摘要：近年来毕赤酵母已成为一种优越的异源蛋白表达系统。而提高目的蛋白的表达水平,高密度发酵已成为关键技术环节之一。我们从毕赤酵母工程菌的选择、培养基的优化设计,以及发酵工程过程控制等方面简要阐述毕赤酵母的高密度发酵,并提出了工程菌在高密度发酵过程中存在的问题。

摘要：对抗氧化酶系统和非酶系统同时进行研究是揭示细胞衰老和凋亡的新途径。GLRX2和TXN1是人体细胞内有关氧化还原反应的基因,分别编码抗氧化酶系统成员硫氧还蛋白和非酶系统成员谷氧还蛋白。根据GenBank已登录的GLRX2和TXN1基因序列设计适合转导的引物,以人类Hela细胞cDNA为模板进行目的基因的序列扩增,将目的基因转入大肠杆菌受体细胞,克隆出具有目的基因的重组质粒。提取带有目的基因的质粒DNA,通过测序对所克隆的目的基因进行了鉴定。本实验结果为GLRX2和TXN1基因在细胞内的表达和氧化还原反应机制的研究奠定了基础。

摘要：TLR4是天然免疫系统中的一种重要模式识别受体,可选择性地识别病原微生物而启动天然免疫,在宿主天然免疫和获得性免疫中具有重要作用。山羊TLR4基因与多种疾病相关,然而,目前在山羊上关于TLR4基因敲除及相关功能的研究尚未见报道。采用CRISPR/cas9系统,首先设计TLR4基因的sgRNA片段,合成sgRNA核苷酸序列,构建同时表达sgRNA和Cas9 D10A的质粒PYSY-sgRNA,连接并转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,最后对转化子进行验证,提取质粒并转染山羊成纤维细胞,通过测序进行敲除检测。结果表明:酶切和测序鉴定证明TLR4基因敲除载体构建正确。说明采用CRISPR/Cas9构建的载体,可为后续研究TLR4在支原体肺炎感染的免疫应答分子机制提供理论依据。

摘要：为了对我国生态敏感区资源环境绩效进行定量分析,利用资源环境绩效指数(REPI)和相关理论对近8年来西藏自治区资源环境绩效进行了系统研究。结果表明:西藏的资源环境绩效水平逐步提高,主要污染物COD和SO2排放绩效呈现"N"型变动趋势;工业固体废物排放绩效呈现"S"型变动趋势;资源消耗和污染物排放绩效呈现不稳定变动态势,其中COD排放绩效指数在2001—2004年迅速超过西部地区、中部地区、全国和东部地区,2004年后高于西部地区、中部地区、全国,但明显低于东部地区;SO2排放绩效指数和工业废物排放绩效指数巨幅波动;建设用地绩效指数从2002年之后高于西部地区平均水平,但远远低于东部地区、全国和中部地区平均水平。占国土面积1/8的西藏面临生态环境的整体不稳定性和对外力干预的敏感性的双重压力。