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含凝血酶识别位点的重组人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子在大肠杆菌的表达: 收藏
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引用; 《中国生化药物杂志》1997年第6期18卷 282-285页; 作者：韩金祥李翠玲宋长征梁浩张翠王美玲王革山东省医学科学院生物技术中心济南250062 中国科学院生物物理研究所; 采用PCR技术，从细胞中获取粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子cDNA，并在5′端设计上凝血酸酶切位点、5个组氨酸密码子、起始密码子及EcoR1酶切位点，在3′端设计上BamH1酶切位点。将扩增产物酶切后克隆到pBV220质粒的EcoRⅠ－BamHⅠ酶切位...; 采用PCR技术，从细胞中获取粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子cDNA，并在5′端设计上凝血酸酶切位点、5个组氨酸密码子、起始密码子及EcoR1酶切位点，在3′端设计上BamH1酶切位点。将扩增产物酶切后克隆到pBV220质粒的EcoRⅠ－BamHⅠ酶切位点，转化大肠杆菌DH5α，筛选阳性重组子（pGM09／DH5α）。在***中获高效表达，表达量占总蛋白的31．2％，生物活性为1．1×107U／L发酵液，纯化工艺简化。; 来源：详细信息评论

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