摘要：背景噪声会降低发声动物声音通讯质量,同时降低特定个体被捕食的风险。因此,发声动物如何响应被噪声掩蔽的同种声音是事关其生存与繁殖的决策过程,但尚不清楚雌雄两性如何响应被掩蔽的同种声音以及其响应是否存在性别差异。以安徽树蛙(Zhangixalus zhoukaiyae)为模型,回放同种广告鸣叫、异种广告鸣叫、白噪声及同种广告鸣叫与其他声音的组合声音,记录雌雄两性的行为响应,探究非同种声音对安徽树蛙雌性选择和雄性竞争的影响。结果显示:(1)雌性安徽树蛙更偏爱信噪比高的同种广告鸣叫;(2)雄性能动态调整竞争策略,且更偏爱响应被异种广告鸣叫重叠的同种广告鸣叫;(3)雌雄两性行为响应存在差异,此差异可能源自自然选择和性选择双重压力的综合作用。研究结果有助于更好地理解不同噪声对动物行为决策及种群分布格局的影响,并为物种保护提供有益参考。

摘要：锰过氧化物酶是真菌分泌的一种糖基化的含有血红素辅基的胞外蛋白,在染料降解和脱色过程中起着重要作用。本实验利用本实验室保存的的白腐真菌裂褶菌Schizophyllum sp.F17产锰过氧化物酶（MnP）,研究MnP的酶学性质,并对酶活条件进行优化。实验通过超滤浓缩、DEAE-纤维素、DE52离子交换层析和Sephadex G-75凝胶过滤等步骤,分离纯化得到电泳纯的锰过氧化物酶。该酶蛋白含量为23μg/mL,分子量大小为49.2kDa,在0.1mmol/L H2O2中半衰期为5～6min。Mn^2＋、H2O2以及酶的用量可以影响MnP酶促反应的效率,在单因子分析法的基础上,通过全因子中心组合设计响应面分析表明：H2O2以及H2O2与酶用量之间的交互作用对酶促反应的作用是最显著的。在优化条件下,酶对偶氮染料金橙G、刚果红显示出较强的脱色能力。

摘要：PRAS40为富含脯氨酸、分子量为40kD的Akt底物蛋白,能够与雷怕霉素哺乳动物细胞靶点复合物1(mTORC1)结合,其苏氨酸183位点(Ser183)可被mTORC1磷酸化。为了制备PRAS40(Ser183)磷酸化多克隆抗体,本实验通过蛋白疏水性抗原性分析设计多肽抗原,用其免疫家兔获得抗血清,ELISA检测其效价为1:10000;Western blotting法检测发现,通过rProtein A Sepharose亲和层析纯化并经非磷酸化的抗原条吸附处理后的抗体可以明显提高磷酸化抗体的特异性;用PRAS40抗体及PRAS40(Ser183)磷酸化抗体对正常细胞HL7702、HEK293及肿瘤细胞HepG2、A549、S180的检测显示:磷酸化的Ser183在不同细胞中表达差异不显著,而在经细胞饥饿处理的HEK293细胞中却明显观察到了S183磷酸化水平随氨基酸含量降低而减弱的现象。因此,本实验所制备的抗体可用于PRAS40(Ser183)磷酸化位点的功能研究。

摘要：厌氧芽孢杆菌属(Anoxybacillus)的菌株WP06是一株兼性厌氧的嗜热细菌,能利用木糖、阿拉伯糖和葡萄糖等产生乙醇。不像绝大多数嗜热细菌,WP06菌株在高温下表现出极高的乙醇耐受力,60oC时在8%的乙醇胁迫下才出现生长抑制现象,15%的乙醇胁迫下仍能生长,是目前已知的乙醇耐受力最高的嗜热细菌。WP06菌株突破了人们对高温下细菌耐受乙醇浓度的极限认识,是研究高温下乙醇耐受机制的良好出发菌株。

摘要：为了提高玫瑰色微球菌(Rosy Micrococcus)的脱氮效果,利用聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)、海藻酸钠(sodium alginate,SA)以及PVA+SA复合物对其进行固定包埋。应用正交与均匀设计法对固定化小球进行脱氮优化。结果表明,单独利用PVA与SA进行固定脱氮时,脱氮率最高分别达到29%与25%,而利用PVA+SA进行复合固定时,成球性能与脱氮率均优于单因子固定。复合固定脱氮的最优条件为:PVA 7.2%,SA 3%,Ca Cl23%,温度31℃,p H 7.2,胶菌比15%,小球数300个,脱氮时间48 h后脱氮率最高,达到48.9%。

