摘要：【背景】猪链球菌(Streptococcus suis,SS)和猪多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)都是能引起宿主致病的人畜共患病原菌,常出现混合感染,临床诊断上易与猪瘟、猪丹毒等混淆。【目的】快速、有效鉴别猪链球菌病和猪多杀性巴氏杆菌病,建立一种能同时检测2种病原的多重实时荧光定量PCR检测方法。【方法】基于猪链球菌的gdh基因和猪多杀性巴氏杆菌的plpE基因,设计2对特异引物及TaqMan探针,以细菌16S rRNA基因设计通用引物及探针,通过对反应条件优化,建立了一种能同时检测猪链球菌和猪多杀性巴氏杆菌的多重实时荧光定量PCR检测方法。【结果】该方法能够特异性地检测猪链球菌和猪多杀性巴氏杆菌,与细菌分离后的测序结果验证完全一致。此方法对重组质粒标准品的最低检出浓度分别为4.53×10^(2)copies/μL和3.97×10^(2) copies/μL。重复性试验结果显示,该方法的组内和组间变异系数均小于3%。【结论】本实验所建立的方法准确、简便、可靠,能够用于2种病原菌的同时检测,为猪链球菌病和猪多杀性巴氏杆菌病的防治提供了有效的检测工具,具有重要的流行病学意义和临床应用价值。

摘要：本试验旨在研究饲粮粗蛋白质(CP)水平对育成期崂山奶山羊生长发育及血清生化指标的影响。选用147日龄体重为(14.57±0.32)kg的崂山奶山羊断奶母羊30只,采用单因素试验设计,随机分成3组,每组10个重复,每重复1只羊。各组饲喂CP水平分别为10.74%、13.22%和15.74%的3种饲粮。预试期14 d,正试期162 d。结果表明,增加饲粮CP水平:提高了崂山奶山羊平均日增重,加快了体尺增长;显著或极显著增加了崂山奶山羊食入氮量、尿氮排出量(P0.05);显著增加了血清总蛋白、葡萄糖含量(P0.05)。综合得出,根据食入氮量(x)与平均日增重(y)之间的关系y=-0.258 1x2+15.341 x-101.88,育成期崂山奶山羊获得最佳生长性能的食入氮量为29.72 g/d。

摘要：本试验旨在研究不同外源寡糖对奶山羊粪便微生物区系的影响。试验采用不完全拉丁方设计,选用平均体重为(32.80±2.45)kg、安装有永久性瘤胃瘘管的崂山奶山羊6只,分为6组,试验组羊分别饲喂在基础饲粮中添加1%的甘露寡糖(M OS组)、半乳甘露寡糖(GM OS组)、寡木糖(XOS组)、低聚异麦芽糖(IMO组)和果寡糖(FOS组)的试验饲粮,对照组(CT组)羊饲喂基础饲粮。共进行4期试验,每期35 d,其中预试期14 d,正试期21 d。于正试期第1、7、14、21天晨饲前采集新鲜粪便,测定粪便中乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌的数量。结果表明:与CT组相比,试验组乳酸杆菌数量均有所增加,其中FOS组第7天开始达到极显著水平(P<0.01);试验组双歧杆菌数量增加,其中FOS组各采样时间均达到极显著水平(P<0.01);试验组大肠杆菌数量有所降低,其中M OS组和FOS组第7天达到极显著水平(P<0.01)。本试验条件下,不同外源寡糖对增加奶山羊粪便乳酸杆菌、双歧杆菌数量,降低大肠杆菌数量的作用效果不同,其中果寡糖效果较明显。

摘要：根据猪乙脑病毒SA14-14-2毒株的基因组序列,采用Primer5.0引物设计软件,设计1对乙脑病毒特异性引物,建立了检测猪乙脑病毒的的RT-PCR方法,利用合成的引物对乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)进行RT-PCR扩增,结果仅JEV能扩增出819bp大小的特异性片段,证实了建立的RT-PCR对乙型脑炎病毒具有较高的特异性。灵敏试验表明,检测JEV的RT-PCR的最小灵敏度能够达到纳克(ng)级别。该方法的建立,对于准确快速检测JEV提供了依据。

摘要：为研究不同过瘤胃氨基酸-脂肪复合物添加水平对山羊饲料养分消化率的影响,试验选用4只体重为(59.80±3.23)kg、体况良好的成年崂山山羊公羊,采用拉丁方试验设计,对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮的基础上添加60 g/d.只、120 g/d.只和180 g/d.只过瘤胃氨基酸-脂肪复合物。试验共分为4期,每期14 d,其中预饲期7 d,正式期7 d。结果表明,与对照组相比,试验组能够明显提高日粮养分消化率。其中,120 g/d.只组山羊对饲料干物质、有机物、粗脂肪、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的消化率均显著提高(P0.05),120 g/d.只组下降6.24%(P<0.01),180 g/d.只组下降2.27%(P<0.05)。综上所述,日粮中添加不同水平的过瘤胃氨基酸-脂肪复合物有助于提高山羊日粮中养分消化率,促进氮的沉积,降低了氮的排出量,经回归分析结果表明添加量为117～150 g/d时对提高山羊日粮养分消化率的效果最佳。

