摘要：目的利用转录组测序技术,筛选重组人甲状旁腺素(1-34)[rhPTH(1-34)]影响角质形成细胞(KC)内表皮生长因子受体(EGFR)表达的差异转录因子,以探讨rhPTH(1-34)治疗银屑病的机制。方法慢病毒转染培养的HaCaT细胞,使之过表达EGFR。rhPTH(1-34)组加入0.01μmol/L rhPTH(1-34),空白组加入等量DMEM溶液。抽提两组细胞RNA,用紫外吸收测定法和变性琼脂糖凝胶电泳法进行RNA产量和质量检测。合成cDNA,实时定量PCR扩增,对文库有效浓度进行准确定量。上机测序,对所得数据进行处理和分析。用DESeq2软件分析两组数据之间的差异,以|log_2foldchange|≥1且P<0.05作为筛选条件对测序结果进行分析。结果rhPTH(1-34)组和空白组共表达的基因数目12455个,rhPTH(1-34)组单独表达421个,空白组单独表达461个。rhPTH(1-34)组与空白组比较,差异基因共185个,其中108个上调,77个下调。下调中,|log_2foldchange|最高的5个差异转录因子为ZNF525、ZNF774、ZNF576、ZBTB42和POU4F1(P<0.05)。其中ZNF774、POU4F1主要涉及Notch2、MAPK信号通路的调节。结论rhPTH(1-34)抑制KC增殖可能与下调ZNF525、ZNF774、ZNF576、ZBTB42、POU4F1表达有关。其中ZNF774、POU4F1可能与KC增殖相关。

摘要：目的:应用星点设计-效应面法筛选复方益肾利石颗粒的最佳成型工艺。方法:以成型率、吸湿性、流动性和溶化性为评价指标,采用手工湿法制粒,考察辅料用量、润湿剂用量及浓度等影响颗粒剂成型的关键因素水平。利用星点设计-效应面法,以成型率、水分、吸湿性、溶化性、休止角、卡尔系数的总评归一值为评价指标,对辅料比(麦芽糊精占总辅料量的百分比)、药辅比(辅料量占总制剂处方的百分比)和乙醇含量(润湿剂浓度)等成型参数进行考察。结果:根据综合评分结果,优选得到复方益肾利石颗粒的最佳成型工艺为:辅料比60%,药辅比30%,乙醇浓度24%。3批验证得综合评分平均值为78.96,理论预测值为74.37,偏差率为2.99%,结果与预测值相对标准偏差均小于5%。结论:优化的最佳成型工艺稳定、可行,且得率高,重复性好,为院内制剂复方益肾利石颗粒剂制备工艺的确定及生产条件的控制提供了依据。