摘要：目的观察反义寡核苷酸（ASODN）、RNAf扰（RNAi）两种方法对端粒酶的抑制效应。方法设计合成寡核苷酸及siRNA链，两者均在脂质体介导下转染K562细胞，RNA干扰采用直接转染后筛选高效链，质粒载体构建，再转染后分析效果。结果合成3条siRNA链，直接转染后，检测hTERTmRNA表达，发现第一、第二条链有效，第三条链无效，人端粒酶反转录酶（hTERT）mRNA表达抑制仅维持48h，72h即恢复。筛选两条链构建质粒载体，转染后P．1组作用48h后hTERTmRNA为0．39±0．13，72h为0．57±0．32，P-2组48h为0．554-0．20，72h为0．884-0．23，端粒酶相对活性P-1组48h为0．424-0．07，72h为0．314-0．08，P-2组48h为0．49±0．27，72h为0．394-0．03。siRNA的最佳作用浓度为：100μmol／L。反义寡核苷酸以0．6μmol／L浓度组抑制作用最佳，24h后hTERTmRNA为0．42±0．16。48h为0．71±0．18。端粒酶相对活性24h为0．52±0．002，48h为0．482±0．018。结论靶向hTERT的反义寡核苷酸和RNA干扰均可以抑制hTERTmRNA表达，从而抑制端粒酶活性，抑制效果与靶位点选择密切相关。RNA干扰效果优于反义寡核苷酸，前者不仅表现为抑制效率高，且持续时间长。质粒载体构建后的RNA干扰优于化学合成后直接转染的RNA干扰。

摘要：设计了一种细胞间距可调的trans well共培养方法，以研究脐带血来源的造血干／祖细胞（HS／PCs）和人脂肪干细胞（human-adipose derived stem cells，h-ADSCs）体外共培养时细胞间作用距离对造血干细胞扩增能力和脂肪干细胞在共培养后干细胞特性的影响。采用不同规格的砂纸打磨孔板的上壁面，经高精度游标卡尺测量，使两种细胞之间的有效接触间距为10--450μm不等。然后以h-ADSCs为基质细胞，分别考察HS／PCs和h-ADSCs在不同的作用距离下的共培养情况。其间每24小时对细胞进行计数，观察细胞形态。培养7天后对MNCs表面抗原CD34＋、CFU-GM集落扩增倍数进行了检测；同时也对***表面抗原（CD13、CD29、CD34、CD44、CIM5、CD73、CD105、CD166、HLA-DR）及其多向分化潜能（成骨、成软骨、成脂肪）进行分析以鉴定其干细胞性能。结果表明，通过transwell共培养，细胞之间在作用距离为350gm时HS／PCs的扩增效果最好，其中造血MNCs扩增了15．1±0．2倍，CD34＋扩增了5．0±0．1倍：扩增的h-ADSCs表达CD29、CD44、CD166，而不表达CD34、CD45，且在适当诱导条件下可以向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞分化。