摘要：低温、高盐和干旱胁迫严重影响作物的生长和产量。为了挖掘花生逆境胁迫相关功能基因,本研究以花生品种花育33号为试验材料,根据c DNA文库中已知的脱水素(dehydrin,Dhn)基因全长序列设计引物,通过RT-PCR克隆到该基因,并命名为AhDHN1。该基因编码框为384bp,编码128个氨基酸。序列分析表明该氨基酸序列含有两个保守的富含赖氨酸片段和一个保守的富含丝氨酸片段,表明该蛋白为K2S型脱水素。荧光定量PCR结果显示,AhDHN1基因在花生的叶片和根中对低温没有明显响应,对高盐和干旱胁迫则有明显响应,说明该基因可能参与了花生对高盐和干旱胁迫的适应性调控。本研究为阐明花生抗逆分子机理提供了理论基础,为花生抗逆分子育种提供了新的基因资源。

摘要：生长习性是影响花生种植密度的重要因子,与株型育种及产量高度相关。花生突变体A38来自匍匐型高油酸品种SunOleic 97R的EMS诱变,其株型直立,且高抗花生晚斑病。本研究以该突变体A38与其野生型SunOleic 97R杂交构建的F 1、F2群体为材料,开展了A38的表型鉴定及其生长习性的遗传分析。与匍匐型的SunOleic 97R相比,突变体A38的生长习性为直立型,所有F 1植株表现半匍匐表型,F2分离群体中直立、半匍匐和匍匐的分离比例比符合1∶2∶1。表明A38的直立突变表型受单隐性核基因控制,匍匐对直立为不完全显性。研究结果将为下一步控制花生生长习性基因的克隆、株型的分子设计育种改良奠定基础。

摘要：利用植物抗病基因核苷酸结合位点(NBS)的保守区设计一对特异引物,以抗、感黄曲霉病花生品种J11和金花1012的种皮基因组DNA和RNA为材料进行DNA-PCR和RT-PCR扩增,经克隆、测序,得到一条504 bp的目的片段pnbs1,在GenBank上的登录号为GQ199610。Blast和Blastx分析发现pnbs1核苷酸序列与C8V1G10F抗性蛋白的核苷酸序列的同源性为89%,与抗性蛋白PLTR的氨基酸序列同源性为59%。该片段的氨基酸序列中含有抗病基因NBS区域的3个保守模体:GPGGVGKTT、KKFFIVLDDVW和STILLTTR,推测pnbs1可能是花生NBS类抗性基因的核心区域。

摘要：为了解析胆盐水解酶催化中心中关键氨基酸位点与其底物特异性的关系,以大肠杆菌pET-20b(+)表达系统为分子改造平台,采用理性设计,结合氨基酸定点突变的方法,成功构建了唾液乳杆菌Lactobacillus salivarius胆盐水解酶BSH1的7种突变体。通过对比*** BSH1及其突变体对6种结合胆盐的底物特异性表明,7种突变体对不同的结合胆盐的水解活性有所改变。结果说明,Cys2和Thr264分别是BSH1催化TCA和GCA的关键残基,且对酶的催化活性的保持具有关键作用。其中,高保守性的氨基酸位点Cys2不是BSH1唯一的活性位点,而其他突变的氨基酸位点可能作为BSH1的结合位点参与了底物的结合,也可能影响了底物进入BSH1活性中心的通道或底物结合口袋的体积与形状,进而影响了BSH1对不同结合胆盐的水解活性。

摘要：为了挖掘花生品质性状相关功能基因,本研究以花生品种花育17号为试材,根据c DNA文库中已知的FUSCA3基因全长序列设计引物,通过RT-PCR克隆到该基因,命名为Ah FUSCA3。Ah FUSCA3全长为1 532 bp,开放阅读框ORF为1 134 bp,对应的基因组序列3 892 bp,由6个外显子和5个内含子组成,内含子剪接方式符合GT-AG剪接规则。根据编码区预测Ah FUSCA3编码一条378个氨基酸组成的多肽,预测分子量为42.3 k D,等电点为5.58。预测该基因编码的蛋白含有B3保守结构域,可能定位于细胞核中。蛋白序列比对和进化树分析表明,花生与大豆(Glycine max)、菜豆(Phaseolus vulgaris)、鹰嘴豆(Cicer arietinum)和苜蓿(Medicago truncatula)等豆科植物中的FUSCA3序列相似性最高,亲缘关系最近。荧光定量PCR结果显示,Ah FUSCA3基因表达量在花生荚果、种子发育的过程中呈现先增后降的趋势,推测Ah FUSCA3基因在花生胚胎形成和发育过程中发挥重要作用。本研究为阐明花生胚胎发育过程和油脂代谢机制提供了理论基础,为花生品质改良育种提供了新的基因资源。

