摘要：目的旨在弄清ＮＳ３参与分子间相互作用的确切区段，为研究针对ＮＳ３的抗ＨＣＶ寡肽小分子药物的设计提供依据。方法参照ＨＣＶ中国河北株序列设计ＮＳ３引物，将其Ｎ末端的前１５个和前３０个氨基酸分别缺失掉。然后用酵母双杂交系统检测ＮＳ３／ＮＳ３及ＮＳ３／ＮＳ４Ａ分子间相互作用强度在缺失前后的变化，从而判明ＮＳ３Ｎ末端氨基酸在分子间相互作用中的意义。核苷酸序列分析采用ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍ３７３Ａ型自动测序仪。结果ＮＳ３Ｎ末端氨基酸缺失前后，ＮＳ３／ＮＳ３分子间及ＮＳ３／ＮＳ４Ａ分子间相互作用的强度相差有显著性（Ｐ＜０．０１），但缺失１５个氨基酸和缺失３０个氨基酸对上述相互作用强度的影响差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论ＮＳ３Ｎ末端的１～３０个氨基酸在ＮＳ３／ＮＳ３及ＮＳ３／ＮＳ４Ａ分子间相互作用中有一定意义，其Ｎ末端前１５个氨基酸（ＡＰＩＴＡＹＳＱＱＴＲＧＬＬＧ）对于分子间相互作用更为关键。本研究结果将为抗ＮＳ３丝氨酸蛋白酶活性的寡肽抑制物的研究打下基础。

摘要：目的研究合成肽ＷＬＤＰＲＨ的免疫反应性和对干扰素（ＩＦＮ）诱导的生物学活性的影响。方法根据我们早先的研究，已用中和抗体从噬菌体展示６肽库中筛选出了两个与ＩＦＮ－α有同源性的肽片段，将其中之一进行了人工合成（ＷＬＤＰＲＨ），并进行了同源性比较分析，体外竞争酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ），体外ＩＦＮ诱导抗病毒和抗增殖分析。结果计算机分析表明，人工合成肽ＷＬＤＰＲＨ与推理的Ｉ型ＩＦＮ受体结合区ＬｏｏｐＡＢ（２９－３５位）有相当的同源性。体外竞争ＥＬＩＳＡ实验表明，合成肽在２５μｇ／ｍｌ浓度时能特异性抑制ＩＦＮ－α与中和抗体４Ｃ１结合。体外抗病毒结果显示，干扰素在亚保护剂量时（２０～７０ｐｇ／ｍｌ）时，合成肽能提高ＩＦＮ－α作用细胞后的抗病毒活性，并且合成肽ＷＬＤＰＲＨ在１．４μｇ／ｍｌ时，ＩＦＮ－α抗病毒保护率从４０％提高到８６％，为最高保护率的最低剂量，但合成肽为１．４μｇ／ｍｌ，ＩＦＮ浓度为５～５５ｎｇ／ｍｌ时，对ＩＦＮ－α诱导的抗增殖作用不明显。结论用中和抗体筛选的短肽ＷＬＤＰＲＨ能影响ＩＦＮ分子作用模式，并且有可能模拟ＩＦＮ分子ＬｏｏｐＡＢ的结构和功能，这为免疫治疗及ＩＦＮ的小分子模拟设计奠定基础。