制性内切酶酶切可判断2位点多态性,PCR和酶切效果均较好。结论多重PCR-RFLP技术可应用于单核苷酸多态位点的检测,并节省时间和费用,提高检测效率。

摘要：目的探讨DNA损伤修复基因X线修复交叉互补基因1(XRCC1)多态性在1,3-丁二烯致外周血淋巴细胞染色体损伤易感性中的作用。方法采用胞质分裂阻滞微核试验方法(CB-MN)评价166名1,3-丁二烯接触工人和41名正常人染色体损伤水平,应用聚合酶链反应-限制性片段多态性技术(PCR-RFLP)对接触工人第19染色体上的XRCC1第6外显子194密码子,第9外显子280密码子和第10外显子399密码子进行多态性检测。结果接触组和对照组的微核发生率分别为(3.39±2.42)‰和(1.48±1.26)‰,差异有显著性(P<0.01)。高剂量接触组工人比低剂量接触组工人更容易发生染色体损伤(FR=1.30,95%CI1.14～1.53,P<0.05)。XRCC1194突变基因携带个体的微核发生率比野生纯合型个体显著增高(FR=1.13,95%CI1.07～1.27,P<0.05);XRCC1280突变纯合型个体的微核率较野生纯合型显著增加(FR=1.67,95%CI1.10～2.42,P<0.05);XRCC1399杂合型个体以及杂合型和突变纯合型个体的微核率均显著增加(FR=1.26,95%CI1.03～1.53;FR=1.24,95%CI1.03～1.49,P<0.05)。CAG/TGG双体型个体微核率显著降低,结论 XRCC1194、280、399突变位点携带工人染色体损伤风险增高。

摘要：目的探讨Ⅰ相、Ⅱ相代谢酶基因多态性与氯乙烯(VCM)作业工人外周血淋巴细胞DNA损伤的关系。方法应用彗星实验测定87名VCM作业工人外周血淋巴细胞DNA损伤情况,并采用病例-对照设计,按彗星发生率将工人分为DNA损伤组和对照组。用PCR-RFLP法测CYP2E1(rs3813867)基因多态;PCR法测GSTT1、GSTM1缺失情况;应用TaqManPCR分析技术判定GSTP1(rs947894)、CYP1A1(rs1048943,rs4646903)和UGT1A6(rs6759892,rs1105879,rs4124874,rs3755319,rs887829,rs4148323)基因型。结果经χ2检验,CYP2E1基因rs3813867c1c1和c1c2+c2c2基因型、GSTP1基因rs947894AA和AG+GG基因型及UGT1A6基因rs1105879AA和AC+CC基因型在DNA损伤组和对照组间的分布差异有显著性(分别为P=0.029,P=0.004和P=0.002)。多元Logistic回归分析的结果表明,携带GSTP1基因rs947894AG+GG基因型的个体较携带AA基因型个体DNA损伤的风险性升高(OR=13.393,95%CI:2.410～74.431,P<0.01);携带UGT1A6基因rs1105879AC+CC基因型的个体较携带AA基因型个体DNA损伤的风险性降低(OR=0.064,95%CI:0.006～0.637,P<0.05)。单倍型分析结果表明,UGT1A6基因TCCTAG单倍型在对照组的分布频率高于DNA损伤组(P<0.05)。结论携带GSTP1基因rs947894AG或GG基因型和UGT1A6基因rs1105879AA基因型的个体发生DNA损伤的风险增高,它们可能为氯乙烯致DNA损伤的易感人群。而UGT1A6基因TCCTAG单倍型对氯乙烯中毒可能具有保护作用。

摘要：目的探讨氯乙烯（VCM）致DNA损伤与DNA修复基因和代谢酶基因多态性的关系。方法彗星试验检测DNA损伤，并按DNA损伤情况将接触VCM的研究对象分为DNA损伤组（75人），采用病例对照设计方法选择对照组（75人），用聚合酶链反应一限制性酶切片段多态性技术（***）和PCR测XRCCl（Arg94Trp，Arg280His和Arg399Gln）、XPD（Ile199Met，Asp312Asn和Lys751Gin）和代谢酶（CYP2E1、GSTTI和GSTMI）基因多态性。结果单因素分析结果表明，CYP2E1clc2、c2c2和XPD751Lys／Gln、Gln／Gln基因型携带者DNA损伤风险明显增高，而XRCCI399Arg／Gln、Gln／Gln基因型携带者DNA损伤风险明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。logistic回归分析发现，XRCCI194、XRCCI399、XPD751和CYP2E1多态与DNA损伤有关。累积接触剂量分析表明，具XRCCI399Arg／Gln、Gln／Gln基因型个体即使在累积接触剂量高的情况下DNA损伤发生率仍明显降低（OR：0．35，95％CI：0．12～1．01）；具CYP2E1cl／c2、c2／c2基因型个体，无论累积接触剂量高低，其DNA损伤发生率均明显高于对照（OR：2．57，95％CI：1．01—6．59和OR：2．57，95％Ch0．99—6．87）。结论VCM累积接触剂量和CYP2E1、XRCCI194、XRCCI399及XPD751基因型与VCM诱导的DNA损伤有关。

