摘要：目的评价2种剂型的青蒿琥脂片在健康人体的生物等效性。方法采用单中心、随机、双周期、自身交叉的试验设计。36例健康男性志愿者单次口服试验制剂（青蒿琥脂片,每片含青蒿琥酯100mg）或参比制剂（青蒿琥酯片,每片含青蒿琥酯50 mg）,血浆样品采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定,计算两者的主要药物动力学参数,进行生物等效性评价。结果青蒿琥酯和双氢青蒿素的线性范围均为2-1000 ng·m L-1,最低定量浓度为2 ng·m L-1,批内及批间精密度RSD＆lt;15%;服用试验制剂和参比制剂后血浆中青蒿琥酯的Cmax分别为（321.36±148.23）、（321.3±182.34）μg·L-1;tmax分别为（0.59±0.69）、（0.77±0.65）h;t1/2分别为（0.72±1.57）、（0.35±0.24）h;AUC0-∞分别为（226.2±99.57）、（214.63±93.1）μg·h·L-1;AUC0-t分别（207.88±79.17）、（206.12±91.67）μg·h·L-1;试验制剂的相对生物利用度F0-t、F0-∞分别为（108.11±54.6）、（96.01±45.97）%;双氢青蒿素的Cmax分别为（1068.17±424）、（1118.75±545.02）μg·L-1;tmax分别为（0.9±0.43）、（1.09±0.62）h;t1/2分别为（1.47±0.48）、（1.38±0.42）h;AUC0-∞分别为（2187.26±683.78）、（2110.23±509.82）μg·h·L-1;AUC0-t分别（2179.14±683.03）、（2100.42±509.72）μg·h·L-1;试验制剂的相对生物利用度F0-t、F0-∞分别为（101.9±29.85）、（101.96±29.71）%。结论试验制剂和参比制剂具有生物等效性。

摘要：目的对分离培养的肺炎克雷伯菌菌株进行荚膜分型以判断不同荚膜型在其中的分布。方法对来源于北京地区的肺炎克雷伯菌菌株参照编码肺炎克雷伯菌荚膜多糖基因中一段wzc基因可变区(CD1-VR2-CD2)序列设计引物,运用PCR法扩增目的片段并进行测序,与已发表的荚膜型或NCBI数据库上比对测序结果,最终确定荚膜型别。结果在实验室保存的231株肺炎克雷伯菌中,有210株可用此法进行荚膜分型(分型率为90. 9%);在分出的40种不同的荚膜型中,K47为最常见的荚膜型别,占17. 1%(36/210);其次为K15型,占10. 5%(22/210),其他为K1和K2型,分别占5. 7%(12/210)和6. 6%(14/210)。结论基于荚膜多糖基因wzc可变区序列进行分型的方法操作简单,更有利于不同实验室之间的结果相互比较。另外,K47、K15、K1和K2型为临床肺炎克雷伯杆菌常见的荚膜型。

摘要：目的使用CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除人类肝癌细胞HepG2中的甲状腺激素受体相关蛋白3(THRAP3)基因,构建THRAP3基因敲除细胞系。方法根据CRISPR/Cas9靶点设计规则,设计特异性靶向THRAP3基因第3个外显子相关序列的多条小向导RNA,通过T7核酸内切酶筛选出切割效率最高的载体,构建pSpCas9-THRAP3真核重组表达质粒。测序鉴定后,将重组质粒转染至HepG2细胞中,用嘌呤霉素(puromycin)抗性筛选细胞株,挑取单克隆,再用PCR、测序等方法鉴定细胞基因型,免疫印迹方法鉴定细胞THRAP3敲除效果。使用高通量测序的方法进行基因表达分析。用流式细胞仪检测基因敲除对细胞周期的影响,CCK-8试剂盒检测细胞增殖。结果成功构建pSpCas9-THRAP3真核重组表达质粒,筛选出特异性敲除THRAP3基因的细胞系,验证了THRAP3敲除对细胞周期以及细胞增殖的影响。结论利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建并获得了THRAP3基因敲除细胞系并初步探究了THRAP3基因功能。