摘要：根据鹅星状病毒(GAstV)ORF1b基因与鹅源新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)σC基因的保守序列设计特异性引物,建立GAstV与NDRV双重RT-PCR检测方法,该方法具有较高的特异性,在903 bp(GAstV)和226 bp(NDRV)可检测到特异性条带,最低灵敏度为1.0×10^(3)copies/μL。在鲁中、鲁西北及鲁南地区不同规模的养鹅场中随机采取320份样本,GAstV的阳性率为21.56%(69/320),NDRV的阳性率为3.44%(11/320),混合感染阳性率为2.81%(9/320),单一RT-PCR结果与双重RT-PCR方法一致。该方法的建立为快速诊断GAstV和NDRV提供了可靠的手段。

摘要：为建立塞内卡病毒(SVA)的快速检测方法,本研究在SVA高度保守区域,分别设计了5对特异性LAMP引物,并通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验以及临床样本检测,建立了一种经济、特异、敏感的SVA检测方法。在62℃水浴55 min扩增出大于220 bp的特异性阶梯状条带,以质粒为模板进行敏感性试验结果表明该方法在5.1 copies/μL时仍可以检测出SVA,比普通PCR敏感1000倍。特异性试验结果显示该方法与猪肺炎支原体(MPH)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合增病毒(PRRSV)均无交叉反应,应用该方法检测72例临床疑似病料,阳性率为33%(24例)。与普通PCR相比较,该方法操作简便、快速、特异、经济,本研究提供了一种更适于临床检测的SVA检测方法。

摘要：为建立同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)的四重荧光定量PCR(qPCR)检测方法,针对PRRSV的ORF2基因、CSFV的5′UTR基因、PRV的gB基因、PCV2的ORF2基因设计了引物及Taq Man探针,并进行反应体系优化,敏感性、特异性验证,建立了同时检测上述4种病原的四重实时荧光定量PCR。结果显示,所建立的四重荧光PCR扩增效率(E)、相关系数(R^(2))及曲线斜率均在正常范围内,检测PRRSV、CSFV、PRV、PCV2 E值、R^(2)、斜率分别为92.9%、0.998、-3.504,90.7%、0.998、-3.566,94.3%、0.996、-3.466,94.2%、0.997及-3.470。PRRSV、CSFV、PRV、PCV2重组质粒最低检出限分别达到10^(2)、10^(2)、10^(2)、10^(3) copies/μL;四重qPCR反应体系中的多条引物间不发生交叉反应,经评价该方法特异性良好;批内和批间重复性试验结果显示,变异系数(CV)均在1%以下,具有良好的重复性。分别使用该方法和相应的国标荧光定量检测法对采集的298份临床样品进行检测对比,两种方法检测PRRSV、CSFV、PRV、PCV2阳性符合率分别为96.08%、96.38%、100%、94.95%,均在94%以上。结果表明,建立的检测方法方便、灵敏、高效、特异性强,适用于猪呼吸道疾病病原学、流行病学研究以及临床病例的诊断,并为猪呼吸道疾病的预防和控制提供技术支撑。

摘要：为了实时掌握猪只生长环境的情况,满足猪舍环境的监测需求,同时降低系统的成本,设计了一款基于物联网的猪舍环境实时监测系统。系统选用STM32F103C8T6单片机作为主控器,应用空气温度、空气湿度、光照强度、CO_(2)浓度、NH_(3)浓度等传感器对猪舍环境进行实时检测,并根据检测结果对异常情况进行报警或控制。系统选用ESP8266 Wi-Fi模块通过MQTT协议连接OneNET物联网平台,实现数据的远程传输,便于数据的可视化显示和管理。研究中根据物联网架构模式搭建了系统,对系统所需硬件进行了分析,经核算总计成本在150元左右,并对网络、功耗和数据准确性进行了测试,结果表明系统总体稳定可靠。该系统集多传感器于一体,可以同时监测多种环境因子,且成本低、简捷易用,能够为猪只提供较好的生长环境,能够帮助养殖人员进行科学化管理,从而提高产能和收益。

摘要：[目的]研究不同环境温度、饵料湿度和饵料pH对蚯蚓生长和繁殖的影响,确定其最佳生长繁殖条件,为蚯蚓养殖提供科学依据。[方法]设计3个试验,分别研究不同环境温度对蚯蚓生长和产卵数的影响、不同饵料湿度对蚯蚓生长和产卵数的影响、不同pH对蚯蚓生长和产卵数的影响。[结果]不同温度对蚯蚓生长和繁殖的影响结果表明:23℃时产卵数最多,显著多于18和30℃时的产卵数(P0.05);湿度70%时,蚯蚓产卵数显著高于其他组(P<0.05);湿度40%时,蚯蚓产卵数回升,但成活率较低。不同pH对蚯蚓生长和产卵数的影响结果表明:在pH 5~11范围内蚯蚓均能成活并有少量产茧,其适应性较广,而在pH为9时产卵数较多;处理组蚯蚓成活数在pH为6时最多;pH为8时,在增重、产茧数上,对照组优于任一处理组。[结论]大平二号蚯蚓繁殖最佳条件为温度23℃、湿度70%、pH 6;大平二号蚯蚓生长最佳条件为温度18℃、湿度65%、pH 8~9。

