摘要：肿瘤异质化和每位患者的特异性是肿瘤研究和治疗中的重要挑战,而个性化精准诊疗是解决这一挑战的关键途径之一.本研究中,设计制备了基于聚氨基酸的肿瘤靶向传递体系,利用ε-聚-L-赖氨酸负载敲除促进肿瘤发展的黏蛋白1(MUC1)的CRISPR-Cas9质粒,外层修饰键接了AS1411适配子的透明质酸,通过靶向肿瘤细胞表面过表达的核仁素(nucleolin)和CD44实现对肿瘤细胞的特异性高效传递和基因编辑.进一步,利用这一靶向传递载体负载检测MUC1、肺转移标志物组织蛋白酶C(CTSC)、骨转移标志物锯齿状典型Notch配体1(JAG1)的mRNA的3种分子信标,对基因编辑效果进行检测.针对肿瘤细胞系BT549及乳腺癌患者外周血中的循环恶性细胞开展了基因编辑及疗效评估研究,结果表明,基因编辑传递体系可以有效靶向恶性细胞,敲除MUC1基因,抑制MUC1的表达、显著下调肺转移和骨转移标志物.本研究利用少量全血进行个性化体外研究,可便捷高效地评估特定治疗措施的疗效,为肿瘤个性化精准治疗提供依据和参考.

摘要：医学细胞生物学是医学类专业重要的基础课程,知识点繁多、思政元素丰富,是课程思政融入的良好载体。文章从开展医学细胞生物学课程思政的必要性出发,阐述了其课程思政教学模式的优化实践,即在教学目标设计中凸显思政导向、在教学内容中深入挖掘思政元素、灵活运用教学方法有效融入思政元素并在课程考核中融入思政评价点。最后对该课程思政的实施效果进行总结和反思,以期实现价值引导与知识传授相统一的人才培养目标。

摘要：目的 设计合成3种利福霉素S衍生物,进行牛奶外泌体负载,并评价其体外抗菌活性。方法 合成利福霉素S衍生物,利用质谱和核磁进行化合物表征;使用稀释测定法测定3种利福霉素S衍生物对金黄色葡萄球菌(金葡菌)和铜绿假单胞菌的抑菌活性,并计算半抑制浓度(IC_(50));选择抗菌活性优异的衍生物,采用超声法将其负载到牛奶外泌体内,制备牛奶外泌体负载的利福霉素S衍生物,并采用稀释测定法测定其抗金葡菌活性;采用平板菌落计数法检测其对巨噬细胞内驻留金葡菌的抑菌作用。结果 成功合成3种利福霉素S衍生物,相较于母体化合物,利福霉素S衍生物对金葡菌(母体化合物的抗菌活性仅为3种衍生物抗菌活性的1/2~1/80)和铜绿假单胞菌(母体化合物的抗菌活性分别为利福霉素S衍生物1和3的1/14和1/9)的抑菌活性显著提高。成功实现牛奶外泌体对利福霉素S衍生物3的负载,负载率为10.9%。外泌体负载后的化合物对体外金葡菌和巨噬细胞内驻留的金葡菌的抗菌活性显著增强。结论 设计合成的利福霉素S衍生物具有更强抗菌活性,且外泌体负载后可增强其对胞外和胞内的抗菌活性。

摘要：目的设计一种处理功能磁共振成像(f MRI)同步输出信号的同步器,对其解决同步问题的性能进行鉴定。方法f MRI在采集图像数据时,有两种同步信号输出方式:其一,采集一幅完整脑图时,每采集一层图像输出一个同步方波信号;其二,采集完一幅脑图输出一个同步信号。首先设定一幅完整脑图的采集层数,也称同步参数(SP);然后采集第一种同步方波信号,用单片机外部中断方法对第一种同步方波信号的上升沿计数,并保持初始输出为高电平;直到最后一层脑图时,将输出信号置为低电平并延时一段时间。结果同步器成功将第一种同步方波信号处理成第二种同步信号;matlab编程串口程序自动化设定SP,通过串口传输至单片机;结果表明该同步器可自动化设置SP。结论设计的同步器能使某类功能磁共振输出同步信号的同步问题得以解决,设备兼容性得到提升,其自动化设置SP,可减少医护人员的工作量。

摘要：开展创新创业教育,是国家实施创新驱动发展战略、促进经济提质增效升级的迫切需要,是推进教育综合改革的重要举措。创业环境作为一种重要的创业生态资源,在很大程度上影响着大学生的创新积极性、主动性和创造性,最终影响大学生创业行为的效率和效益。创业教育的过程具有生态系统的整体性、环境适应性、动态性等特征。参照美国等发达国家创业生态环境建设案例,可从创业意识、创业科技、创业金融、创业组织等方面吸取经验教训,构建完善的创业生态环境。

