摘要：目的制备结核杆菌脂蛋白抗原前体LpqH基因与微管相关蛋白轻链3(LC3)基因融合的抗结核DNA疫苗,探究其诱导与靶向自噬的效应。方法构建pCMV-LpqH与pCMV-LC3-LpqH重组质粒并转染RAW264.7细胞,免疫印迹法检测LC-3与LC3-LpqH的表达。转染pCMV-LpqH或pCMV-LC3-LpqH至GFP-LC3-RAW264.7细胞,免疫荧光法观察LC3-LpqH蛋白的定位。结果细胞转染pCMV-LpqH后LC-3表达水平增高。pCMV-LC3-LpqH在RAW264.7细胞的表达水平与质粒浓度呈剂量依赖性,并且LC3-LpqH与GFP-LC3体外表达后共定位于自噬体上。结论 pCMV-LC3-LpqH的表达能够增强自噬,并将LpqH抗原靶向定位于自噬体,为设计新型抗结核疫苗提供了新思路。

摘要：目的建立快速鉴定致病真菌的多重PCR体系。方法选取19种致病真菌的rDNA内部转录间隔区(ITS)序列设计引物,建立两个多重PCR体系,扩增临床与环境分离真菌菌株、人类细胞及9种常见细菌DNA,检测体系的特异性;以浓度梯度的DNA模板检测体系的灵敏度。结果对氟康唑天然耐药的克柔念珠菌、光滑念珠菌以及对两性霉素B耐药的土曲霉、镰刀菌、尖端赛多孢、根霉在该体系中可扩增出特异性条带,其他真菌可同时进行种属鉴定。74株被测真菌菌株的鉴定结果与常规鉴定的符合率为95.9%。两个多重PCR体系对人类基因组及9种常见细菌DNA的扩增结果均为阴性;扩增阳性的最低模板浓度均为10 fg/μL。结论建立的两个多重PCR体系可对致病真菌进行检测和种属鉴定。

摘要：迄今为止,疫苗是用于预防感染、肿瘤、过敏及免疫失衡等疾病最为有效的工具之一。归功于强大的信息储量及分析能力,网络数据库及分析系统为研究人员提供了更为容易的疫苗设计途径。目前,这些网络工具可以归类为生物大分子的序列信息、结构分析及功能预测。鉴于生物信息学工具的日益增多,本文对其进行分类总结,以方便更多研究者使用。

摘要：禽流感(Avian influenza,AI)、鸡新城疫(Newcastle disease,ND)、鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)、鸡传染性喉气管炎(Infectious laryngotracheitis,ILT)、鸡传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)和鸡减蛋综合症(Egg drop syndrome 76,EDS-76)是6种常见的禽类病毒性传染病,给养鸡业造成重大经济损失。依据NCBI核酸数据库中禽流感病毒(Aiv)、新城疫病毒(Ndv)、鸡传染性支气管炎病毒(Ibv)、传染性法氏囊病(Ibdv)、鸡传染性喉气管炎病毒(Iltv)及减蛋综合征病毒(Edsv)基因序列,设计了6对特异性引物,建立并优化针对鸡Aiv、Ndv、Ibv、Ibdv、Iltv和Edsv的多重PCR鉴别诊断方法,同时进行现场检测应用。结果显示该多重PCR体系检测限为100fg,与其他常见病原体无交叉反应。研究表明鸡六种病毒多重PCR方法具有较高敏感性与特异性,在禽类常见病毒现场诊断方面具有广阔的应用前景。