摘要：采用序贯设计对以牛乳和豆乳为原料研制混合乳开菲尔的发酵条件进行了优化。首先应用部分析因设计对影响开菲尔发酵的牛乳与豆乳比例、酵母接种量、乳酸菌接种量、蔗糖添加量、发酵温度、发酵时间6个因子进行了分析,筛选出蔗糖添加量和发酵时间为显著因子,然后通过最陡爬坡设计逼近最大响应区域,应用中心复合设计法确定蔗糖添加量(x4)和发酵时间(x6)的最佳组合,最终得到混合乳开菲尔发酵的最优发酵条件为牛乳与豆乳比例为7∶3,酵母接种量为1.00×105 CFU/mL,乳酸菌接种量为1.00×107 CFU/mL,蔗糖添加量为1.6%,发酵温度为22℃,发酵时间为22 h。

摘要：利用兼并引物从西维因单克隆杂交瘤细胞的cDNA中克隆得到抗体基因的轻链可变区(VL)和重链可变区(VH),长度分别为324bp和360bp,将其分别连接入pGEM-T-Easy载体进行测序;根据测序结果设计特异性引物和连接序列(Gly4Ser)3,利用重叠延伸PCR扩增得到长度为729bp的单链抗体基因片段(scFv),亚克隆至原核表达载体pET30a(+),并转化感受态细胞BL21(DE3)进行诱导表达;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示,重组表达单链抗体形成包涵体,分子量大小约为33kDa,变性后利用不同条件进行复性,结果显示最佳复性时间为48h,最佳起始蛋白浓度为200μg/mL,含有精氨酸的复性液效果最佳;利用亲和层析纯化scFv,并利用竞争ELISA检测其活性,结果显示该scFv对西维因具有良好的亲和性和特异性。

摘要：根据相近物种的同类基因设计引物,从凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei肌肉组织中克隆获得原肌球蛋白基因(TPMS),长度为901bp,其中包含长度为852bp的完整开放阅读框,编码原肌球蛋白分子量为32.8kDa;RT-PCR结果显示,原肌球蛋白在心、肝胰腺、胃、鳃、肠和肌肉组织中均有表达,在肌肉中表达量最高,在鳃中表达量最低;将原肌球蛋白基因构建原核重组表达载体TPMS-pET30a,转化受体菌株BL21(DE3)并利用IPTG诱导后能够大量表达,蛋白分子量为38.2kDa;经优化,IPTG的最适诱导浓度为0.05mmol/L,最适诱导时间为4h;经过亲和纯化后,能够得到纯度90%以上的重组表达蛋白。

摘要：采用响应面分析法对出芽短梗霉生产普鲁兰多糖的发酵培养基进行优化。采用Plackett-Burman实验筛选出影响普鲁兰多糖产量的主要因素为蔗糖、NaCl和FeSO4,利用最陡爬坡路径逼近响应区域,应用Box-Behnken设计和响应面分析优化得到最佳发酵培养基,发酵单位较优化前提高了30.1%。

摘要：采用CTAB方法从转基因大豆中提取DNA,根据草甘膦抗性基因设计引物,利用PCR从大豆DNA中扩增获得特异性目的基因,将该基因片段连接至表达载体pET-30a(+)中,并转化感受态细胞BL21(DE3)进行诱导表达,对诱导剂浓度和诱导时间进行优化。利用纯化后的液体重组蛋白和SDS-PAGE切胶蛋白2种形式抗原免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并利用ELISA对抗体效价进行测定。研究结果表明,利用PCR从转基因大豆DNA中扩增出长度为1529bp的草甘膦抗性基因片段,经过重组表达获得分子量为55ku的重组蛋白,IPTG的最佳诱导浓度为0.1mmol/L,最佳诱导时间为4h,亲和纯化后其浓度为5.0mg/mL;经免疫,2种形式抗原获得的多抗效价分别达到1∶2400000和1∶800000。

摘要：从天津市市内6区和塘沽区各农贸市场购买肉蛋类样品共计78份,利用国标方法从中分离沙门氏菌,根据种内特异性基因片段设计3对引物利用PCR方法对分离菌株进行鉴定,结果共鉴定沙门氏菌4株;利用结晶紫染色方法对4株沙门氏菌菌膜形成能力进行鉴定,其中2株菌膜形成能力较强。该试验结果能够有效反映天津市内肉蛋类食品卫生状况,并对沙门氏菌的控制提供有益参考。

摘要：以亚麻饼粕为原料,采用超声辅助―碱提酸沉方法对亚麻粕分离蛋白提取工艺进行研究。分别对料液比、pH、超声功率、提取时间进行单因素实验,根据L9(34)设计正交试验,得到最优提取条件为:料液比1∶30(W/V)、提取pH 9.5、超声功率360 W、提取时间60 min;在此条件下进行验证试验,通过二次浸提,亚麻粕分离蛋白提取率可达75%。超声提取时间仅为非超声提取时间1/3,超声提取率提高35%;由此可见,超声提取亚麻饼粕分离蛋白是一种高效高提取率方法。

摘要：根据莎稗磷的化学结构特征,设计合成莎稗磷半抗原,采用活化酯法与牛血清白蛋白偶联,免疫新西兰大耳白兔获得抗莎稗磷多克隆抗血清用于免疫分析试验。抗血清效价高达1∶160 000,100μg/L莎稗磷的抑制率达到了59.76%。抗体经Protein A-Sepharose 4B亲和层析柱纯化后,50μg/L莎稗磷的抑制率提高到92%,其它有机磷农药及结构类似化合物与抗体的交叉反应率均小于0.01%,表明了所制备莎稗磷抗体的高特异性。

摘要：以亚麻饼粕为原料,采用超声辅助-碱提酸沉的方法对亚麻饼粕蛋白的提取工艺条件进行研究。对影响提取率的四个主要因素:料液比、pH值、超声功率、超声时间分别进行单因素实验,根据L9(34)设计正交试验,得到最佳提取条件为:料液比1∶30、提取pH值9.5、超声功率360W、超声时间60min。在此条件下,亚麻饼粕蛋白提取率可达46.4%。超声提取时间仅为非超声提取时间的三分之一,超声提取率提高20.7%。由此可见,超声提取亚麻饼粕蛋白是一种高效高提取率的提取方法。

摘要：利用响应面分析方法优化大豆异黄酮超声辅助提取最佳工艺条件。在单因素实验基础上采用Box-Behnken设计、响应面分析统计学方法对工艺参数进行优化。确定最佳工艺条件为:料液比为1.5:10g/mL,选取提取温度为65℃,提取时间为2.5h,乙醇浓度为65%。在此条件下,腐乳中大豆异黄酮的提取率为2.884mg/g,与预测值吻合。超声波辅助提取是一种快速提取及测定腐乳中大豆异黄酮的方法。