摘要：根据GenBank中公布的非洲猪瘟病毒Vp72蛋白基因序列(GenBank登录号AY261364)合成阳性质粒P-ASFVP72,采用OIE推荐的PCR引物,扩增片段大小为278bp。另根据GeneBank上公布的猪瘟疫苗株(GenBank登录号AF531433)的全基因组序列,利用生物学软件设计一对引物,构建阳性质粒P-CSFV,扩增片段为424bp。以两种阳性质粒为模板,通过对反应条件的优化,建立了一种可同时检测这两种病毒的双重PCR方法。试验结果证明,该方法可在同一个体系中同时对两个目的基因进行扩增,并且特异性强、敏感性高,具有省时,省力,快速,高效等特点,为ASFV和CSFV的临床诊断和流行病学调查等研究提供了有效的技术支持。

摘要：为了明确泌乳期崂山奶山羊适宜蛋白质需要量,试验选择泌乳中期崂山奶山羊2胎母羊30只,采用单因素随机分组设计分成3组,饲喂蛋白质水平分别为11.06%、13.79%、16.56%的3种TMR日粮,定期测定体重、采食量、产奶量及乳成分。结果表明:16.56%组崂山奶山羊平均产奶量最高,13.79%组羊乳中乳蛋白量、乳脂率均高于11.06%组和16.56%组;泌乳期崂山奶山羊粗蛋白质维持需要量(RCPm)为3.37 g/(kg W0.75·d),转化为可消化粗蛋白质维持需要量(RDCPm)为2.24 g/(kg W0.75·d);泌乳期崂山奶山羊每产1 kg奶需要粗蛋白质129.70 g,可消化粗蛋白质86.42 g。

摘要：试验旨在研究蛋白质水平对产奶期崂山奶山羊泌乳性能的影响。选用泌乳量(2.06±0.34)kg/d、体重相近(53.55±2.34)kg的泌乳中期崂山奶山羊2胎母羊30只,采用单因素随机分组设计,随机分成3个处理组,每组10只,每只羊为1个重复。分别饲喂日粮能量、纤维、钙及磷水平一致,蛋白质水平分别为11.04%、13.80%、16.56%的3种TMR日粮,定期测定体重、采食量、产奶量及乳成分。结果表明:日粮蛋白质水平对崂山奶山羊采食量的无影响(P>0.05);随着饲粮中蛋白质水平的增加,日平均产奶量极显著增长(P0.05);13.80%蛋白质水平组试羊的乳脂率、非脂固形物的含量高于11.04%组和16.56%组(P>0.05),13.80%、11.04%蛋白质水平组试羊的乳蛋白及总干物质含量均极显著高于16.56%组(P0.05)。泌乳崂山奶山羊食入氮水平与4%标准乳产量之间的关系可表示y=-0.0014x2+0.1838x-3.7548,当食入氮水平为63.63 g/d时,可获得标准乳最大产量为2.27 kg/d。

摘要：为了研究育成期崂山奶山羊蛋白质需要量,试验采用饲养试验、消化代谢试验研究育成期崂山奶山羊蛋白质需要量及氮代谢规律,选用144日龄、体重相近[(14.57±0.32)kg]的崂山奶山羊断奶母羊30只,采用单因素设计,随机分成3个处理,每个处理10个重复,每个重复1只羊,分别饲喂能量、纤维、钙及磷水平基本一致,粗蛋白质(CP)水平分别为10.5%、13.2%和15.8%的3种饲粮。结果表明:15.8%组试验羊具有最高日增重120.86 g/d,极显著高于10.5%组(105.49 g/d),试验羊每增重1 g需要粗蛋白质0.36 g/d。育成期崂山奶山羊蛋白质需要量析因公式分别为RCP=3.27 W0.75+0.38△W、RDCP=2.43 W0.75+0.27△W,沉积蛋白=1.24W0.75+0.12△W[RCP为粗蛋白质需要量(g/d),RDCP为可消化粗蛋白质需要量(g/d),W0.75为代谢体重(kg),△W为平均日增重(g/d)]。

摘要：研究旨在阐明GnRHR基因的多态性与崂山奶山羊产羔数的关系。设计7对引物,采用PCR-RFLP和PCR-SSCP技术检测GnRHR基因在不同产羔数崂山奶山羊的单核苷酸多态性,并分析其与产羔数的关系。结果显示:该基因存在2个多态位点,A261G突变对于初产母羊GA型产羔数比AA型多0.06只,比GG型多0.04只,差异不显著(P>0.05);对于经产母羊GA型产羔数比AA型多0.35只,比GG型多0.45只,差异显著(P0.05)。因此,GnRHR基因A261G突变位点可能是影响崂山奶山羊产羔性能的一个潜在的有效分子标记。