摘要：目的探讨氯乙烯（VCM）致染色体损伤与DNA修复基因和代谢酶基因多态间的关系。方法收集上海某化工厂402名VCM接触工人健康体检资料、人口学资料（年龄和性别）、生活方式（吸烟、饮酒）和职业接触等因素，评估个人VCM累积接触剂量并分组。采集静脉血3ml，采用外周血淋巴细胞胞质分裂阻滞微核试验（CBMN）检测染色体损伤，采用聚合酶链式反应（PCR）检测GSTT1、GSTM1基因缺失情况，采用PCR-限制性片段长度多态性技术（RFLP）检测其他基因多态。结果多元Poisson回归分析结果表明，中（4000～40000mg）、高（〉40000mg）VCM接触剂量组染色体损伤的风险明显高于低剂量组，调整后的FR值分别为1．19（1．06-1．34）和1．20（1．06～1．38），差异有统计学意义（P值分别为0．003和0．01）；携带CYP2E1和XRCC1 Arg280His突变型基因的个体微核率明显高于野生型个体，调整后的FR值分别为1．12（1．02～1．23）和1．13（1．02～1．25），差异有统计学意义（P值均为0．02）；携带GSTP1 Val/Wal和ALDH2Glu／Glu基因型个体微核率明显高于其他基因型个体，调整后的FR值分别为0．74（0．59，0．94）和0．87（0．79～0．95），差异有统计学意义（P值分别为0．01和0．003）。结论VCM致染色体损伤与VCM累积接触剂量增高及GSTP1 Val／Val、CYP2E1c1c2／c2c2、ALDH2Glu／Glu、XRCC1280His/His或Arg／His基因型多态性等因素有关。开展VCM致染色体损伤与遗传易感性方面的研究，有助于VCM致癌机制的阐明，而研究中易感性多态位点的发现也可以为识别易感人群提供理论依据。

摘要：[目的]探讨混苯接触工人外周血淋巴细胞染色体损伤状况及其与代谢酶基因CYP2E1和NQO1多态性的关系。[方法]采用胞质分裂阻滞微核实验评价461名混苯作业工人和88名对照组工人的染色体损伤水平,应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性检测CYP2E1 Pst和NQO1609基因多态性。[结果]接触组和对照组淋巴细胞微核率分别为(2.12±1.87)‰和(1.19±1.68)‰,差异有统计学意义(P<0.01),单因素和多因素分析结果均显示,NQO1609野生纯合者(CC)为染色体损伤的易感人群。年龄增长是微核率增加的危险因素,未发现性别、吸烟、饮酒与微核率之间的关系。[结论]双核淋巴细胞微核数可以作为苯接触早期健康损害的指标。混苯中甲苯和二甲苯可能不是导致遗传损伤的主要物质。混苯接触诱导的染色体损伤与NQO1609位点多态有关。

摘要：[目的]探讨氯乙烯(VCM)接触工人体内氧化损伤指标的变化,筛选可能的氯乙烯接触效应生物标志物。[方法]以359名氯乙烯接触工人为接触组,158名不接触氯乙烯的工人为对照组,测定血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及谷胱甘肽硫转移酶(GST)的含量。[结果]多元线性回归分析结果显示,各VCM累积接触剂量组与对照组相比,SOD活性降低(P<0.001)而MDA活性增高(P<0.001)。低剂量组和高剂量组与对照组相比,GST水平增高(P<0.05)。趋势卡方检验结果显示,VCM累积接触剂量与SOD和GST活性间存在明显的剂量-反应关系。[结论]在目前的VCM接触浓度下,VCM可造成氧化损伤指标的改变。认为MDA、SOD、GST可作为VCM暴露评价的效应生物标志物。