摘要：探究性实验教学以解决科学问题为目标，通过设置问题情境，引导学生进行探究性学习，已广泛应用于医学教育领域。本研究以天津医科大学2019级五年制基础医学专业和"5+3"一体化临床医学专业共143名学生的医学免疫学实验课程为例，阐述了探究性教学在本课程中的设计与实施过程。通过总成绩考核，问卷调查及学生访谈进行教学效果评价。结果显示，118名(82.5%)学生总成绩优秀，25名(17.5%)学生总成绩良好。在回收的127份有效问卷中，110名(86.6%)学生对本课程设计感到满意;分别有103名(81.1%)、108名(85.0%)和113名(89.0%)学生认为本课程有助于提升其自主学习能力、创新能力和团队协作能力;117名(92.1%)学生认为本课程有助于提高其动手能力;107名(84.3%)学生认为本课程有助于激发其对科学研究的兴趣。参加访谈的48名学生中，42名(87.5%)学生对本课程的设计、实施及授课教师等给予积极评价。医学免疫学探究性实验课程教学效果良好，有助于培养学生创新意识和提高学生的综合能力，得到了学生认可。

摘要：CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats-Cas9 nuclease)基因编辑技术是近年来新兴的一种可以实现基因特异性敲除和敲入的技术。本文利用CRISPR/Cas9基因编辑系统,将3×FLAG标签定点敲入HeLa细胞SND1基因前方,使细胞内源性表达的SND1蛋白带有3×FLAG标签,并观察SND1与应激颗粒及加工体的定位情况。设计针对SND1基因起始密码子ATG附近的sgRNA,以px459为表达载体,构建出重组真核表达质粒。设计含有3×FLAG及待插入位置上下游150 bp同源臂的序列,经公司合成获得重组质粒。将2个质粒共同转染HeLa细胞,使用嘌呤霉素筛选阳性细胞,挑取单克隆后培养。Western印迹表明,细胞表达3×FLAGSND1融合蛋白质。提取细胞基因组DNA进行测序。测序无误获得稳定株后,用流式细胞术检测细胞周期和凋亡,发现与WT细胞相比无显著性差异。同时,使用05 mmol/L亚砷酸钠处理,细胞发生氧化应激,eIF2α蛋白磷酸化增加,胞浆中出现应激颗粒,SND1与应激颗粒标志蛋白TIAR存在共定位现象,但不存在与加工体蛋白DCP1α的共定位。