摘要：目的探索正交设计在实时定量PCR检测条件优化中的应用,找出扩增ICAM-1基因的最佳条件。方法建立大鼠皮肤损伤模型,采用正交设计实时定量PCR的各影响条件,提取损伤处皮肤组织总RNA反转录成cDNA,cDNA作为模板,通过特异性引物扩增ICAM-1基因。对扩增曲线和融解曲线制定评分标准,量化不同实验条件下的扩增结果并进行统计分析。结果退火温度、模板量和引物浓度直接影响扩增效果,但三因素间无相互作用。结果经统计学分析表明退火温度61℃、模板cDNA用量0.4μg和引物终浓度150μmol/L为实时定量PCR检测ICAM-1基因的最佳条件组合。结论正交设计是一种切实可行、快速经济的实时定量PCR检测条件优化方法。

摘要：目的建立一个简便可靠、易于控制的低电压损伤的大鼠电击伤模型。方法自行设计电击系统一套,Wistar大鼠60只随机分为3个组,预试验组(n=10),实验组(n=40),对照组(n=10)。在实验组电击停止即刻监测电击伤组大鼠心电图变化,死后30min取心脏、脑、骨骼肌、局部皮肤及皮下组织固定、包埋、HE染色。结果实验组中有36只于电极连接处出现明显电流斑,4只未出现明显电流斑。肉眼和光镜观察实验组大鼠皮肤组织、骨骼肌、心肌、血管、脑组织较对照组有明显改变,且电击后即刻心电图与正常心电图相比也有明显改变。结论该电击伤模型具有明显电流损伤的特点,对于电流损伤的法医学研究有价值。

摘要：目的通过对生前电击、死后电击及正常的皮肤组织运用Mowory(ABPAS)法和Alcian blue染色来鉴别生前电击与死后电击电流斑的不同。方法自行设计电击系统一套,雄性Wistar大鼠18只,分为:生前电击死组、死后电击组和非电击对照组,每组各6只。生前电击死组及死后电击组均于电击后即刻取电击处皮肤组织;非电击对照组脱颈处死后即刻取对应部位皮肤组织。三组皮肤组织均行中性甲醛固定,制成石蜡切片后分别进行Mowory(ABPAS)法、Alcian blue-核固红、HE染色。结果生前电击死组、死后电击组与非电击对照组皮肤网织层采用Mowory(ABPAS)法和Alcian blue-核固红法染色均有明显区别;生前电击死组与死后电击组大鼠皮肤网织层采用Mowory(ABPAS)法染色无明显区别,而采用Alcian blue-核固红法染色时生前电击死组网织层染色呈红色,死后电击组网织层染色呈蓝色,存在明显差异。结论 Alcian blue-核固红法较Mowory(ABPAS)法不仅对生前与死后电流斑的鉴定有重要的价值,而且有助于不典型电流斑的认定。

摘要：目的研究电击死大鼠的心脏在HE染色和Alcian blue-核固红染色下的形态学变化,为电击死和电损伤的鉴定提供一定依据。方法自行设计电击系统一套,雄性Wistar大鼠12只,分为正常对照组和电击死组,每组各6只。电击死后取大鼠心脏中性甲醛固定,制成切片后分别进行HE染色和Alcian blue-核固红染色。结果与正常组大鼠心肌染色相比,电击死组光镜下HE染色仅可见心肌纤维明显断裂,间质水肿、出血,而Alcian blue-核固红染色法可见心房和房间隔的特定区域组织蓝染。结论电击前后心脏HE染色与Alcian blue染色差异对电流损伤的研究有一定的参考价值。