摘要：目的 构建无标记的clpP基因缺陷的变异链球菌（简称变链菌）突变株.方法 设计引物PCR扩增大观霉素（Sp）抗性基因,使loxP位点位于Sp抗性基因的两侧,构建出大观霉素抗性基因盒（loxP-Sp-loxP）.将clpP基因克隆到pGEM-T-Easy TA载体后,双酶切以去除clpP基因的部分序列,并连入loxP-Sp-loxP,得到clpP基因缺陷的同源重组载体pIB△clpP-Sp.将该载体线性化并电转变链菌标准株,大观霉素筛选得到clpP基因缺陷株.再以温敏质粒pCrePA电转缺陷株,Cre重组酶表达并删除选择标记基因,继而在限制性温度下培养以消除pCrePA,获得无标记的clpP基因缺陷株,并进行PCR及DNA测序鉴定.结果 PCR及DNA测序结果表明clpP基因内部分序列已被删除,且无Sp抗性基因,该部位只留有一个34 bp的loxP位点.结论 在变链菌中成功构建出无标记的clpP基因缺陷株,为进一步研究clpP基因的功能及其在变链菌致龋过程中的作用奠定了基础.

摘要：背景:种植体-骨界面的生物力学效应是骨吸收重要的影响因素之一。模仿天然牙周膜的新结构种植体或可改善其界面应力的分布情况。目的:探讨不同的咬合负载条件下,改变传统种植体内部结构对种植体-骨界面皮质骨区应力分布、峰值的影响,为新结构种植体的优化设计及临床应用提供理论依据。方法:用Pro/ENGINEER软件建立新结构的种植体(模型A)与无螺纹的传统柱状种植体(模型B)的数字模型,采用Ansys软件分析在相同骨质及相同受力环境下种植体-骨界面皮质骨区应力峰值、应力带分布的变化规律。结果与结论:垂直加载时,模型A在不同受力大小时应力峰值均较模型B降低17.54%;45°加载时,模型A应力峰值较模型B降低(2.59%),模型B的高应力区向颊侧集中趋势明显。咀嚼模拟加载时,模型A的应力峰值均较模型B低,其差值在施力方向与种植体轴向夹角(β)等于12°时最大(0.353 2 MPa),在β>12°后逐渐减小;并且模型A在促进骨组织生长最适应力峰值、维持骨组织健康应力峰值两个量化指标中,均比模型B适用角度范围大(A:0°-28°,0°-58°;B:0°-24°,0°-56°)。提示优化设计种植体结构的改变可改善种植体-骨界面皮质骨区的应力分布,降低应力峰值,可在更大范围内降低骨皮质吸收的风险。

摘要：背景:因下颌后牙单颗牙缺失受条件所限,常规轴向种植难以实现。针对此问题,有学者采用倾斜种植技术结合角度基台进行修复,但对于倾斜种植用于后牙区及倾斜种植角度设计的安全性目前相关研究有限。目的:对下颌后牙区进行不同角度的偏舌侧倾斜种植修复,分析在相同动态载荷下种植修复后的骨界面生物力学。方法:借助于锥形束CT、DICOM等多种软件联合应用,建立下颌后牙区舌向不同倾斜角度的种植体冠修复模型,冠优化设计,对冠模拟磨牙咀嚼周期施加动态载荷,运用三维有限元软件Ansys对各界面的应变、应力进行分析。结果与结论:(1)在轴向种植和种植体偏舌侧倾斜5°、10°时,在咀嚼周期的垂直向、颊偏舌与轴呈45°、舌偏颊与轴成45°3种受力状态下,骨界面应力最大值为53.8 MPa,应变最大值为2 671微应变;(2)当种植体偏舌侧倾斜15°时,此模型种植体尾部边缘接近皮质骨与松质骨交界处,骨界面在各个受力状态下产生的应力、应变均明显大于其余种植角度;(3)当种植体偏舌侧倾斜20°时,种植体尾部边缘已越过皮质骨与松质骨交界处,与皮质骨发生接触,由皮质骨对种植体尾部形成支撑,骨界面应变、应力较小。并且,此研究应力集中的部位均在种植体颈部周围的骨皮质内,而松质骨内的应力值较小,应变最大值可出现在骨界面与种植体颈部或尾部接触部位;(4)通过此模型分析研究,可以在下颌后牙区行10°以内的偏舌侧倾斜种植,并且倾斜种植应避免使种植体尾部边缘位于皮质骨与松质骨交界处。