摘要：鸽腺病毒(pigeon adenovirus,PiAdV)是影响鸽产业健康发展的重要病原之一。为实现PiAdV的高通量快速检测,根据GeneBank登录的PiAdV-A种和PiAdV-B种病毒pⅧ基因序列的共同保守区域设计特异性检测引物和探针,经反应条件优化,建立了一种PiAdV通用型实时荧光PCR检测方法,并对该方法进行了特异性、敏感性、重复性试验。结果显示:该方法的最佳探针浓度为0.2μmol/L,与鸽群其他常见病毒无交叉反应,对PiAdV的最低检测限为56.9 copies/μL,比常规PCR敏感性高100倍,组内和组间重复变异系数均小于1.8%。利用该方法和常规PCR方法对20份疑似PiAdV感染样品进行检测,发现PiAdV通用型实时荧光PCR检测方法的病毒阳性检出率高于常规PCR方法。结果表明,本研究建立的PiAdV通用型实时荧光PCR检测方法特异性强、敏感性高、可靠性好,可用于PiAdV感染的临床检测及流行病学调查。

摘要：本研究选用 35日龄断奶仔猪 ,采取 3× 3拉丁方设计基础日粮、添加活菌制剂和抗生素 3个处理 ,每处理各设 3个重复共计 9头仔猪。采用全粪尿收集法和平板计数法 ,对日粮常规营养成分消化率和手术法取小肠、盲肠内容物中主要菌群的数量进行了测定。结果表明 ,生物饲料中粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、粗灰分、氨基酸等消化率及肠道中芽孢杆菌、乳酸杆菌、酵母菌和大肠杆菌的数量高于和显著高于抗生素饲料。即活菌制剂有利于提高饲料中营养物质消化率 ,增加有益菌的数量。

摘要：2009～2011年从北方发病鸡群和鸭群中分离出3株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)。通过致病性指数测定及交叉血凝抑制试验初步分析了3个毒株的毒力和相互之间的同源性。选取鸡源分离株SDLY01与新城疫疫苗株(LaSota)进行了交叉保护试验,选取鸭源毒株SD03对樱桃谷鸭进行攻毒实验,同时设计引物对3个毒株进行了全基因组测序,并与36株NDV参考株进行了分子进化分析。结果表明3个分离株F蛋白裂解位点的氨基酸序列均为112R-R-Q-K-R-F117符合强毒株的序列特征,并与致病性指数测定结果相符。交叉血凝抑制试验发现3个分离株与疫苗株LaSota的抗原同源性较低为82.5%～89.4%,两个鸡源分离株间的抗原同源性为90%,而鸭源毒株SD03与鸡源毒株SDSG01同源性为100%。交叉保护试验和攻毒实验结果显示传统的LaSota疫苗能对SDLY01流行株提供100%免疫保护,但第5天仍检测到排毒;鸭源毒株SD03对樱桃谷鸭不致病,但能检出排毒,排毒期最长为5d。全基因组测序与分析表明3个毒株基因组长度均为15 192bp,属于基因Ⅶd型毒株,与同期流行的鹅源及鸭源NDV毒株之间全基因组核苷酸序列具有高度的同源性,揭示鸭源、鹅源NDV与鸡源NDV在遗传学和流行病学上密切相关。

摘要：本试验旨在研究不同中性洗涤纤维(NDF)水平饲粮对肉羊生长性能和营养成分表观消化率的影响,以确定肉羊饲粮中最佳NDF水平。试验动物为杜寒杂交(黑头杜泊羊×小尾寒羊)F1代肉用绵羊,采用单因素完全随机区组试验设计,将体重相近的50只母羊和25只公羊随机分为5个处理,每个处理10只母羊和5只公羊,每5只为1个重复,公母分圈饲养。5组试验羊饲喂粗蛋白质水平同为14.8%,而NDF水平分别为26.51%、33.35%、38.71%、43.51%、48.35%的试验饲粮,考察试验羊的生长性能,并在体重达到30 kg左右时进行为期4 d的粪袋全收粪试验,测定饲粮营养成分的表观消化率。试验期为48 d。结果表明:1)不同NDF水平的饲粮对试验羊净增重、平均日增重没有显著影响(P>0.05),试验羊的性别对净增重、平均日增重有显著影响(P26.51%组>38.71%组>43.51%组>48.35%组。2)试验羊的干物质采食量与饲粮NDF水平呈现正相关关系(R2=0.744 6),并且48.35%组显著或极显著高于26.51%、33.35%和38.71%组(P<0.05或P<0.01)。饲粮NDF水平显著影响试验羊的料重比(P<0.05),以33.35%组最低,48.35%组最高。3)饲粮NDF水平对干物质、有机物、粗蛋白质、粗脂肪、NDF和酸性洗涤纤维的表观消化率存在极显著影响(P<0.01),各营养成分表观消化率均以33.35%组为最高。综合考虑生长性能和营养成分表观消化率,在粗蛋白质水平为14.8%的肉羊饲粮中,最佳NDF水平为33.35%。

摘要：就稻草(RS)与苜蓿(MSL)混合瘤胃体外发酵组合效应进行整体评定。采用单因子试验设计,体外批次培养48 h,应用经改进的组合效应多项指标综合指数(IMFAEI)对RS分别添补0、20%、40%、60%、80%与100%MSL(MSL0、MSL20、MSL40、MSL60、MSL80与MSL100)在12、24与48 h研究瘤胃体外发酵的组合效应。各组各时间点的pH值6.75～6.88,NH3-N 3.11～28.74 mg/100 ml,微生物氮2.91～14.57 mg/ml,48 h各组累计产气量与总挥发性脂肪酸分别为120.1～162.4 ml/g OM与41.51～55.45 mmol/l。各组的IM-FAEI自高到低的排序为:MSL60(1.271 1)、MSL40(1.260 3)、MSL20(0.826 5)与MSL80(0.633 3)。本研究RS与MSL适宜添补量为40%～60%。