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大鼠CD40基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定: 收藏
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引用; 《中华实用儿科临床杂志》2013年第10期28卷 745-748页; 作者：王介忠韩波高聆杨文巍山东大学附属省立医院小儿心脏科济南250021 山东大学附属省立医院中心实验室济南250021; 目的构建大鼠CD。基因RNAi慢病毒载体。方法针对大鼠CD40基因RNAi设计有效靶序列，合成靶序列的寡核苷酸序列。退火形成双链DNA，与经Hpal和Xhol双酶切后的GV118载体连接产生短发卡RNA慢病毒载体，PCR筛选阳性克隆，测序鉴定。随后进行W...; 目的构建大鼠CD。基因RNAi慢病毒载体。方法针对大鼠CD40基因RNAi设计有效靶序列，合成靶序列的寡核苷酸序列。退火形成双链DNA，与经Hpal和Xhol双酶切后的GV118载体连接产生短发卡RNA慢病毒载体，PCR筛选阳性克隆，测序鉴定。随后进行Westernblot外源筛选最佳干扰靶点、慢病毒包装及病毒滴度测定。结果CD40siRNA成功插入慢病毒载体。慢病毒载体经293T细胞包装成功，测定病毒的滴度为2．0×10^12TU／L。结论成功构建大鼠CD40基因的RNAi慢病毒载体，为后期进一步研究病毒性心肌炎发病机制及新的治疗方法提供工作基础。; 来源：详细信息评论

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