摘要：黑素皮质素受体1（melanocortin-1-receptor，MC1R）是黑色素形成调控中的一个关键因子。MC1R通过调节色素产生的数量和类型，决定皮肤表型。本研究根据鱼类的MC1R基因保守区的核苷酸序列设计引物，利用PCR技术扩增出大菱鲆MC1R基因部分片段，纯化后进行克隆测序。经生物软件拼接后，得到大菱鲆MCIR基因编码区951bp片段。序列分析表明：此片段与GenBank上公布的部分鱼类的MCIR基因序列同源性较高（97％～86％）。本试验结果为进一步研究该基因的结构与生物学功能奠定了基础。

摘要：介绍了一个新的基于优化推导出的核偏最小二乘(kernel partial least squares,K-PLS)的算法原理和实现步骤,并且给出了利用K-PLS法构建P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)黄酮类抑制剂的定量构效关系(QSAR)模型.利用该方法结合几个简单的分子拓扑参数,构建了具有高准确率的预测模型.该模型将有助于P-gp黄酮类抑制剂的虚拟筛选和理性设计.结果证明K-PLS是一个十分稳定可靠的方法,将会在化学计量学领域得到较好的应用和推广.

摘要：Real Time PCR,即实时监测PCR扩增产物并进行解析的方法,目前已广泛应用于分子生物学研究的各个领域。Real Time PCR技术秉承及发展了普通PCR的快速、高灵敏度检出等优点,同时克服了普通PCR不能准确定量、容易污染等缺点,无需在反应结束后通过电泳操作确认扩增产物。目前,Real Time PCR可设计多对引物在同一反应体系中同时对多个靶基因进行扩增,实现多重实时定量检测。Real Time PCR使PCR技术发生了质的飞跃,扩展了PCR技术的应用范畴,是一种具有划时代意义的技术。本文主要介绍Real Time PCR的主要原理、解析方法、技术发展趋势及其在海洋病原生物检测方面的应用。

摘要：利用Tandem Repeats Finder软件在红鳍东方鲀Takifugu rubriper BAC数据库和ESTs数据库中查找微卫星标记。选取其中22个序列(11个BAC-SSR s序列、11个EST-SSRs序列)设计引物,并将22对引物用于庄河、河北Ⅰ和河北Ⅱ3个群体,均能扩增出产物,其中EST-SSRs有2对引物扩增产物比预期扩增产物偏大,可能是相应基因组中有内含子导致。研究结果表明,EST-SSRs标记要比BAC-SSR s标记的多态性低,其中11个BAC-SSR s和9个EST-SSRs标记有很好的多态性,可以用于红鳍东方鲀的遗传多样性分析和重要经济性状筛选等方面的研究。

摘要：根据对赤潮异弯藻(Heterosigma akashiwo)核糖体大亚基(LSU)和核糖体转录单元内间隔区(ITS)序列信息的分析,设计了以胞质rRNA和胞核rDNA为靶序列的特异性探针,建立了赤潮异弯藻的全细胞和细胞核荧光原位杂交快速检测方法。结果表明,探针能分别使整个细胞质和细胞核呈现强烈的绿色荧光;探针是特异性的,不与其他受试藻进行交叉反应。同时,用该方法成功的从模拟自然海区混合样品中检测出赤潮异弯藻。该研究方法可以适用于对实验室和自然海区赤潮异弯藻样品的快速、准确、特异和半定量检测。

摘要：采用PCR方法对三株亚历山大藻核糖体DNA大亚基部分序列和ITS区序列进行了特异性扩增和序列测定。ITS区测序及BLAST比对结果显示,三株藻类分别为塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense),链状亚历山大藻(A. catenella)和微小亚历山大藻(A. minimum)。在此基础上,针对中国沿海分布的有毒亚历山大藻,根据其核糖体DNA大亚基(LSU rD-NA)序列信息,设计了特异性的荧光标记探针,建立了基于荧光原位杂交技术(FISH)上的有毒亚历山大藻检测方法。结果表明,探针Alexp1较理想地标记选定的目标藻——塔玛亚历山大藻(YA藻株),经探针标记的藻细胞在荧光显微镜下可以明显区分于其他非目标藻。

摘要：黑素细胞皮质激素受体(MC4R)是跨膜G蛋白偶联受体。MC4R在人和鼠的体重、能量稳态和采食量的调控中具有重要作用,是第一个发现的与人类显性遗传疾病性肥胖相关的靶位点。虹鳟(Oncorhynchus mykiss)属于冷水性鱼类,具有很好的药用和食用价值,但生长缓慢。本研究根据斑马鱼的MC4R基因保守区的核苷酸序列设计引物,通过PCR扩增出虹鳟的MC4R基因,纯化后测序。本实验测出虹鳟MC4R基因968bp,并发现其与其它鱼类的MC4R进行了同源性分析,构建基因进化树。

摘要：Esox reieherti Dybowsk genomic microsateUites were developed by using enrichment protocols combined with radioactive hybridization protocol. Four hundred to nine hundred base pair fragments were selected for the whole genome. DNA PCR amplification after digestion with restriction endonuclease Sau 3A Ⅰ, and （CA）12, （GA）12 probes marked with biotin were used for microsateUite DNA enrichment. The product fragments were connected with carder pGEM-T and transferred into DH5α Escherichia coli competent cells, and radioactive isotope probes marked with γ^-32 p were used for the second hybridization. As a result, a total of 1600 bacteria were obtained in the microsatellite genomic libraries, positive clones accounted for 90.91% before hybridization and 81.25% after hybridization, amounting to 1300. One hundred and ninety-six positive clones were selected for sequencing, and 192 clones included microsateUite sequences. The microsateUite sequences obtained, mono-nucleotide, quad-nucleotide and quint-nucleotide repeat motifs were observed beside double-base-pairs CA/GT, GA/CT. Seventy primers were designed according to the flanking sequences by using software Primer Premier 5.0, and 32 primers were selected to be synthesized. After optimizing PCR reaction conditions, 28 primers were amplified and produced clear purpose bands. The aim of our research was to promote the development and utilization of E. reieherti genomic resource, and lay the foundation for optimizing E. reieherti breeding strain in order to detect the genetic diversity and construct a genetic map.

摘要：此文从加强本科生创新精神、实践能力和创业魄力培养的角度,对水生生物学研究设计型实验开设的必要性、效果和必须解决的问题进行了探讨。

摘要：通过磁珠富集法筛选牙鲆(Paralichthys olivaceus)的微卫星分子标记,采用限制性内切酶Sau3A I对牙鲆完整基因组DNA进行酶切;通过蔗糖溶液梯度离心,收集400～900bp大小的片段,连接Brown接头,构建牙鲆基因组文库。用生物素标记的微卫星探针(CAG)15对基因组文库进行杂交,利用磁珠富集含有微卫星的DNA单链序列,并对其进行PCR扩增;将扩增产物连接到pMD18-T载体后转入感受态大肠杆菌DH5α中,得到微卫星序列文库。利用大量质粒检测法进行二次筛选,成功地从牙鲆基因组中分离出含有CAG重复的微卫星序列,测序其中的3000个单菌落,获得2805个(占93.5%)含有微卫星序列的克隆,其中含有微卫星座位3120个,完美型1808个,占57.97%;非完美型226个,占7.25%;混合型1085个,占34.78%。从中选出186个微卫星序列设计120对引物并合成,经过筛选,74对引物可扩增清晰条带,其中68对呈多态性。