摘要：目的探讨小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)影响卵巢癌耐药细胞株MDRl基因的表达并逆转其多药耐药的功能。方法2004年10月至2005年6月于山东省立医院中心实验室采用浓度梯度诱导法建立人卵巢癌阿霉素耐药细胞株OVCAR/AR。根据MDR1基因的编码区域设计了2个含19个碱基的MDR1基因特异性siRNA,脂质体介导下转染OVCAR/AR细胞。RT-PCR分析MDRl mRNA的表达;流式细胞术(FCM)检测P-糖蛋白(P-gp)的表达;MTT法检测OVCAR/AR细胞的多药耐药性。结果MDR1特异性siRNA转染后,OVCAR/AR细胞MDR1mRNA和P-gp的表达减少,分别以转染后48h和72h下降最著;转染mdr1a和mdr1b siR-NA可不同程度地逆转OVCAR/AR细胞对阿霉素、泰素的耐药性,但对非P-gp介导耐药的顺铂无影响。结论阿霉素所致的卵巢癌细胞多药耐药与MDR1基因过度表达有关,体外实验中应用MDR1特异性siRNA能部分逆转OVCAR/AR细胞的多药耐药。

摘要：背景:雌激素降低更年期妇女骨质疏松发生率的作用已被证实,雌激素治疗是否具有改善围绝经期妇女抑郁相关症状的作用?目的:观察雌激素对围绝经期妇女抑郁相关症状的影响设计:病例对照研究。地点和对象:在山东省立医院院妇产科门诊就诊的围绝经期患者,选择60例主诉有抑郁症状者,要求神志清楚、检查合作、知情同意并按要求用药及完成测评,年龄45～55岁。干预:将60例围绝经期抑郁患者随机分成两组,每组30例。实验组给予戊酸雌二醇(广州先灵药业有限公司生产,批号588B2-4)1mg,1次/d;谷维素(济宁安康制药厂生产,批号010418)10mg,3次/d;对照组给予谷维素10mg,3次/d。两组治疗时间均为21d。于治疗前后分别应用汉密顿抑郁量表(HAMD)评定患者抑郁程度。主要观察指标:两组患者服药前后抑郁改善程度。结果:实验组HAMD减分率犤(9.8±7.7)%犦明显高于对照组犤(15.3±5.4)%犦,差异有非常显著性意义(t=25.924,P<0.01);实验组抗抑郁效果明显优于对照组犤组显效为26例,对照组显效为3例犦,差异有显著性意义(χ2=35.312,P<0.01)。结论:雌激素可改善围绝经期抑郁症患者的情绪和行为,降低抑郁症分值,改善抑郁状态。

摘要：本文总结本院1979年至1988年经手术治疗的31例外阴恶性肿瘤患者,对其中病变尚属早期的Ⅰ期及个别Ⅱ期病者,合理地缩少了外阴切除范围,减少了手术带来的致残并发症及性功能破坏,经2～7年临床观察,效果满意。作者对外阴癌的临床分期提出了建议,并对外阴切除范围的合理设计与区域淋巴结切除的原则进行了讨论。

摘要：目的构建一种新型双启动子表达载体pCMVnir,研究其与胞内寄生菌联合应用促进基因免疫效果的作用。方法细菌硝酸盐还原酶基因B启动子nirB为厌氧诱导启动子,根据nirB启动子的结构,设计合成改良的nirB,置换三启动子载体pTriEx4中的T7Lac和P10启动子,而保留其CMVie启动子,获得携带CMVie和nirB双种启动子的新型载体pCMVnir,或称为pCN。构建pCNEGFP和pCNDsRed两种报告质粒,分别转化***3261、***5α和CHO等细胞,检测报告基因的表达情况以确定两种启动子的活性。pCNEGFP转化***3261,接种BALBc小鼠,定期解剖小鼠收集黏膜相关淋巴组织,观察重组细菌和载体DNA在细胞中的定植及稳定性。免疫接种小鼠,并定期收集小鼠血清和阴道分泌物,以重组rEGFP为抗原,用ELISA方法研究其增强免疫应答的能力。并构建人乳头瘤病毒L1E7双启动子pCN16L1E7及对照单启动子载体pCMV16L1E7和pNir16L1E7,对比三者诱导黏膜免疫的差别。结果双启动子表达载体pCMVnir可在细菌和真核细胞中有效表达报告基因,在细菌中可形成肉眼可见的荧光菌落和沉淀,转染CHO等真核细胞能够表达荧光蛋白,表明pCMVnir载体的两种启动子都有活性,其中nirB活性是受兼性厌氧调控的。pCMVnir与细菌有较好的相容性,重组细菌可在动物体内有限复制和定植达6周,质粒可在细菌中稳定存在。以rEGFP为抗原检测发现pCNEGFP诱导的免疫反应高于常用的单启动子载体pCMVEGFP。人乳头瘤病毒双启动子载体pCN16L1E7诱导的免疫反应也高于其他单启动子载体。结论双启动子表达载体pCMVnir与减毒胞内寄生菌匹配应用,能够提高抗原表达量及增强基因免疫反应的强度。并可作为一般基因克隆和表达载体,特别是作为原核表达载体,不用添加诱导物,即可获得大量表达。

