摘要：利用pH-stat法测定碱性蛋白酶和中性蛋白酶对玉米黄粉蛋白的水解度,通过Box-Benhnken响应曲面法优化水解条件。根据单因素试验结果设计中心组合试验,以水解度为指标,采用响应面分析法确定最优水解工艺参数。结果表明:蛋白酶水解的最适条件为酶解pH11.10、酶解温度55.00℃、底物质量浓度112g/L、碱性蛋白酶与中性蛋白酶酶活单位比值5:1、加酶量48000U/g、酶解时间120min;在此条件下,玉米黄粉蛋白水解度实测值为30.23%,模型的预期值为30.84%。采用复合酶水解可提高玉米黄粉蛋白水解度,且工艺简单。

摘要：目的构建弓形虫表面抗原2(SAG2)基因重组质粒并在大肠埃希菌中表达。方法根据SAG2基因序列设计并合成引物,用PCR法从弓形虫基因组DNA中扩增SAG2基因片段,再克隆到p GEX-4T载体中,构建重组质粒。重组质粒经酶切鉴定并测序后,在大肠埃希菌BL21中诱导表达,产物经SDS-PAGE分析并纯化,以Western blotting分析其反应原性。结果 SAG2基因PCR产物大小约为561 bp,与预期相符。重组质粒经酶切及PCR鉴定构建成功,测序结果与已知序列吻合。重组质粒转化菌经IPTG诱导后表达的SAG2融合蛋白分子量约为47 ku,该蛋白可被GST标签抗体识别。结论成功重组了弓形虫SAG2基因,表达蛋白具有反应原性。

摘要：目的:探讨基于案例的混合教学方法在天然药物化学教学中的设计及实施。方法:遵循总—分—总、层层递进的原则,以实例为主线,设计整合教学内容,并在两届学生中实践。结果:80%的学生对该教学模式持满意态度,平均成绩、理解性及综合性知识的掌握程度均显著提高。结论:基于案例的天然药物化学混合式教学方法能显著提高教学效果,有助于学生自主学习能力、实践能力和创新能力的培养。

摘要：检测和识别体内某些物质,例如唾液酸化LewisA/X,能够为疾病的诊断、治疗、预后、分子示踪及深入研究相关疾病机理等方面提供重要参考.因此,开发高选择性、高灵敏度的化学传感器具有重要价值.苯基硼酸化合物由于其特殊结构,能够与糖、儿茶酚胺以及氟化物、氰化物等路易斯碱相互作用,使得其能够作为传感器用于相关物质的荧光识别和检测;且此类化合物具有高选择性、高效能、分析速度快等优点.近几年,将硼酸与纳米粒子、量子点等新材料相结合,设计出性能更加优越的硼酸传感器.综述了硼酸类化合物在传感器方面的研究进展.

摘要：分子生物学是生命科学类本科学生重要的专业课程,在人类疾病的诊断、治疗以及药物研发领域扮演着重要角色。本节课程以“发现问题,解决问题”的探索式授课方式讲授了RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术的作用机制及其在疾病治疗中的重要应用,通过微课与翻转课堂相结合,动态展示RNAi亚单位的组装过程及最终的基因沉默机制,由“静”到“动”,帮助学生理解和掌握核心知识点,引发学生对RNAi在疾病治疗中扮演的重要角色的思考。本文旨在利用数字媒体技术将分子生物学课程知识点的可视化教学与微课程相结合,强化学生对复杂知识的理解能力,提高学生的科研素养。

摘要：目的观察双氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)对染尘大鼠肺纤维化的治疗作用,比较DHA和汉方己甲素两种药物的治疗效果。方法将60只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、治疗1组和治疗2组,每组15只,模型组和治疗组采用一次性非暴露式二氧化硅气管滴注法染尘,染尘后第2天开始给药,治疗1组给予DHA 75mg/kg灌胃,治疗2组给予汉方己甲素22 mg/kg,模型组和对照组按每100g/kg体重灌胃1ml生理盐水,每周给药6 d,连续给药4周。在染尘后的第7、14、28天每组处死大鼠5只,取大鼠肺组织,检测大鼠肺系数,酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠肺组织中转化生长因子-1(TGF-β1)、细胞信号转导分子(Smad 2/3)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)表达水平,大鼠肺组织病理学变化,免疫组化观察大鼠肺组织TGF-β1和Col-I蛋白表达。用SPSS 19.0进行统计分析,多组组间均数比较采用完全随机设计单因素方差分析(ANOVA)。结果与模型组比较,治疗组大鼠肺组织中TGF-β1、Smad 2/3、Col-I表达降低,差异均有统计学意义(P0.05)。免疫组化结果显示,模型组大鼠肺间质内TGF-β1和Col-I蛋白强阳性表达,治疗组大鼠肺间质内TGF-β1和Col-I蛋白表达较模型组弱。结论DHA可以下调大鼠肺组织中炎性细胞因子水平,可通过干预TGF-β1/Smad 2/3信号通路抑制肺纤维化,但DHA和汉防己甲素两者间的治疗效果在短时间内无明显差异。

