摘要：本研究构建了猪TRIM56(sTRIM56)全长及其截短体的真核表达质粒,并检测了其融合蛋白的表达和定位。首先,根据sTRIM56基因序列及结构特点,设计扩增全长及4个截短体的引物,提取猪肺泡巨噬细胞3D4/21的总RNA,RT-PCR扩增sTRIM56全长及截短体基因,并将其克隆至pXJ41真核表达载体,构建全长及其截短体的真核表达质粒。其次,将sTRIM56全长及截短体真核表达质粒转染HEK-293T细胞,Western blotting检测其蛋白表达;转染猪肺泡巨噬细胞3D4/21,间接免疫荧光试验(IFA)检测其亚细胞定位。双酶切和测序结果显示,sTRIM56全长及截短体的真核表达质粒构建成功;sTRIM56蛋白约为82 kDa,与预期相符,各截短体蛋白条带也与预期相符;sTRIM56全长及4个截短体蛋白均主要定位于细胞质中。本研究结果可为后续深入研究sTRIM56蛋白及其不同结构域的抗病毒作用及分子机制奠定基础。

摘要：试验旨在研究不同青贮饲料添加剂组合对饲料桑青贮营养价值和发酵品质的影响。试验采用3×3随机区组试验设计,对照组仅添加20 g/kg葡萄糖,试验组饲料桑除添加20 g/kg葡萄糖外,分别添加由植物乳杆菌、戊糖片球菌、地衣芽孢杆菌组成的复合菌和由里氏木霉木聚糖酶、酸性纤维素酶、α-半乳糖苷酶组成的复合酶,分别添加高、中、低共3个浓度,共10个处理组。裹包青贮60 d,进行营养价值评定。结果显示:1组饲料桑的pH值、气味、色泽、综合分数均高于其他各组,评定等级为优等。各试验组饲料桑青贮的干物质(DM)含量均显著低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,1组、2组、8组饲料桑的粗脂肪(EE)含量显著提高(P<0.05);各试验组饲料桑的中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)均显著降低(P<0.05),其中1组饲料桑的NDF含量最低,4组饲料桑的ADF含量最低。与对照组相比,各试验组饲料桑的pH值均显著降低(P<0.05),且1组饲料桑的pH值最低(3.85)。与对照组相比,1组、2组、4组、5组、7组、8组饲料桑的乳酸和乙酸含量显著增加(P<0.05),氨态氮(NH_(3)-N)含量显著降低(P<0.05),且1组饲料桑的乳酸和乙酸含量最高,NH_(3)-N含量最低。研究表明,饲料桑青贮最优组合为1组,即同时添加α-半乳糖苷酶40 U/kg、酸性纤维素酶20 U/kg、里氏木霉木聚糖酶40 U/kg、植物乳杆菌5×10^(5)CFU/kg、戊糖片球菌3×10^(6)CFU/kg、地衣芽孢杆菌1×10^(8)CFU/kg以及20 g/kg葡萄糖,能够明显改善饲料桑青贮饲料品质。

摘要：旨在比较芯片与测序SNP分型技术、标记密度对遗传多样性、系统发生树和近交系数等分析结果的影响,探讨遗传结构分析中低成本、高效的分型方法和适宜的SNP密度。本研究以35头枣庄黑盖猪的CAUPorcineSNP50芯片数据和重测序数据为基础,以重测序数据为“原材料”构建了随机34K、均匀34K、均匀340K和均匀3400K 4个SNP面板,利用CAUPorcineSNP50芯片和各SNP面板的SNP标记分析了枣庄黑盖猪的遗传多样性、系统发生树和基因组近交系数。结果表明:1)利用芯片SNP标记分析的观察杂合度(observed heterozygosity,H_(O))(0.3859 vs.0.3200~0.3241)、期望杂合度(expected heterozygosity,H_(E))(0.3813 vs.0.3335~0.3346)、遗传距离(0.3057 vs.0.2798~0.2806)等遗传多样性指标值均高于各测序SNP面板,利用芯片SNP标记构建的系统发生树与各测序SNP面板存在较大不同,这可能是由于芯片设计中倾向于选择高MAF的SNP位点等原因所导致。2)各测序SNP面板对H_(O)(0.3200~0.3241)、H_(E)(0.3335~0.3346)、遗传距离(0.2798~0.2806)和系统发生树分析影响较小,但对纯合性片段(runs of homozygosity,ROH)的数目(784~106547)和长度(0.20~13.51 Mb)及基因组近交系数F_(ROH)(0.127~0.263)影响很大。目前畜禽基因组近交系数分析采用的50 K左右基因组SNP芯片有利于检测大片段ROH,对中小片段的ROH检测力差,故估计的基因组近交系数可能比实际值偏低。综上所述,不同SNP分型技术对遗传多样性、系统发生树和ROH的分析结果影响较大。测序组中,不同SNP密度对遗传多样性、系统发生树分析结果影响较小,但对ROH以及F_(ROH)分析结果影响很大。