摘要：目的探讨细胞因子不同的组合方式对人骨髓CD34+富集细胞及AC133+富集细胞体外扩增潜能的影响。方法常规富集人骨髓CD34+及AC133+细胞,应用本研究组设计并已经证实的细胞因子组合方式,对人骨髓CD34+及AC133+富集细胞进行体外对照培养,分别观察CD34+和AC133+富集细胞的扩增情况;应用甲基纤维素半固体培养法,观察不同组别培养7、14、21 d CD34+和AC133+富集细胞的集落形成情况及细胞凋亡率。结果AC133+细胞实验组在相同条件下细胞扩增倍数以及集落生成数目上均明显高于CD34+细胞实验组,相同条件下细胞凋亡率明显低于CD34+细胞实验组。结论AC133+细胞包含有更多原始的造血干细胞,AC133作为造血干细胞抗原标记明显优于CD34。

摘要：根据体表标志，设计胎轴尺，以此测量异常胎轴并对此进行分度。结果：妊娠晚期的５１２例中，胎轴异常者１０８例，占２１．１％，其中重度为５１．８％；分娩期的４８３例中，胎轴异常８８例，均为重度，占１８．２％。８８例又随机分为两组：对照组３０例，研究组５８例，研究组行手法矫正。结果：研究组胎头下降加速，产程缩短，持续性枕后或枕横位发生率及手术产率降低，产后出血量减少。与对照组比较，差异有显著性。提示：妊娠晚期及产时，胎轴异常对分娩过程有一定影响，及时发现和矫正，对减少产力消耗和降低难产发生率有一定临床意义。

摘要：目的制备PEG2000包衣左氧氟沙星脂质体,并对其理化性质、初步稳定性及动力学特性进行评价。方法选用硫酸铵梯度法制备左氧氟沙星脂质体,以包封率及稳定性为指标筛选PEG2000包衣左氧氟沙星脂质体的最佳制备工艺;采用透射显微镜观察脂质体的外观形态;电位激光粒度分析仪测定粒径及表面Zeta电位;动态膜透析法测定脂质体体外释药特性;对其初步稳定性进行考察;对其体内药动学进行研究。结果 PEG2000包衣左氧氟沙星脂质体形态圆整,粒径分布均匀,包封率为(77.97±1.09)%,稳定性及体内外缓释性能均好于未包衣左氧氟沙星脂质体。结论构建的PEG包衣左氧氟沙星脂质体能明显改善脂质体的稳定性,能为提高脂质体的贮存稳定性开辟一条新途径。

摘要：目的　探讨热疗与放疗联合增强顺铂对子宫颈癌细胞的作用与机制。方法　以体外培养的子宫颈癌Ｈｅｌａ 细胞株为研究对象，用组内分组设计方法，以恒温水浴热疗、直线加速器放疗，采用原子吸收光谱法检测Ｈｅｌａ 细胞内铂（Ｐｔ） 含量及ＤＮＡ－ Ｐｔ 含量。结果　１０ Ｇｙ 以下剂量单独放疗未表现出细胞内Ｐｔ 量增加，２０ Ｇｙ 剂量放疗则其量明显增加，提示放疗损伤细胞膜；３７ ℃富氧条件下２０ Ｇｙ 以下剂量放疗未能增加细胞内ＤＮＡ－ Ｐｔ 形成，当辅以４３ ℃热疗后，不仅细胞内Ｐｔ 含量进一步增加，而且细胞内ＤＮＡ－ Ｐｔ 形成也增多，提示热疗能促进放疗损伤的ＤＮＡ 与Ｐｔ 结合。结论　热疗在放疗对顺铂化疗增敏过程中发挥了重要的作用。