摘要：目的探讨脑出血发生进展过程中的关键基因及信号通路。方法从GEO数据库获取脑出血基因信息,并使用R语言进行分析。筛选出脑出血样本和正常样本的差异表达基因(DEGs),采用基因本体论(GO)富集分析和京都基因和基因组数据库(KEGG)通路分析,并进行基因集富集分析(GSEA)和基因集变异分析(GSVA),构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络并筛选出核心基因(Hub基因)。构建脑出血大鼠模型,同时取脑出血组大鼠的出血区附近脑组织和对照组大鼠0.9%氯化钠注射液对照注射区附近的脑组织进行实验,对排名前4的Hub基因表达水平进行实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)验证。结果共筛选出177个DEGs,其中137个表达上调,40个表达下调,GO富集分析显示最主要的生物学功能包括白细胞迁移、趋化性、趋性、白细胞趋化性等,KEGG通路分析显示主要的通路包括细胞因子间受体互相作用、病毒蛋白与细胞因子及受体间相互作用、疟疾、类风湿性关节炎、军团菌病等。GSEA显示脑出血数据集的基因显著富集在白细胞介素(IL)-18信号通路、转化生长因子-β(TGF-β)受体信号通路、肿瘤蛋白53(TP53)通路、Janus激酶(Jak)-信号转导及转录激活因子(STAT)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)6和MAPK4信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-蛋白激酶B(AKT)信号通路等生物学相关功能和信号通路。GSVA显示活性氧物种途径、未折叠蛋白反应、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白1(mTORC1)信号通路、IL-2/STAT5信号通路、炎症反应、凋亡、IL-6/Jak-STAT3信号通路、TGF-β信号通路等通路在脑出血中差异有统计学意义(均P<0.05)。Hub基因关联程度从高到低依次为IL-6、CCL2、IL-1β、CXCL8、CXCL1、CXCR4、ITGAM、TLR2、VCAM1、CD163。qRT-PCR实验证实,与对照组大鼠相比较,IL-6、CCL2、IL-1β、CXCL8的mRNA表达水平在脑出血组大鼠出血区附近的脑组织中明显上调(均P<0.05)。结论脑出血发生发展中的关键基因为IL-6、CCL2、IL-1β、CXCL8,主要信号通路包括炎症反应、Jak-STAT信号通路、TGF-β信号通路等。

摘要：目的:探讨心脏死亡器官捐献(DCD)肾移植术后患者血清金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)和胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)对术后肾功能延迟恢复(DGF)的预测价值。方法:采用前瞻性研究设计,选取2018年1月至2020年10月宁波大学附属李惠利医院收治的DCD肾移植患者。纳入标准:①数据资料完整;②术后早期未发生影响移植肾功能的严重并发症。排除标准:①数据资料不完整;②患者不能或不愿配合研究;③术后早期发生影响移植肾功能的严重并发症。用ELASE法定量检测患者肾移植术后6、12、24、48、72 h以及术后7 d的血清TIMP-2和IGFBP7水平,监测同期及术后21 d血肌酐值。根据DGF的发生情况,分析不同时间点TIMP-2和IGFBP7测量值以及二者乘积(TIMP-2×IGFBP7)对肾移植术后发生DGF的预测能力。采用受试者工作特征(ROC)曲线和曲线下面积(AUC)评价TIMP-2和IGFBP7对DGF的诊断效能。结果:共纳入33例患者,DGF组7例(21.2%),非DGF组26例(78.8%),两组的性别(男/女:3/4例与10/16例)、年龄[48(34~56)岁与45(23~61)岁]、供体肾小球滤过率[98.5(15.8~132.5)ml/(min·1.73m 2)与79.1(60.6~102.5)ml/(min·1.73m 2)]、术前肌酐[1114.0(731.4~1293.0)μmol/L与858.4(657.6~1051.9)μmol/L]、术前尿素氮[15.0(13.2~19.6)mmol/L与17.3(13.6~20.9)mmol/L]、术前白蛋白[43.5(38.5~45.3)mmol/L与41.2(37.5~46.1)mmol/L]、透析方式(血透/腹透:3/4例与9/17例)、术中热缺血时间[6(5~7)min与5(4~6)min]差异均无统计学意义(P>0.05)。DGF组血清IGFBP7、TIMP-2×IGFBP7值在各个时间点均高于非DGF组(F=15.753,P=0.040;F=13.000,P=0.024),而两组间血清TIMP-2差异无统计学意义(F=1.157,P=0.075)。对DGF的诊断价值,血清IGFBP7在术后48 h的AUC为0.863(95%CI 0.696~1.000,P=0.004),以5.97 ng/ml为界值时,敏感性为85.7%,特异性为80.8%;TIMP-2×IGFBP7在术后48 h的AUC为0.819(95%CI 0.641~0.996,P=0.011),以62.06(ng/ml)2为界值时,敏感性为71.4%,特异性为80.8%;两者的AUC比较差异无统计学意义(P>0.05)。DGF组术后7 d血清IGFBP7与肌酐动态变化曲线存在差异,且术后7 d血清IGFBP7与术后21 d肌酐值成正相关(r=0.808,P<0.05)。结论:血清IGFBP7和TIMP-2×IGFBP7能够较准确、敏感地早期预测DCD供肾术后DGF的发生,预测价值随时间变化,以术后48 h和术后7 d最有价值。血清TIMP-2无预测价值。