摘要：采用随机区组试验设计和多点取样调查方法,通过人为控水设置苗期干旱、苗后期至盛花期干旱、开花期干旱、正常滴灌4个处理,研究各处理花生植株发育、产量性状与3个时期干旱的关系。结果表明,苗后期至盛花期干旱(T2)处理可减少主茎高和侧枝长,其苗后50天株型指数为1.02,开花集中在花后10~20天,有效果针率46%以上,保持了适度的总分枝数和单株结果数、单株果重,荚果产量与正常滴灌(CK)差异不显著;苗期干旱(T1)促进总分枝数的增加;开花期干旱(T3)减少单株结果数和单株果重。因此,苗后期至盛花期干旱(T2)为最优处理,有利于塑造更加直立、适宜机收的株型,且荚果产量不降低。

摘要：从不亲和野生花生ArachisglabrataBenth中提取DNA,在多重序列比对的基础上设计PCR引物,成功扩增出约350、750bp的两个片段,与DES和RS基因片段预期分子量相符。PCR产物与T载体连接,转化受体菌XL1 Blue,获得了白色菌落。挑取白色菌落在液体培养基中过夜培养,经TTE溶液和热处理后进行PCR扩增,获得了载有目的基因片段的阳性重组子。测序和序列比对分析的结果说明,DES和RS基因片段克隆成功。这是首次从不亲和野生花生***中克隆出的基因片段。该片段可用作探针克隆相关基因全编码区。

摘要：提出了一套基于已有DNA序列信息快速获得花生目的序列的技术流程。运用花生籽仁未成熟叶片简单预处理PCR技术,根据一个种子中特异表达的基因cDNA序列设计特异性引物,用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增,4个花生基因型中有3个得到预期长度的产物。随后取其中育种品系02 B4籽仁未成熟叶片,简单预处理后采用PyrobestDNA聚合酶作高保真扩增,得到产物后直接测序。结果表明,该基因片段与已报道的花生PSC33羽扇豆球蛋白cDNA序列表现出高度同源性。本研究为分离其编码区上下游序列奠定了基础。

摘要：小麦花生两熟制一体化施肥技术是小麦花生两熟制高产高效优质栽培的重要措施之一，日益受到人们的重视。李向东等研究了全年定量有机肥和化肥分配技术，本文作者研究了Ｎ、Ｐ、Ｋ单因素肥料合理运筹技术。为进一步完善小麦花生施肥技术，在研究单因素肥料合理运筹的基础上，又于１９９５～１９９６年对小麦花生两熟制Ｎ、Ｐ、Ｋ一体化优化施肥技术进行了研究。１　材料与方法试验在莱西市进行。试验地为砂壤土，０～３０ｃｍ土层有机质０．９８％，碱解氮４２．５ｍｇ／ｋｇ，速效磷２７．２ｍｇ／ｋｇ，速效钾６５ｍｇ／ｋｇ。试验因子为Ｎ（尿素）、Ｐ２Ｏ５（过磷酸钙）、Ｋ２Ｏ（硫酸钾）。采用三因素二次饱和Ｄ—最优设计，因子水平编码见表１。小区面积２０ｍ２，重复２次。小麦于９月２５日播种，次年６月１７日收获，品种莱州９５３；花生于６月２０日播种，９月２５日收获，品种鲁花１４号。小麦基肥于　　表１因子水平编码表水平Ｎ（ｋｇ／６６６．７ｍ２）Ｐ２Ｏ５（ｋｇ／６６６．７ｍ２）Ｋ２Ｏ（ｋｇ／６６６．７ｍ２）－１００００１５１２．５１２．５１３０２５２５间距１５１２．５１２．５　　注：表中各元素用量为小麦花生全年用量，施肥时前后两作分配比为４∶１。其中小麦Ｎ肥１／...

摘要：试验以花育20、花育45、鲁花11无菌花生子叶为材料,采用3×3双因子设计,研究3株发根农杆菌菌株和花生品种对花生发根诱导率的影响。结果表明:发根农杆菌和花生品种均显著影响发根诱导率。花育45的发根诱导率最高,为93.7%,其适宜菌株为A4;花育20的发根诱导率为89.2%,适宜菌株为ATCC15834;鲁花11的发根诱导率为73.4%,适宜菌株为GIM1.141。