摘要：选取非洲猪瘟病毒(ASFV)结构蛋白基因VP73中保守性强的区域,人工合成该基因片段;再根据GenBank中公布的ASFV的VP73基因序列,设计特异性引物,利用PCR扩增该VP73基因片段,克隆入pET-32a(+)载体,以构建的重组质粒为模板建立了检测ASFV的PCR检测方法。优化扩增条件,并组装成PCR试剂盒。结果显示,PCR扩增出429bp的ASFV VP73基因片段;该试剂盒与猪伪狂犬病病毒、猪瘟病毒(疫苗株)、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪乙型脑炎病毒、猪细小病毒、健康猪和蜱的基因组无交叉反应。试剂盒敏感性可达0.1fg。试剂盒批内和批间检测结果无明显差异,稳定性良好。置于4℃和-20℃条件下保存12个月,试剂盒稳定性无明显改变。结果表明,研制的ASFV PCR试剂盒为ASFV的快速检测及流行病学调查提供了技术手段。

摘要：从山东地区疑似新城疫病毒(NDV)感染鸽群中分离到两株新城疫病毒分别命名为pigeon/China/bz12和pigeon/China/bz11,经蚀斑纯化后测定其鸡胚平均死亡时间(MDT)分别为76.6h、78.8h,1日龄雏鸡脑内致病指数(ICPI)分别为1.98、1.95,符合NDV强毒特征。设计NDVF基因特异性引物,使用RT-PCR从纯化后鸡胚尿囊液中扩增获得了约1662bp基因条带,序列测定确认为NDVF基因,其氨基酸一级结构包含553位氨基酸残基,F0蛋白裂解位点含112-RRQKRF-117氨基酸序列,具有NDV强毒株分子特性。依据yellow基因序列同源性对获得2株NDV分离株和42株NDV参考毒株基因型分型,结果显示,2株鸽源NDV分离株都属于基因Ⅶ型,其与基因Ⅶ型NDV不同分离株同源性达93.5%～99.8%,与鸡源强毒NDV分离株Chicken/China/SD8/2010同源性高达99.8%,表明这两株鸽源分离毒株可能来源于感染的鸡群。

摘要：为建立一种敏感、特异、快速、高通量的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体血清学检测方法,本研究利用原核表达技术表达了PRRSV M蛋白,将纯化后的重组M蛋白作为包被抗原建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法。参照已发表的PRRSV基因组M基因序列,设计合成1对特异性引物,RT-PCR扩增了长约435bp的M基因片段,将目的片段亚克隆至pET32a(+)表达载体中,经IPTG诱导获得了以包涵体形式表达的重组M蛋白,重组蛋白纯化后,免疫印迹检测结果表明具有良好的抗原性和特异性。以重组M纯化蛋白为包被抗原,经间接ELISA反应条件的优化,建立了检测PRRSV抗体的间接ELISA方法,该方法检测猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪圆环病毒2型(PCV2)其他6种常见猪病病原的阳性血清均为阴性;该方法批内与批间重复性试验的变异系数分别小于5%和10%;该方法与商品化ELISA试剂盒的符合率为95.3%。本研究建立的M-ELISA检测方法将为猪群免疫PRRS疫苗后抗体水平监测及PRRSV野毒感染的快速诊断与流行病学调查等提供了一种简便易行、快速、高通量的血清学抗体检测方法。

摘要：为了提高乳酸肠球菌在真空冷冻干燥过程中的存活率以及后期菌粉保存的效果,采用单因素试验和Box-Behnken响应面试验相结合的方法,筛选和优化乳酸肠球菌真空冷冻干燥过程中的最优保护剂配方。结果表明:脱脂奶粉、海藻糖和甘油3种保护剂效果较好,能够显著提高乳酸肠球菌真空冷冻干燥后的存活率。将上述3种保护剂作为自变量,以冻干后菌体的存活率作为响应值进行响应面试验,得到乳酸肠球菌优化保护剂配方:脱脂奶粉20.82%、海藻糖13%、甘油3%,通过进一步验证和保存试验研究,采用优化后的保护剂配方,菌体冻干后的存活率均在80.00%左右,冻干菌粉在4℃条件下可以保存24个月。

摘要：本文研究了在室温下,采用不同处理压力和时间对核桃雄花序体内的多酚氧化酶和过氧化物酶的活性影响,并研究了对其体内Vc、叶绿素、可溶性蛋白质的含量的影响。结论表明,采用500MPa、15 min的超高压处理后,可有效的抑制核桃雄花序体内多酚氧化酶和过氧化物酶的活性,防止其在采摘后迅速褐变、衰老。而且最大程度的保留了其体内的主要营养成分及色泽。并为核桃雄花序加工和产品开发提供了依据。

摘要：针对高职类专业教材食品微生物检验技术存在的问题,通过优化课程整体设计,结合食品检验岗位的实际要求重构教材内容,明确了食品微生物检验技术活页式教材的开发原则,研究了活页式教材内容的编写,以提高从事食品微生物检验工作的高素质技术技能型人才的培养质量。

摘要：说课有利于提高教师的教学能力。实践证明,说课活动有效地调动了教师投身教学改革,学习教育理论,钻研课堂教学的积极性,是提高教师素质,培养造就研究型、学者型教师的最好途径之一。文章对《仪器分析技术》课程的课程设计、教学内容、学情分析、教学方法及考核、课程特色等方面进行分析探讨。

摘要：通过对山东省青州市新建住宅小区绿地的实地调查,对青州市新建住宅区的园林绿化现状进行分析,总结青州市住宅区常用园林绿化植物种类、应用频率及存在的问题,针对青州市住宅区绿化存在的问题提出可行性建议。

摘要：试验旨在开发一款具有一定保健价值的瓜蒌皮汽酒,提高瓜蒌的利用率和附加值。通过单因素和正交试验,以酒精度、感官评分等为指标,分别对初始糖度、酵母接种量、主发酵温度和主发酵时间进行优化。结果表明,初始糖度20%,酵母接种量0.04%,主发酵温度28℃,主发酵时间10 d为最优条件。此条件下所得样品酒精度可达11.0%,感官评分为86.7分,适于饮用。

摘要：酚类物质是一类高毒性的有机污染物,对生态安全和人类健康构成严重威胁。因此,检测和去除酚类物质至关重要。天然漆酶作为一种多酚氧化酶,能够高效地催化多酚氧化生成水,具有绿色高效的多功能生物催化剂特性,在生物传感和污染物降解领域具有重要应用价值。然而,天然漆酶的成本高、稳定性差且难以回收利用,这些问题限制了其实际应用。为解决上述问题,研究者开发了纳米酶,这是一种具有类似天然酶催化特性的功能材料,能够弥补天然酶的不足。受天然漆酶活性中心含有4个配位铜原子的启发,设计并合成了铜基纳米酶材料。本文主要介绍了漆酶活性的评价方法,以及由不同有机化合物配体(有机小分子、核苷酸和氨基酸等)组成的铜基有机杂化纳米酶,并探讨了配位原子和配位环境对漆酶活性的影响。同时,总结了铜基有机杂化材料在酚类物质检测和降解方面的应用进展,并展望了具有类漆酶活性的铜基有机杂化材料的发展趋势。