摘要：目的建立水产品中5种常见致病菌的自动化快速高分辨检测手段,提高水产品致病微生物检测的效率和准确性。方法设计引物对霍乱弧菌、副溶血性弧菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌的特异基因owpW、tlh、invA、femA、prfA进行多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增;设计特异探针以PCR产物为模板进行单碱基延伸,延伸产物在基质辅助激光解吸飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)上进行检测。基因owpW、tlh、invA、femA、prfA的探针分子量分别为4848、5435、5890、6560、7096 Da,单基因延伸后探针的分子量分别为5119 Da(加A)、5697 Da(加T)、6137 Da(加C)、6822 Da(加T)、7383 Da(加G)。最终确定的体系方法通过重现性试验、特异性试验、灵敏度试验、人工污染水产样本检测试验进行验证。结果以混合5种菌DNA的样本为模板做核酸质谱检测,对应的5个探针可以同时延伸,延伸效率大于80%,在以干扰菌为模板的样本中不会检出上述5种菌,检出沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌、副溶血性弧菌、霍乱弧菌的灵敏度分别可达到150、350、160、130、180 CFU/mL。结论此方法展现出良好的重现性、特异性和灵敏度,可以满足一次反应同时检测水产品中上述5种微生物的需求。

摘要：目的建立一种快速、敏感、特异的肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157:H7的交叉引物等温扩增(Cross Priming Amplification,CPA)检测方法。方法根据EHEC O157:H7 stx1基因特征性保守序列(Gen Bank83460),设计交叉引物、剥离引物和检测探针,建立了EHEC O157:H7的CPA检测技术。用该方法检测19株细菌常见的食源性细菌,以验证其特异性;并用菌液浓度梯度稀释的方法对该方法的检测灵敏度进行评价。并通过60份食品模拟样品验证其在实际应用中的可性行,该检测结果与经典的细菌分离培养鉴定方法及常用的荧光定量PCR法进行比较。结果在检测的19株细菌中,只有EHEC O157:H7菌株的检测结果为阳性。其它菌株检测结果均为阴性,证明其特异性良好;通过浓度梯度稀释证明该方法检测的灵敏度可达l02cfu/m L;与分离培养鉴定法及荧光定量PCR法比较,其检测的灵敏度均为96.77%和96.67%、特异度分别为93.10%和90%、准确性分别为95%和93.33%。结论用于EHEC O157:H7的CPA检测体系具有简便、快速、灵敏、特异的优点,可用于进出境口岸现场及食品EHEC O157:H7的快速检测。

摘要：目的在本研究中,我们创造性地提出将胶体金技术联合RNA非扩增等温检测技术,进行病原体核酸检测。方法通过对目的基因的DNA和RNA分别分析,进行探针设计并进行DEMBA检测,建立胶体金技术联合RNA非扩增等温检测技术,并对特异性和灵敏度进行评估。结果该方法的检测时间在15分钟以内,并且具有高灵敏度和特异性,该方法对于单链核酸的检测具有可行性和可靠性。结论该反应体系简单,操作简单,检测时间极短,具有应用推广价值。

摘要：本文旨在探索虚拟现实(virtual reality,VR)技术在海关教育培训领域中提高学习效果、培训效率和实用性方面的潜力,解决传统教育培训方式存在的短板。文中概述了VR技术的概念、发展和应用,以及其在教育领域中的优势,设计了一套基于VR技术的海关教育培训方案,并在实验室环境中进行了测试。测试结果表明,与传统教育培训方式相比,基于VR技术的海关教育培训方案在提高学习效果和培训效率方面具有显著优势。本研究通过实证研究验证了VR技术在海关教育培训领域的应用潜力,探索VR技术在海关教育培训中的具体应用方式和实现方法,为提升海关教育培训水平提供了新的思路和工具。

摘要：全球化背景下,卫生检疫工作人员通过对出入境人员及其携带/托运行李物品进行健康检查和疫情监测,防止传染病输入和传播。对于需要对内部进行取样的物品(如水果、肉类、鱼类等),常用手工操作,使用刀类工具切开后对物品进行人工取样,检测是否携带病原微生物。但近距离取样存在对传播途径等流行病学特征未明确境外新发传染病感染的风险,因此亟需更方便、安全取样装置。笔者设计了一种取样装置,现介绍如下。