摘要：目的:建立速率法检测血清总胆固醇浓度的方法,并进行方法学评价,探讨其实际应用可行性。方法:配制临床可出现浓度范围的系列胆固醇标准品,通过观察不同浓度胆固醇按照胆固醇氧化酶-过氧化物酶法(COD-PAP)反应过程中呈色物质在一定波长下的吸光度变化曲线特点,绘制进程曲线。确定反应体系最佳试剂量、样本量、孵育时间、线性反应时间、K因子等参数值,制订自动化设备速率法检测血清总胆固醇的系列参数,并对其精密度、线性特点、范围、可靠性进行方法学评价。结果:确定样本量为10μL;试剂1 mL,在37℃下孵育5 s后呈色物质在510 nm波长吸光度变化进入线性期,在18 s线性反应阶段基本结束。设置测定时间分别为5 s和15 s,最终得出K因子为23.28。方法学评价显示该反应在浓度为1.32~10.00 mmol/L呈线性,各浓度绘制曲线R^(2)均>0.99,方法精密度良好,批内变异系数(CV)值为2.62%,终点法和速率法的20组人血清总胆固醇测定结果进行配对t检验,P>0.05,差异无统计学意义,认为速率法测定血清总胆固醇浓度可接受。结论:速率法检测血清总胆固醇浓度的方法检测范围、精密度、可靠性均良好,能快速检测出结果。

摘要：目的:对SARS-CoV-2核衣壳(N)蛋白进行系统生物信息学分析和原核表达,阐明其功能和病毒RNA复制机制。方法:采用UniProt、NetPhos 3.1、IEDB和Blast等生物信息学软件对N蛋白的理化性质、蛋白互作网络、翻译后修饰、同源性及系统进化关系等生物学特性进行系统分析。构建原核表达质粒pET-22b-N并表达蛋白。结果:N蛋白是由419个氨基酸组成的碱性蛋白,分子量为45.62 kD,等电点为10.07,其N端有1个RNA结合结构域,C端有1个二聚体界面,有57个可能的磷酸化修饰和25个潜在糖基化修饰,15个T细胞抗原表位和11个线性B细胞抗原表位,无信号肽和跨膜螺旋,是一种亲水性蛋白。N蛋白中无规则卷曲占比最高(54.42%),其次为α-螺旋(22.20%)。与N蛋白序列一致性最高的是BtRs-β-冠状病毒/HuB2013和蝙蝠冠状病毒Rp/Shaanxi2011,进化分析显示SARS-CoV-2与蝙蝠非典型冠状病毒YNLF_31C聚为一支。原核表达后发现,细菌裂解液离心后的沉淀中有大量N蛋白表达,为后续蛋白纯化和结构分析提供了依据。结论:N蛋白在SARS冠状病毒和蝙蝠冠状病毒间高度保守,为SARS-CoV-2 N蛋白结构与功能研究提供了基础,为靶向N蛋白的抗病毒药物设计提供了依据。

摘要：SARS-CoV-2是一种高致病性且传播迅速的病原体,通过刺突糖蛋白(Spike glycoprotein,S蛋白)识别宿主细胞表面的受体来实现入侵和感染。对S蛋白进行系统的生物信息学分析和原核表达,有助于深入理解S蛋白的功能和阐明该蛋白介导病毒感染的分子机制。本文采用Protparam、Pfam、TMHMM、ExPASy-ProtScale、PSORTⅡ、SignalP、UniProt、NetPhos 3.1、NetNGlyc 1.0、NetOGlyc 4.0和BLAST等生物信息学软件和数据库对S蛋白的理化性质、亚细胞定位、翻译后修饰及相互作用网络等生物学特性进行了系统分析。利用Clustal X2和MEGA7.0软件对该蛋白进行了基于氨基酸序列的同源性分析和系统进化分析。最后,通过分子克隆技术构建重组表达载体pET-22b-S并进行原核表达。结果显示,S蛋白由1273个氨基酸组成,分子量141.2 kD,等电点6.24,有两个卷曲螺旋结构,一个跨膜螺旋区,疏水性较强。S蛋白包含刺突受体结合结构域和S2糖蛋白结构域,主要分布于宿主细胞的内质网膜和细胞膜,含有136个潜在的磷酸化位点和20个可能的糖基化位点。与SARS-CoV-2 S蛋白序列一致性最高的是SARS冠状病毒、SARS冠状病毒WH20和蝙蝠冠状病毒HKU3,均为76%。SARS-CoV-2与SARS冠状病毒和蝙蝠冠状病毒聚为一大支,提示它们可能具有共同的祖先。S蛋白主要在细菌裂解液离心之后的沉淀中表达,这为后续的结构分析和疫苗研发奠定了基础。S蛋白在SARS冠状病毒和蝙蝠冠状病毒之间保守性较高,提示其在病毒入侵过程中具有重要功能。SARS-CoV-2与SARS冠状病毒和蝙蝠冠状病毒可能具有共同的祖先。本研究为SARS-CoV-2 S蛋白的表达纯化、结构与功能研究提供了重要的数据基础,有助于全面揭示S蛋白的生物学功能,同时为设计和筛选靶向S蛋白的新型抗病毒药物提供了科学依据。