摘要：【目的】采用Plackett-Burman Design(PBD)与均匀设计(Uniform Design,UD)优化玫瑰色微球菌(Micrococcus roseus)固定化脱氮的条件,以提高其脱氮性能。【方法】选择聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA)与海藻酸钠(Sodium alginate,SA)作为固定化细胞材料,研究其成球方式与性能,应用PBD对9个影响脱氮效果的因素进行显著性检验,筛选出PVA、SA、温度、菌液接种量、菌球量5个显著性因素(P<0.05)。采用UD对5个显著因素进行条件优化,优化数据通过Minitab与Matlab软件进行逐步回归分析,并建立二阶多项式模型。【结果】最优脱氮条件为PVA 9.6%、SA 2.2%、温度33.4°C、菌液接种量8%、菌球量500个/100 m L,连续脱氮72 h,最高脱氮率达到60.9%。【结论】PBD与UD的联合使用能够在显著因子筛选与寻优中发挥重要的作用。连续脱氮试验表明,玫瑰色微球菌去除氨氮主要通过同化、硝化与反硝化途径。

摘要：目的在酿酒酵母中分泌表达牛乳铁蛋白肽(bovine lactoferricin,LfcinB),并检测其活性。方法根据LfcinB的氨基酸序列,按照酿酒酵母密码子偏好性设计LfcinB基因序列,人工合成LfcinB基因,扩增后插入质粒pYES2-α中,构建重组表达质粒pYES2-α-LfcinB,转化至酿酒酵母INVSc1中,半乳糖诱导表达。采用抗生素微生物效价测定法中的管碟法一剂量法检测表达的LfcinB对大肠埃希菌DH5α和枯草杆菌的抑菌活性。对重组酵母菌的诱导时间、诱导剂浓度和诱导温度进行优化,并检测重组LfcinB的稳定性。结果重组表达质粒pYES2-α-LfcinB经双酶切和测序证明构建正确;重组酵母菌诱导表达产物可见相对分子质量分别为5 164和4 355的特异蛋白条带,每升工程菌发酵液中目的蛋白含量约为2.878 5 mg;表达的重组LfcinB对大肠埃希菌DH5α和枯草杆菌均有明显的抑菌活性;在诱导温度为26℃、半乳糖浓度为3%的条件下诱导96 h时,LfcinB的抑菌活性最高;重组LfcinB具有热稳定性,且二硫键的存在对其抑菌活性无影响。结论已成功在酿酒酵母中分泌表达了具有活性的LfcinB,为进一步研究LfcinB的生物功能及其应用奠定了基础。

摘要：基因工程技术的诞生使得生命科学发生了革命性的变化,并逐渐成为现代生物技术的核心,广泛应用于工农业、医药健康及环境等领域。基因工程作为生命科学相关专业的一门重要专业基础课程,具有专业性强、教学内容抽象、技术发展更新迅速等特点。课程组针对基因工程多元化的授课内容,通过精选并合理安排教学内容;充分发挥多媒体功能,辅助“线上”素材,深化原理与技术衔接;基于“生物技术科学史”,增强学生学习兴趣;拓展前沿知识,增强学生互动性和主动性等策略,探索多元化教学模式在基因工程教学中的应用,并进行了实践和总结。结果显示,这种多元化教学模式可以有效激发学生对基因工程原理及其应用方面知识的学习兴趣,教学效果良好。

摘要：通过构建Rac1突变体,研究Rac1激活对肾小球系膜细胞(MES)JAK2/STAT3信号通路的影响.以Rac1目的基因为模板,在引物中设计突变,扩增突变体Rac1(G12V)的目的基因,与PiggyBac(PB-FLAG)载体质粒连接,构建突变重组体PB-Rac1(G12V),并运用脂质体核酸试剂转染系膜细胞.比较正常组、Rac1(G12V)突变组中系膜细胞的ROS含量及NADPH氧化酶活性;Elisa法检测细胞因子TGF-β表达水平;Western blot法检测系膜细胞中JAK2/STAT3信号及FN蛋白的表达.结果表明,成功构建了Rac1(G12V)持续磷酸化突变体并在MES细胞中表达,与正常组相比,Rac1(G12V)激活突变MES细胞NADPH氧化酶的活性和ROS含量明显增加;JAK2/STAT3信号通路激活,TGF-β和FN表达明显增加.Rac1能激活系膜细胞氧化应激和JAK2/STAT3信号通路,并促进TGF-β及FN的表达.

摘要：针对生物技术制药课程中的基因工程制药知识模块,通过拓展教学思路、合理组织教学内容、实施进阶式引导教学,在基础阶段,以教授基因工程制药基本技术和理论为目的,建立双语教学和互动教学,引入前沿进展,夯实理论基础,并培养学生的自主学习意识;在进阶阶段,引入生产设计课程,实现理论和实践的无缝对接,培养学生的制药工艺创新能力;在升阶阶段,通过系列基因工程制药创新实验,培养学生的药物研发创新能力。实践结果显示,以基因工程制药原理为基础,通过引入前沿进展追踪最新发展方向,配套生产设计课程,并及时融入生物技术药物研发的实践操作,进阶式引导教学获得了良好的教学效果。