摘要：目的:构建和鉴定带3×Flag标签的人线粒体转录终止因子3基因(hMTERF3)真核表达载体。方法:根据NCBI数据库中hMTERF3基因序列设计引物,采用聚合酶链式反应从pGEM-hMTERF3重组克隆载体中扩增出hMTERF3基因开放阅读框序列,经HindⅢ和Bam HⅠ双酶切后,连接入真核表达载体p3×FLAG-CMV-14的多克隆位点中,构建重组质粒p3×FLAGCMV-hMTERF3,分别用菌落PCR、限制性核酸内切酶分析和DNA序列分析3种方法鉴定重组子。结果:重组质粒p3×FLAGCMV-hMTERF3经双酶切鉴定和菌落PCR鉴定均获得大小为1 254 bp的目的条带,DNA序列分析和Blast序列比对结果表明该序列与Gen Bank中hMTERF3基因序列的同源性达到100%,插入基因的大小和方向均正确。结论:成功构建了hMTERF3基因的真核表达载体,为进一步研究hMTERF3基因在恶性肿瘤发生发展中的作用奠定了基础。