摘要：L-丙氨酸作为最小的手性化合物之一,被广泛应用于食品、医药和日化领域。目前,微生物法生产L-丙氨酸存在发酵周期长,生产强度低等问题。为此,通过强化前体供给、启动子工程和转运工程等代谢工程策略,构建高产L-丙氨酸的大肠杆菌细胞工厂。进一步通过生化工程策略优化L-丙氨酸生产工艺,提高L-丙氨酸大肠杆菌细胞工厂的生产性能。结果:过表达gapA(3-磷酸甘油醛脱氢酶基因)强化前体丙酮酸供给,使L-丙氨酸产量和转化率分别提高了5.1%和15.6%。启动子工程优化gapA表达,使L-丙氨酸产量和转化率进一步提高到18.3 g/L和0.55 g/g。过表达L-丙氨酸外运蛋白(AlaE),增加L-丙氨酸转运,使L-丙氨酸产量提高到20.4 g/L。生化工程策略优化培养基组分,得到最佳碳源为葡萄糖40 g/L,最佳氮源为(NH4)2SO425 g/L。最佳发酵条件为:接种量15%,10 h转厌氧发酵和变速补料发酵。5 L发酵罐发酵36 h,大肠杆菌菌株W-135 L-丙氨酸产量为127.2 g/L,转化率为0.83 g/g,生产强度为3.53 g/L/h,比优化前分别提高了64.3%,50.9%和64.2%。本研究利用系统代谢工程和生化工程策略,构建了发酵周期短和发酵工艺简单的L-丙氨酸高产菌株,为L-丙氨酸的工业化生产提供了理论基础。

摘要：随着人们生活水平的提高,血栓病患者呈逐渐增多的趋势。现有的溶栓药物中,纳豆激酶因其半衰期长、特异性强、副作用小、可直接口服等优点而引起了广大关注。本文结合近年来国内外的相关研究成果,详述了纳豆激酶的结构特征、纤溶活性和抗血栓活性的作用机制,总结了纳豆激酶的现有生产菌株及利用发酵优化及基因工程和蛋白质工程提高酶产量或改善酶学特性等方面的进展,阐述了纳豆激酶的生理功能,最后对纳豆激酶应用面临的挑战和未来发展趋势进行了展望,以期为纳豆激酶的进一步研究提供理论依据。

摘要：比较樱桃汁和2种乳酸菌发酵樱桃汁的挥发性风味成分差异,确定樱桃汁和乳酸菌发酵樱桃汁的主要挥发性风味成分和适宜的菌种。通过顶空-气相色谱-离子迁移谱(HS-GC-IMS)结合聚类分析(PCA),对不同乳酸菌发酵樱桃汁的风味成分进行检测和评价。结果检出挥发性物质28种,其中醛类11种、酯类6种、醇类6种、酮类4种和有机酸1种。樱桃汁中的主要挥发性化合物多为醛类,包括苯甲醛、(E)-2-己烯醛、反式-2-戊烯醛、己醛、壬醛、辛醛、庚醛、2-甲基丁醛、3-甲基丁醛和戊醛,此外,在樱桃汁中乙醇、戊醇、丙硫醇、乙酸异戊酯、乙酸乙酯、乙酸异丁酯、3-羟基-2-丁酮和异丁酸的含量也较为丰富。嗜热链球菌LVF02发酵樱桃汁的主要风味成分为酯类和酮类,分别为乙酸乙酯、乙酸异戊酯、丙酸乙酯、乳酸乙酯、异戊酸甲酯、1-戊烯-3-酮、3-羟基-2-丁酮、4-甲基-3戊烯-2-酮和2-戊酮。市售乳酸菌和嗜热链球菌LVF02比较,嗜热链球菌LVF02对樱桃汁的风味影响更大,挥发性风味成分更丰富。嗜热链球菌LVF02发酵樱桃汁中酯类和酮类的含量较高,构成了发酵樱桃汁的主要香气。由樱桃果实中筛选出的嗜热链球菌LVF02更适合樱桃发酵产品的研究和开发。

摘要：针对发酵法生产DHA生产过程实时监控的需求,建立了一种简单、快速、准确的检测菌体细胞中油脂及DHA含量的方法。主要考察了菌体干燥,菌体细胞破壁方法、油脂抽提溶剂、油脂甲酯化方法以及内标选择等对菌体内油脂及DHA含量测定的影响等,确定了以湿菌体为分析样本,采用酸热法细胞破壁、正己烷抽提油脂、十九烷酸甲酯为内标、碱催化甲酯化测定发酵液中油脂及DHA含量方法,整个分析过程可在1~2 h内完成,特别适合DHA发酵过程的中间分析化验。

