摘要：为进一步提高 PCR诊断方法的特异性和敏感性 ,在单纯疱疹病毒 ( HSV) TK基因区设计了一对外层公用引物和两个内层分型引物 ,建立了半巢式 PCR检测和分型 HSV的方法。用该方法检测了天津地区 64例病毒性脑炎患者 (病脑组 )和 4 6例其他中枢神经系统疾病患者 (对照组 )的脑脊液 ( CSF)标本。病脑组了阳性率为 1 5.63% ( 1 0 / 64) ,其中 9例为 HSV-1感染 ,1例为 HSV-2感染。对照组阳性率为 2 .1 7% ( 1 / 46)。本方法在发病后第 1天即可测出 CSF中的 HSV DNA,敏感性为 0 .0 1 TCID50 。

摘要：目的 :鉴定一株在普通棉耳狨猴(CallithrixJacchus)群体中引起急性呼吸道感染并引起大批狨猴死亡的病毒。方法 :根据几种可能的呼吸道病毒的保守基因序列设计合成引物 ,用RT -PCR方法对分离到的病毒进行鉴定。结果 :唯有仙台病毒的引物能够扩增出PCR产物 ,且与预期扩增片段大小一致。结论 :本次狨猴群体中流行的病原体是一株仙台病毒 (sendaivirus)。

摘要：针对不同教学对象的特性,建立新型医学微生物学实验教学体系,以利于实现培养新世纪创新性人才目标。在新型实验教学体系下,通过制定个性化教学大纲,体现学生的学制和专业特色;通过丰富教学层次,增加综合性和设计性实验比重,提高学生的创新思维和逻辑分析能力;通过转变传统“上对下”的教学方式,体现学生的自主地位、调动学生的学习主动性。

摘要：通过精选实验课内容，开设综合性、自主设计性和应用性实验，改进对实验课成绩的评价方法；扩展讨论课内容；鼓励和引领学生参加科研活动，同时重视团结协作精神的培养，延伸了实验课教学，加强了医学生科研素质的培养。

摘要：目的通过医学微生物学的课外实践活动,加强七年制医学生早期科研能力的培养与训练。方法针对本专业的特点及结合教师的科研课题方向,指导学生参加部分科研项目;指导学生围绕感兴趣的某个专题查阅文献,撰写综述;由能力强的学生独立选题、立题设计出实验方案,再结合本教研室的实际情况,由教师适当地予以指导。结果学生通过课题的研究了解了医学微生物学的新进展、新发现及相关的科研思路,力求科研题目有前沿性。学生参加科研活动,通过实验设计了解了实验的整体过程,培养了科学的思维方法及独立思考、解决问题的能力,并培养了学生的严谨的科学态度。

摘要：目的建立检测副粘病毒Tianjin株的RT-PCR方法,为临床标本的检测提供参考依据。方法根据副粘病毒Tianjin株F蛋白的基因序列,设计出一对特异性引物,以Tianjin株总RNA逆转录的cDNA为模板进行PCR扩增,然后对该方法的敏感性、特异性进行检测。并将该方法应用于临床84例下呼吸道感染患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)标本的检测。结果通过此方法成功扩增出约500bp的预期条带。将Tianjin株鸡胚尿囊液(血凝效价为1:1280)稀释到320倍时仍可出现阳性条带,对新城疫病毒、甲型流感病毒鼠肺适应株、人副流感病毒Ⅰ型、柯萨奇病毒B3m株、单纯疱疹病毒Ⅰ型及鸡胚尿囊液的PCR检测结果均呈阴性。84例下呼吸道感染患儿BALF标本中,其中2例阳性,阳性率为2.38%,与本实验室建立的双抗体夹心ELISA法检测结果相接近。结论建立的副粘病毒Tianjin株RT-PCR检测方法是一种快速、灵敏、特异的方法,为患病儿童中Tianjin株感染情况的调查奠定了重要的基础。

摘要：目的　从基因水平鉴定致肾盂肾炎大肠杆菌 P菌毛粘附素的类型。　方法　根据 P菌毛 型(Pap GJ96 )、 型 (Pap GIA2 )和 型 (Prs GJ96 )粘附素的基因序列 ,选择非同源区设计合成三对引物。以全菌 DNA样品为模板 ,应用普通 PCR和复合 PCR技术获得三型 pap G的扩增。　结果　 U PEC J96分别产生 4 6 1bp和 2 5 8bp的DNA片段 ;U PEC132和 U PEC136均产生 190 bp的 DNA片段。无 P菌毛对照株为阴性扩增。复合 PCR结果与普通 PCR完全一致。Pap G1 32 扩增产物的序列分析表明其与 Pap GIA2 之间具有 97.9%的同源性 ,但存在 4处点突变。　结论　 U PEC132株 P菌毛粘附素为 型 Pap G,但与国外同型 Pap G比较 ,存在基因变异。复合 PCR技术用于pap

摘要：目的：用PCR方法检测致肾盂肾炎大肠杆菌(UPEC)的papA基因，探索建立UPEC的鉴定方法。方法：根据已发表的F13型papA基因序列设计引物，采用PCR方法扩增700bp左右的papA基因，并与血凝试验相比较，用于不同血清型P菌毛菌株和尿源性大肠杆菌的检测。结果：7个血清型P菌毛粘附基因群的papA PCR扩增均出现阳性结果，阴性对照株均无非特异性反应。39株尿源性大肠杆菌中MRHA阳性菌株的检出率为74.4％，papA PCR扩增的阳性率为71.8％，两组结果无显著性差异(P＞0.05)。菌细胞悬液直接用于PCR检测的敏感性为3×105～3×106cfu/ml。结论：papAPCR方法用于UPEC菌株的鉴定有良好的应用前景。

摘要：目的获得Ⅰ型黏附素代表菌株———泌尿道致病性大肠埃希菌(UPEC)J96 PapG全基因扩增片段并进行克隆子分析。方法设计合成一对可扩增Ⅰ型papG全长基因的PCR引物,采用长片段PCR扩增法获得该基因的扩增片段,以限制性内切酶酶解后克隆pUC18质粒载体。结果限制性酶谱、PCR和序列分析表明,所获得重组质粒pJG29中已带有Ⅰ型papG全长基因片段的克隆。结论所设计合成的引物和建立的PCR扩增法可用于大量获取并分析UPECⅠ型黏附素基因。

摘要：观察荧光素(FITC)标记的硫代磷酸反义寡核苷酸经阳离子脂质体(Lipofectin)介导后,在完整的人肝癌细胞(2.2.15细胞)中的时相分布。结果显示,荧光素标记的反义寡核苷酸在加入30分钟后,大多进入细胞质,而且在10分钟以后,大部分迅速聚积于细胞核中,它们在细胞核及细胞质中可稳定存在12小时以上。研究结果为探讨反义寡核苷酸在完整细胞中的作用机理以及设计更有效的反义寡核苷酸提供了一定的线索。