摘要：天津市肿瘤医院、天津市肿瘤研究所原有的动物实验室是利用研究所楼内的普通房间在 80年代中期临时改建的。房间面积窄小 ,设施条件差 ,通风不良 ,动物室与实验室也极不配套 ,达不到等级实验动物设施的要求。由于动物实验条件所限 ,很多科研项目不得不暂停下来或者改变计划 ,这种情况严重制约并影响了我所科研工作。为了更好地贯彻落实国家《实验动物管理条例》和卫生部《医学实验动物管理实施细则》 ,促进我院医疗、教学、科研、预防工作的全面发展 ,我所实施了实验动物室清洁级设施改建工程。我所改建的实验动物设施是在原有动物室的基础上 ,增加了面积、使用功能和等级条件。按设计的指导思想和原则 ,使整体条件达到了清洁级水平。1　区域设置　　我所改建的实验动物设施基本上是在原有的动物室基础上 ,增加面积、使用功能和等级条件。1 1　前　区 :外走廊、库房、办公室。1 2　后勤区 :洗刷室、消毒室、淋浴室。1 3　动物实验区　　 (1 )饲育 (一 )、(二 )室 :缓冲间、清洁更衣室、饲育室。(2 )裸鼠室 :缓冲间、清洁更衣室、裸鼠实验室。(3)实验 (一 )、(二 )室 :缓冲间、清洁更衣室、实验室。(4)大动物实验室 :...

摘要：目的:构建iASPP真核表达载体,稳定转染小鼠成纤维细胞(NIH3T3)并检测其表达,观察其对NIH3T3细胞增殖的影响。方法:设计引物以源克隆PCMV-iASPP为模板PCR扩增其中的CDS区,亚克隆入FLAG-pcDNA3.0,将该重组质粒转化DH5α感受态大肠埃希菌,筛选阳性克隆,经酶切、测序鉴定后,用脂质体介导转染NIH3T3细胞,G418加压筛选28 d,RT-PCR、West-ern blotting检测基因、蛋白表达;MTT法观察细胞增殖能力。结果:重组质粒鉴定正确,筛选所得阳性克隆中可以检测到iASPP基因的转录和表达,且该iASPP阳性表达细胞株增殖能力明显增强。结论:成功构建iASPP真核表达载体并成功构建稳定表达iASPP的NIH3T3细胞株,证明该基因的稳定表达在体外能显著增强NIH3T3细胞增殖能力。