摘要：目的原核表达及纯化绿脓杆菌鞭毛蛋白ngE并进行初步活性鉴定。方法分析绿脓杆菌鞭毛蛋白FlgE的基因序列，设计带适当酶切位点的引物，用PCR方法扩增出FlgE的编码DNA序列，与大肠杆菌表达载体pET24a同时经NdeI／Hind Ⅲ双酶切、纯化及连接后构建pET24a—FlgE原核表达质粒，挑选重组阳性质粒经DNA测序确认序列正确，转化至大肠杆菌B121中进行诱导表达条件优化，使重组质粒表达目的蛋白，采用组氨酸标签亲和层析法对目的蛋白进行纯化，通过SDS-PAGE对纯化后蛋白相对分子质量进行鉴定，用试剂盒进行去内毒素化处理。在体外培养人角膜上皮细胞系细胞，加入纯化的F1gE重组蛋白，培养4h后应用实时定量PCR检测各种相关的炎性因子以反映FlgE蛋白活性。结果可用于大肠杆菌表达系统的重组pET24a—F1gE构建成功，其编码的蛋白在BL21中获得高效表达，当诱导剂异丙基一B—D一硫代吡喃半乳糖苷浓度为1mmol／L，在16、225r／min振荡培养20h，诱导目的蛋白表达量最高，经纯化、去内毒素处理和SDS—PAGE鉴定，获得纯化的重组FlgE蛋白。角膜上皮细胞用20μg／ml FlgE处理后，细胞内炎性相关分子IL-6和IL-8的表达量明显上升，而灭活的F1gE蛋白则丧失该刺激活性。结论获得纯化的重组绿脓杆菌鞭毛蛋白FlgE，且可刺激角膜上皮细胞上调炎性因子IL-6、IL-8的表达。

摘要：目的 研制测定空气中酯类化合物的管式被动式个体采样器.方法 根据费克第一扩散定律设计新型被动式个体采样器,并对采样器的性能指标进行评价.结果 在温度为10～40℃,相对湿度为20％～80％,风速为50～600 cm/s的范围内,被动式采样器测定空气中乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯的采样流量分别为（40.78±0.68）、（58.28±2.20）、（69.14±1.83）ml/min,吸附容量分别为31.17、31.74、32.14 mg,最短采样时间为30 min,用前稳定性≥30 d,样品稳定性≥14d,精密度测定显示其相对标准偏差（RSD）分别为6.14％～7.61％、5.81％～7.74％、6.75～8.09％.结论 本实验研制的管式被动式个体采样器可以作为一种测定空气中乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯的新型采样仪器.

摘要：手术是局限期食管癌的重要治疗手段，但单纯手术切除的5年生存率仅20％～25％。早期研究显示术后放疗降低区域复发率，但并不能提高生存率。近期大部分研究显示Ⅲ期或淋巴结阳性患者能从术后放疗中生存获益，且pT2？3 N0 M0期患者术后放疗可能获益。放疗靶区范围推荐以双侧锁骨上区、上纵隔、隆突下以及瘤床为主，大部分研究推荐下段病变应包括上腹部区域淋巴结。对局部晚期患者术后放疗联合化疗可能带来更大获益。关于食管鳞癌术后放疗意义、靶区设计及联合化疗等问题需个体化考量，需更多的临床证据。

摘要：目的优化鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白基因密码子并在大肠埃希菌中进行异源表达纯化。方法依据大肠埃希菌密码子偏好性对鼠疫耶尔森菌YopJ基因进行全基因序列优化,并设计引物。分别以密码子优化前后的鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白的基因为模板,将包含YopJ(22aa-288aa)和YopJ(22aa-250aa)的基因片段连接到载体pGI01中。重组质粒转化到大肠埃希菌BL21菌株中,扩大培养后,IPTG诱导目的蛋白表达。提取大肠埃希菌表达蛋白并使用镍离子柱进行纯化。结果鼠疫耶尔森菌YopJ密码子优化前YopJ(22aa-288aa)及YopJ(22aa-250aa)在大肠埃希菌内表达水平较低,密码子优化后YopJ(22aa-288aa)及YopJ(22aa-250aa)在大肠埃希菌内大量表达可溶性YopJ蛋白。结论对鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白进行基因密码子优化能够提高其在大肠埃希菌内的表达量。获得的鼠疫耶尔森菌YopJ蛋白具有可溶性,为进一步研究其结构和功能奠定了基础。