摘要：目的:构建CXCL12-KDEL融合基因绿色荧光蛋白表达载体并鉴定其在人舌癌细胞株Tb3.1(以下简称Tb3.1)中的表达。方法:设计特定引物,以人基因组DNA为模板,PCR扩增目的基因CXCL12-KDEL,经纯化的目的基因连接19T载体,插入pIRES2-EGFP表达载体中,使用Bgl Ⅱ/Sal Ⅰ进行双酶切,酶切初步鉴定后,测序鉴定。测序正确的重组质粒经脂质体(Lipofectamine^(TM)2000)介导体外转染Tb3.1,转染48h及72h在倒置荧光显微镜下观察。利用Western-blot检测重组质粒CXCL12-KDEL表达情况。结果:经酶切及测序鉴定证实目的基因(CXCL12-KDEL)已成功扩增并插入重组质粒;重组质粒转染Tb3.1细胞,倒置荧光显微镜下可见绿色荧光,Western-blot检测转染可见E-tag蛋白表达。结论:成功构建了CXCL12-KDEL融合基因绿色荧光蛋白表达载体,为进一步完成CXCL12-CXCR4生物学轴的阻断实验奠定了基础。