摘要：目的通过同源重组法构建LuxS基因缺失的变形链球菌（Streptococcus mutans）突变株。方法运用基因同源重组方法将红霉素抗性基因（Eym‘）连接到PCR扩增LuxS基因两端区域产生的2个基因片段之间，并共同插入到pUC19载体的多克隆位点中，构建出带红霉素抗性标志的缺失突变载体pUCluxKO。将突变载体转化到含完整LuxS基因的突变受体变形链球菌标准株中，红霉素筛选出LuxS基因缺失的变形链球菌突变株，并经PCR、生物荧光检测及DNA测序鉴定。结果构建的突变载体经限制性内切核酸酶酶切分析显示，产生的条带与设计结果完全一致。PCR方法扩增突变株LuxS和Eym＇基因显示，LuxS基因已被完整敲除掉，经生物荧光检测，突变株不能诱导哈氏弧菌（Vibrio hazy／）BB170的生物发光，说明不能产生信号分子AI-2（autoinducer-2）。DNA测序证实筛选得到了LaxS基因缺失的变形链球菌突变株。连续传代培养后证实，变形链球菌LaxS基因突变株具有良好的稳定性。结论成功构建出LaxS基因缺失的变形链球菌突变株，为研究LaxS基因对变形链球菌致龋毒力的影响奠定了基础。

摘要：背景:前期实验已经成功制备甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅(PMMA/SiO2)纳米复合材料,并证实其有良好的机械性能。目的:进一步评价气流分散PMMA/SiO2纳米义齿树脂的生物安全性,为今后开展临床实验提供研究依据。设计、时间及地点:随机分组设计,对比观察实验,于2006-09/2007-10在天津医科大学基础医学院微生物实验室及公共卫生学院毒理实验室完成。材料:采用气流分散法,以纳米SiO2与甲基丙烯酸甲酯复合制备PMMA/SiO2纳米义齿树脂。方法:参照IS07405-1997(E)标准,对气流分散PMMA/SiO2纳米义齿树脂材料进行细胞毒性实验、溶血实验、急性全身毒性实验、口腔黏膜刺激实验以及皮肤致敏实验,初步评价其生物安全性。主要观察指标:MTT法测定细胞相对增殖率并评级;溶血实验测定溶血率;急性全身毒性实验观察小鼠一般状态及体质量变化;口腔黏膜刺激实验观察试件接触部位组织切片;皮肤致敏实验观察致敏区红斑及水肿反应。结果:细胞毒性实验表明PMMA/SiO2纳米材料的细胞毒性为1级,显示极轻微的细胞毒性;溶血实验显示其溶血率小于5%;急性全身毒性实验和口腔黏膜刺激实验显示材料实际无毒、无明显黏膜刺激性;皮肤致敏实验显示无明显致敏性。结论:气流分散PMMA/SiO2纳米义齿树脂具有良好的生物安全性。

摘要：背景:目前广泛应用于临床的纯钛和Ti-6Al-4V种植体材料中存在着铝和钒的潜在毒性及弹性模量太大易造成界面应力屏障等问题。目的:对自行研制的新型钛合金Ti-30Nb-8Zr-2Mo进行硬度及弹性模量性能测试。设计、时间及地点:观察实验,于2003-03/2006-02在河北工业大学材料学实验室完成。材料:钛合金制备用原材料海绵钛纯度≥99%、钼粉纯度≥99%、铌条≥99.9%、海绵锆≥99.4%。方法:在均匀化退火、热煅、固溶后对试样显微硬度进行测量,对时效后的样品进行压缩试验。主要观察指标:硬度值和应力应变曲线。结果:研究显示800℃0.5h固溶后得到最大程度的强化合金,固熔合金硬度变化不大,时效后硬度显著增强,试样的抗压强度为1054MPa,压缩弹性模量达到16.5GPa。结论:自行研制的新型钛合金Ti-30Nb-8Zr-2Mo硬度和弹性模量均达到种植体材料的性能要求。

摘要：背景:甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米复合材料已通过了包括细胞毒性试验、溶血试验、急性全身毒性试验、口腔黏膜刺激试验、皮肤致敏反应试验的生物安全性检测。目的:采用小鼠骨髓微核试验进一步探讨聚甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米义齿树脂对细胞遗传物质可能产生的损伤作用。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-11/2008-01在天津医科大学公共卫生学院毒理实验室完成。材料:SPF级昆明小白鼠50只,随机分为5组:阴性对照组,低、中、高剂量混悬液组,阳性对照组,10只/组。聚甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米义齿树脂由天津医科大学口腔医院制备。方法:将聚甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米义齿树脂材料粉碎成细小颗粒,过筛后加入生理盐水形成混悬液,质量浓度为0.3g/mL。阴性对照组灌胃生理盐水;低、中、高剂量混悬液组分别按15.0,7.5,3.75g/kg灌胃混悬液进行染毒;阳性对照组腹腔注射环磷酰胺,按40mg/kg给药。第1次染毒后24h再次染毒,末次染毒后6h取材,取胸骨骨髓加入胎牛血清制备涂片,Giemsa染色。主要观察指标:每只小鼠骨髓涂片计数1000个嗜多染红细胞,记录含微核的嗜多染红细胞数,求出微核率。结果:阴性对照组微核率为0.248%,阳性对照组为4.384%,低、中、高剂量混悬液组微核率分别为0.150%,0.254%,0.277%。与阴性对照组比较,低、中、高剂量混悬液组微核率无明显变化(P>0.05),阳性对照组微核率显著升高(P<0.01)。结论:聚甲基丙烯酸甲酯/二氧化硅纳米义齿树脂对小鼠细胞染色体无明显的诱变效应,具有较好的生物安全性。