摘要：[目的]观察受体相互作用蛋白2(RIP2)对巨噬细胞炎性活化及极性转化的影响,探讨RIP2在巨噬细胞吞噬氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)过程中的作用机制。[方法]用不同剂量(10、25和50 mg/L)的ox-LDL处理THP-1源性巨噬细胞24 h,及用50 mg/L ox-LDL处理THP-1源性巨噬细胞8、16及24 h,应用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测THP-1源性巨噬细胞中RIP2 mRNA和蛋白的表达,应用ELISA检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的分泌。设计3对RIP2 siRNA,应用hiperfict转染试剂转染RIP2 siRNA进入细胞,应用实时荧光定量PCR和Western blot检测THP-1源性巨噬细胞转染后RIP2 mRNA和蛋白的表达,从而筛选最适siRNA转染浓度和最有效的一对siRNA。用最有效RIP2 siRNA转染细胞后,50 mg/L ox-LDL处理24 h,应用ELISA检测TNF-α、MCP-1、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素12(IL-12)的分泌,应用实时荧光定量PCR检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg-1)的表达,应用流式细胞术检测细胞表面抗原CD86、CD80和CD163的表达。[结果]ox-LDL以剂量和时间依赖的方式诱导巨噬细胞中RIP2的表达,随着ox-LDL处理剂量及时间的增加,RIP2 mRNA及蛋白的表达增加,其中50 mg/L组RIP2蛋白的表达是对照组的7.6倍,24 h组RIP2蛋白的表达是对照组的17.9倍(P<0.001)。ELISA结果显示,随着ox-LDL处理剂量及时间的增加,TNF-α和MCP-1的分泌升高(P<0.05)。RIP2 siRNA转染细胞后,ELISA检测结果显示,ox-LDL组TNF-α、MCP-1、IL-10的分泌是对照组的2.4倍、2.9倍、1.8倍(P<0.01),IL-12的分泌较对照组下降了34.2%(P<0.01);siRNA+ox-LDL组TNF-α、MCP-1、IL-10的分泌较ox-LDL组分别下降了37.4%、45.3%、27.4%(P<0.01),IL-12的分泌增加了31.4%(P<0.05)。流式细胞术和实时荧光定量PCR结果显示,ox-LDL组CD86、CD80和iNOS mRNA的表达分别是对照组的14.2倍、33.8倍和4.5倍,CD163和Arg-1 mRNA的表达较对照组分别下降了33.4%和43.0%(P<0.05);siRNA+ox-LDL组CD86、CD80和iNOS mRNA的表达较ox-LDL组分别下降了27.6%、29.3%和34.3%,CD163和Arg-1 mRNA的表达分别升高了30.3%和38.6%(P<0.05)。[结论]巨噬细胞中RIP2能被ox-LDL以剂量和时间依赖的方式诱导表达。RIP2基因沉默后可以抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞M1型转化。

摘要：背景:锌指蛋白A20是近年来细胞内源性保护机制研究的新靶点,目前研究表明锌指蛋白A20抑制肿瘤坏死因子,脂多糖等多种炎性细胞因子诱导核因子κB信号通路激活所引起的血管平滑肌细胞增殖,但有关A20抗细胞氧化损伤方面的影响报道甚少。目的:观察锌指蛋白A20基因干扰对H2O2诱导的人脐动脉血管平滑肌细胞增殖和细胞核中核因子κB表达的影响及可能的分子生物学机制。设计、时间及地点:随机对照实验,于2007-03/2008-06在大连医科大学附属第二医院中心实验室完成。材料:体外培养人脐动脉血管平滑肌细胞,构建针对Genbank中人A20的基因序列,采用脂质体LipofectamineTM2000介导80pmolsiRNA,6μL转染。方法:将培养的第4代人脐动脉血管平滑肌细胞随机分6组,①空白组:培养基培养,未给与任何干预。②A20siRNA组:转染A20 siRNA 24h。③scramblesiRNA组:转染阴性对照scramblesiRNA24h。④H2O2组:H2O2持续刺激6h。⑤H2O2+A20siRNA组:转染A20siRNA24h后H2O2持续刺激6h。⑥H2O2+scramblesiRNA组:转染阴性对照scramblesiRNA24h后H2O2持续刺激6h。主要观察指标:以RT-PCR,Western-blotting检测A20基因表达变化,以四甲基偶氮唑蓝方法测定细胞增殖活性,以流式细胞技术观察血管平滑肌细胞细胞周期的变化,以Western-blotting检测细胞核中核因子κBp65的蛋白含量表达。结果:H2O2组细胞增殖率明显高于空白组,但低于H2O2+A20siRNA组(P<0.05)。H2O2组S期、G2/M期构成百分比,增殖指数均较空白组明显升高,然而较H2O2+A20siRNA组明显降低(P<0.05),空白组A20mRNA与蛋白有微弱表达,A20siRNA组较空白组表达减少(P<0.05);H2O2组A20mRNA与蛋白表达明显高于空白组但显著低于H2O2+A20siRNA组(P<0.05)干扰效率大约55%。细胞核中核因子κBp65有少量表达;A20siRNA干扰后核因子κBp65含量明显增加;H2O2刺激后核因子κBp65表达含量显著增加但明显低于H2O2+A20siRNA组(P<0.05)。结论:A20基因可抑制H2O2损伤诱导的血管平滑肌细胞的增殖,其分子机制可能通过其负反馈抑制了核因子κB介导的信号转导途径。

摘要：目的探讨急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)患者经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)后采用尼可地尔治疗后对炎性相关指标的影响,评估其对血管内皮功能的影响。方法将2022年8月至2023年1月于大连医科大学附属第二医院心血管内科行PCI治疗的66例ACS患者作为研究样本,按照完全随机设计法分成对照组和试验组,每组33例。对照组行常规疗法,试验组用尼可地尔治疗。比较2组患者血清中的炎性指标、同型半胱氨酸(hcy)和不良反应情况。结果尼可地尔治疗后,对照组术后炎性相关因子水平高于试验组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论尼可地尔应用在老年ACS患者PCI术后疗效确切,能优化血管相关炎性指标,降低同型半胱氨酸水平改善冠状动脉血管内皮功能,适合进一步推广。

摘要：目的:提高体表心电图对房室旁路定位的正确性,便利心内标测,缩短射频消融时医患受X线照射的时间。方法:样本按每区大于15例设计,全心分10区定位。累积射频消融成功的单支显性旁路277例。采用δ波初始20ms极性、QRS波形态、R/S比值、QRS终末波极性和ST段改变作定位指标。结果:发现心电图在相邻区的旁路有重叠现象,部分区呈一区多样性。本定位规则系统,对单支显性旁路有95.3％的敏感性与99.4％的特异性,诊断正确率99.0％。结论:本定位系统根据预激综合征改变心室除极全过程的原理,采用心室除极的起始波、终末波和复极的ST段定位,并采用一区多标准以适应心电图一区多样性,可从同步6道以上的体表心电图对单支房室旁路作出正确的定位。