摘要：将科研课题和细胞生物学实验教学有机融合,依托安徽医科大学大型仪器共享平台,设计了以逆转肿瘤细胞多药耐药性为目标的细胞生物学实验。实验课前以视频形式介绍背景知识,课上进行详细的理论讲解,结合实验目的启发学生设计实验方案,以问题为导向进行授学,夯实所学知识点;采用多元评价考核体系,提高学生学习的主动性;让大型仪器参与本科实验教学,激发学生学习兴趣。实践表明,教研融合的细胞生物学实验对于培养学生科研思维和创新创造能力作用显著,以科研带教学,以教学促科研取得了良好效果。

摘要：目的研究补体成分C3及其缺失突变体C3(1-840)、C3(824-1663)在真核细胞内的表达及与氯离子通道蛋白(CLIC1)的共定位。方法构建pc DNA3.1-C3-FLAG、pc DNA3.1-C3(1-840)-FLAG、pc DNA3.1-C3(824-1663)-FLAG三个真核表达质粒(缺失突变体根据C3的结构域及其裂解断裂位置设计),并分别转染至HEK 293T细胞中,Western blot检测表达情况;上述质粒分别瞬时单转至COS7细胞和分别与GFP-CLIC1共转至COS7细胞内,观察共定位情况。结果成功构建带FLAG标签的C3基因及其两个缺失突变体[C3(1-840)、C3(824-1663)]的真核表达载体,Western blot结果显示它们在HEK 293T细胞中均能成功表达;免疫荧光显示它们在COS7细胞中均主要分布于细胞质,且三个真核表达载体中只有C3(824-1663)与CLIC1有共定位。结论补体C3及其缺失突变体C3(1-840)和C3(824-1663)在HEK 293T、COS7细胞中均能高效表达,且主要分布在细胞质内,C3(824-1663)与CLIC1蛋白有共定位。

摘要：目的研究人视网膜母细胞瘤蛋白1羧基端(RB1-C)磷酸化位点突变体的蛋白表达和细胞定位情况及其与迟发性脊椎骨骺发育不良病蛋白(Sedlin)共定位的变化情况。方法设计RB1-C磷酸化位点突变体的引物,以质粒pcDNA3.1-FLAG-RB1-C为模板,利用PCR技术分别扩增出pcDNA3.1-FLAG-RB1-C-S788A、S795A、S807A、T811A、T821A、T826A共6个突变体,并对各位点进行测序。分别将以上突变体单独转染至HEK 293T、COS7细胞中,利用Western blot和免疫荧光(IF)技术观察其蛋白表达和细胞定位情况;分别将以上突变体及Sedlin共同转染至COS7细胞中,利用IF技术观察二者在细胞内的共定位情况,并与野生型RB1-C的结果进行比较分析。结果测序结果显示RB1-C的6个磷酸化位点均突变成功,并能够在真核细胞内正常表达,且与野生型RB1-C的细胞定位基本一致,即主要定位在细胞核内。与野生型RB1-C相比,RB1-C-S788A、S795A、T821A、T826A与Sedlin的共定位未发生改变,即主要共定位在细胞核内;但RB1-C-S807A、T811A与Sedlin的共定位发生了显著变化,除了共定位于细胞核外,在细胞质中也存在共定位现象。结论RB1-C磷酸化位点突变体成功构建并表达,其中S807A、T811A两个磷酸化位点的突变能够显著改变RB1-C与Sedlin在细胞中共定位区域,表明它们是RB1-C和Sedlin结合的关键位点之一,为进一步研究RB1-C和Sedlin的相互作用奠定了基础。

摘要：目的用基因克隆方法构建带FLAG-tag的人金属硫蛋白2A(MT2A)真核表达载体,用其转染HEK 293T,COS-7细胞观察MT2A在增殖细胞内的表达和定位。方法设计带FLAG-tag的引物,以人MT2A全长cDNA序列的质粒为模板,PCR法扩增MT2A全长序列,然后插入pCDNA 3.1中构建pCDNA 3.1-MT2A-FLAG质粒;将构建的质粒转染至HEK293T细胞,提取总蛋白,进行Western blot检测;脂质体法转染至COS-7细胞,荧光显微镜下观察MT2A表达的蛋白在细胞内定位。结果正确构建了pCDNA 3.1-MT2A-FLAG质粒;其在HEK 293T细胞中能有效地表达;免疫荧光实验表明在COS-7细胞中,MT2A主要分布在细胞质内。结论该研究结果为了解MT2A在细胞内与其他蛋白质相互作用及功能提供了一定的基础。

摘要：目的运用基因克隆技术构建带FLAG标签的腺苷酸激酶3(AK3)真核表达载体,观察其在哺乳动物细胞内的定位和表达情况。方法以人AK3全长的cDNA序列的菌液为模板,设计带有FLAG标签的引物,用PCR方法构建出真核表达载体pcDNA3.1-AK3-FLAG。运用免疫荧光及Western blot法检测其在哺乳动物细胞中的定位与表达情况。结果成功构建了pcDNA3.1-AK3-FLAG质粒;荧光定位试验表明AK3在COS7细胞的胞质中呈斑点状分布,细胞核中未见明显分布;Western blot法检测表明AK3在HEK-293T细胞中能有效表达。结论 AK3在哺乳动物细胞内能够有效表达和定位,为进一步研究AK3和其他蛋白之间的相互作用奠定了基础。