摘要：目的设计适用于实习前护理专业学生的叙事护理培训方案,并探讨其对学生共情能力的影响。方法2022年6月,便利抽样选取山西省某三级甲等医院即将进入临床实习的72名本科护理专业学生为研究对象,开展为期1周的叙事护理培训,内容包括叙事护理概述、关注患者的途径、理解患者的策略、回应患者的方法、叙事护理个案分享5个教学主题,并融合案例教学、合作式学习法、精细阅读、反思日记等多种教学方法,采用Jefferson共情量表护理专业学生版和个人反思报告进行效果评价。结果培训后,学生观点采择和换位思考2个维度得分及量表总分均高于培训前,差异有统计学意义(P<0.05)。个人反思报告分析显示,学生认为叙事护理知识实用且有价值;通过培训,更懂得去理解他人、尊重他人和保持善良。结论本次叙事护理培训内容和方法切实可行,可提高实习前护理专业学生的共情能力。

摘要：[目的]了解三级甲等医院护理英语实际使用需求,并提出课程设计对策。[方法]采用自行设计的调查问卷,对省内外7所三级甲等医院的627名护士的护理英语实际使用需求进行调查。[结果]三级甲等医院护士在临床很多场合使用到护理英语,最常用的是晋升职称、阅读英文说明书、撰写英文摘要时;有关常见给药法、生命体征测量等基础护理项目及糖尿病、冠心病等内科系统疾病的护理英语表达是护士最为需要的护理英语常用内容;阅读能力是护士最为渴求掌握的护理英语技能。护理英语课程设计对策包括以临床需求为准则规划设置护理英语课程教学内容;以阅读能力的养成与提升为护理英语课程教学目标;依据护理英语使用场合确定护理英语课程教学方法。[结论]护理英语在三级甲等医院临床护理工作中存在着一定的使用需求,在此基础上提出的护理英语课程设计对策,并以培养临床护士在对外护理工作中的交流沟通能力和获取专业学术信息与对外学术交流的能力为重心,值得临床参考借鉴应用。

摘要：目的探讨基于混合式教学的老年护理学课程思政方案的实施效果。方法选取我校三年级122名护理本科生为研究对象,根据各教学主题的专业内容和思政素材,分别制订相应主题的思政目标和体现方式,设计每个知识点的课前线上任务清单、课堂教学步骤和课后线上思政园地内容,在课堂教学中进行共同关注与主题讨论、案例教学、精细阅读、致敬典范等。实施后采用学生平时成绩、老年人健康评估情景剧汇报和课程满意度调查问卷评价教学改革效果。结果学生线上学习主动性提高,平时成绩均分为43.3分(满分50分);情景剧汇报准备充分,成绩均分为41.5分(满分50分);学生对课程思政混合式教学的设计与实施满意度为94.26%。结论基于混合式教学的老年护理学课程思政方案丰富了专业教学的内容和方法,在提高学生学习兴趣的同时,有助于学生的价值引领。

摘要：目的探讨社区新入职护士沟通能力的培训方法和效果。方法选取8所社区卫生服务机构2018年新入职的46名护士为培训对象,开展为期4周的沟通能力培训,主要包括慢病家庭访视、健康保健、临终关怀及用药指导4个主题。培训前后分别用医患沟通技能评价表(set the stage,elicit information,give information,understand the patients perspective,end,SEGUE)评价护士的沟通能力。结果培训后考核合格率由39.13%提高至93.48%,培训前后SEGUE量表各维度得分差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论社区新入职护士沟通能力培训有助于提高新入职护士的沟通技巧水平。