摘要：研究了在碱性条件下,利用双氧水均相氧化降解可得然胶,制备低分子量水溶性可得然寡糖的工艺条件。通过单因素试验对氢氧化钠浓度、双氧水加量、反应温度、反应时间等影响降解的条件进行了优化,最终确定了降解的最佳工艺条件是氢氧化钠的浓度为2 mol/L、双氧水加量为1.5%(V/V)、降解温度为40℃、降解时间为48 h。利用纸层析和红外光谱对降解产物进行表征,结果表明降解后产品的化学结构未发生改变。进一步研究了产物可得然寡糖体内抗肿瘤、对竹节虾生长性能影响及抑菌试验,结果表明:可得然寡糖具有一定的抑瘤效果,小鼠实验表明,剂量为50 mg/kg体重时,抑瘤率可达48.73%;竹节虾饲料中添加可得然寡糖可提高其存活率,添加量为400 mg/kg时,酚氧化酶活力最高,达到2.96 U/mg;可得然寡糖对金黄色葡萄球菌具有一定的抑菌效果,对大肠杆菌具有较微弱的抑菌效果,而对安琪酵母菌无抑菌效果。

摘要：以热带假丝酵母SFX-Y9为研究对象,考察葡萄糖添加对木糖醇发酵的影响。研究发现,菌株SFX-Y9以葡萄糖为碳源培养种子,不仅可以提高菌体浓度、缩短培养时间,而且对木糖的转化基本没有影响;发酵培养基中添加少量葡萄糖可以提高木糖消耗速率、缩短发酵周期。采用5 L发酵罐通过精准控制过程溶氧和低流速流加葡萄糖可以进一步提高木糖消耗速率,同时可以提高木糖转化率约15%。在最佳供氧和葡萄糖为辅助碳源的条件下,菌株SFX-Y9木糖醇最大生产速率可达5.0 g/(L·h)以上,转化率可达80%以上,生产成本可以与化学加氢竞争,具有非常好的工业开发应用前景。

摘要：前期研究表明,赤藓糖醇生产母液中除含有赤藓糖醇外还含有其他未知糖醇组分,该文采用HPLC和LC-MS分析对这些未知糖醇组分进行了定性鉴定。首先使用氨基色谱柱和Shodex SC1011色谱柱相结合对赤藓糖醇母液进行HPLC分析,通过对比两色谱柱对母液和糖醇标准样品的分析结果,初步确定赤藓糖醇母液中的未知糖醇组分主要为阿拉伯糖醇和甘露糖醇,此外还含有少量的核糖醇。LC-MS分析结果显示,母液中各组分分子质量与赤藓糖醇、阿拉伯糖醇(核糖醇)、甘露糖醇一致,进一步确认了HPLC分析结果。

摘要：以沙棘汁和燕麦为原料,采用发酵法生产燕麦沙棘酒。先确定燕麦粉糖化液的最佳制取工艺条件,再通过正交试验确定燕麦沙棘酒发酵的最佳工艺条件。在燕麦粉糖化液用量17%,沙棘汁用量为27%,酵母接种量1.0‰,发酵温度28℃,发酵p H值3.8条件下酿造的燕麦沙棘酒,酒精度12.3%vol,风味纯正,酒体丰满,营养丰富,感官评分为86分。

摘要：威伦胶(welan Gum,又名威兰胶或韦兰胶),是由产碱杆菌Alcaligenes Sp.(ATCC31555)以碳水化合物为主要原料,经发酵产生的高分子可溶性胞外杂多糖,过去的名称为S-130,是美国的Kelco公司上世纪80年代继黄原胶和结冷胶之后开发的最具市场前景的微生物代谢多糖之一。因其出色的流变学特性和独特的分子结构而在石油开采、建筑、食品等领域有广泛的应用开发价值。目前只有美国的***公司拥有韦兰胶产业化技术,国内还未见韦兰胶产业化报道。本文简要介绍了韦兰胶的结构及其性能;综述了它在食品工业、石油工业、医药工业以及水泥工业中的应用;介绍了国内外对韦兰胶的研究生产现状、存在的问题以及目前的市场前景。

摘要：微生物发酵法生产3-羟基丁酮亟待解决的一个问题是它的下游分离工艺的确定,双水相萃取技术作为一种高效而温和的分离技术,已经在有机物质的分离提取中得到了广泛的应用,本文开展了该双水相萃取技术分离发酵液中3-羟基丁酮的研究,考察了双水相体系的种类以及组成比例对3-羟基丁酮萃取的影响,确定最佳的双水相体系为无水乙醇/磷酸氢二钾,当无水乙醇的质量浓度为26%(m/m),磷酸氢二钾的质量浓度为25%(m/m),此时的3-羟基丁酮分配系数为16.81,回收率高达98.2%,放大操作表明该双水相体系的稳定性较好,体系规模的改变不会影响到3-羟基丁酮的分配系数和回收率,适用于大规模工业化生产,并且通过减压蒸馏和结晶得到了3-羟基丁酮二聚体产品,进一步验证了该工艺在3-羟基丁酮分离中的应用潜力。