摘要：该文通过合成两种Lindqvist型六钼酸芳香亚胺含氯衍生物TBA_(2)[Mo_(6)O_(18)(N-C_(6)H_(4)-Cl-p)](Ⅰ)和TBA_(2)[Mo_(6)O_(18)(N-C_(6)H_(4)-Cl-o)](Ⅱ),并采用电喷雾质谱法(ESI-MS)实时监测其合成反应过程,对两个反应体系中各物质含量随反应时间的变化趋势进行分析,考察了多酸芳香亚胺衍生物中芳香胺不同取代基的位置对衍生物合成反应速率及结构稳定性的影响。并通过碰撞诱导解离技术(CID)研究了两种衍生物离子的气相裂解反应,获得了其气相裂解途径及结构稳定性信息。ESI-MS实时监测结果显示,两种衍生物合成过程中,0~3 h内产物生成速率较小,而3~6 h期间反应速率最大,6~9 h次之,9~12 h反应速率明显减小。对氯苯胺的pKb小于邻氯苯胺,是衍生物Ⅰ的合成反应速率大于Ⅱ的重要原因。CID结果表明,相较于Ⅰ离子,Ⅱ离子的气相结构稳定性更弱,主要原因是Cl原子取代基的综合电子效应为吸电子效应,其在邻位取代比对位取代距离维系离子稳定性的Mo≡N键更近,导致Ⅱ中Mo≡N键电子云密度下降程度更大,离子的稳定性比Ⅰ更弱。综上,ESI-MS是一种研究多酸有机官能化衍生物的可靠技术,可为该类衍生物结构稳定性的研究及后期的导向设计合成提供基础信息。

摘要：对分布式认知网络中的多域并行入侵进行预警在提高分布式认知网络安全性能方面具有重要意义。由于多域并行入侵者的攻击行为具有较强的随机性,采用当前入侵预警方法预测入侵意图难,无法阻止分布式认知网络攻击行为,存在预警反应时间长,入侵攻击对抗性差等问题,提出一种基于三层攻击图的分布式认知网络多域并行入侵实时预警方法。通过对分布式认知网络多域并行入侵者攻入主机后的攻击数据进行分析,建立了分布式认知网络三层攻击图,通过对多域并行入侵意图的概率分析来定量攻击图,采用隐马尔科夫模型设计分布式认知网络多域并行入侵攻击行为预测模型,以多域并行攻击行为预测模型为核心,构建主动入侵实时预警策略。实验结果表明,该方法能够迅速发现一些未知入侵攻击,入侵攻击对抗性强。

摘要：目的:探究GRP78对宫颈癌SiHa细胞生物学行为的影响以及作用机制。方法:采用RNAi技术沉默SiHa细胞中GRP78基因的表达。将针对不同位点设计的siRNA通过脂质体介导分别转染入SiHa细胞,通过免疫印迹法和qRT-PCR分别检测转染前后SiHa细胞GRP78蛋白和GRP78 mRNA的表达。划痕实验检测SiHa细胞的迁移能力;Transwell实验检测SiHa细胞的侵袭能力;免疫印迹法检测上皮间质转化相关蛋白及增殖相关蛋白的表达;流式细胞术检测SiHa细胞的凋亡率。结果:转染后,GRP78 mRNA和GRP78蛋白表达水平均明显降低且GRP78-siRNA1501的沉默效果最显著,基因水平和蛋白水平的检测总体趋势相符合;此外,与空白组和NC-siRNA组相比,GRP78-siRNA1501组SiHa细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显增高,N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平明显降低,且增殖相关蛋白P-AKT^(ser473)、P-GSK3β^(ser9)、Cyclin D1、CDK4表达水平也明显降低;Annexin V-FITC/PI双染结果显示,GRP78-siRNA1501组SiHa细胞的凋亡率明显高于NC-siRNA组。结论:沉默SiHa细胞中GRP78基因,会导致SiHa细胞增殖、侵袭和迁移能力减弱,并促进其凋亡。增殖能力减弱可能与抑制AKT/GSK3β/Cy-clin D1信号通路有关,侵袭和迁移能力减弱可能与抑制上皮间质转化的进程有关。