摘要：目的基于生物信息学方法筛选肾透明细胞癌关键基因,识别可能的微RNA(miRNA)-mRNA作用轴,探讨相关基因在肾透明细胞癌组织和细胞中的表达。方法选取基因表达综合(GEO)数据库基因表达谱GSE40435、GSE71302数据集,肾透明细胞癌TCGA-KIRC数据集来自癌症基因组图谱(TCGA)数据库。采用R软件筛选差异表达的mRNA和miRNA,并对mRNA进行功能富集分析。采用STRING数据库和Cytoscape软件进行蛋白质互作分析。采用Oncomir数据库筛选预后相关的差异表达miRNA。采用TargetScan和miRDB靶基因预测工具筛选miRNA可能调控的靶基因。收集2021年6月至12月山西医科大学第一医院收治的34例肾透明细胞癌患者的组织样本及临床资料,并选择正常肾细胞株293T和肾透明细胞癌细胞株786O。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测基因的相对表达量;蛋白质印迹法、免疫组织化学染色法检测目的蛋白的表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证基因间的靶向关系。结果差异分析筛选得到1351个差异表达mRNA和50个差异表达miRNA。功能富集分析提示肾透明细胞癌中脂肪酸代谢、异生物质代谢等途径被抑制,细胞凋亡、免疫应答途径被激活。蛋白质互作分析提示肾透明细胞癌中信号转导、蛋白泛素化等途径起到关键作用。筛选结果显示miRNA-224-5p(miR-224-5p)与肾透明细胞癌进展关系最紧密,且在肿瘤组织中高表达,其预后相关靶基因为NEDD4L。肾透明细胞癌组织与癌旁组织的NEDD4L mRNA相对表达量分别为0.138±0.103、1.000±0.026(t=46.23,P<0.05);miR-224-5p相对表达量分别为1.000±0.043、0.129±0.108(t=45.28,P<0.05)。不同分级及分期肾透明细胞癌组织NEDD4L mRNA、miR-224-5p的表达差异均有统计学意义(均P<0.05)。NEDD4L蛋白在肾透明细胞癌中表达降低。293T与786O细胞中NEDD4L基因相对表达量分别为1.000±0.125、0.210±0.044(t=17.52,P<0.05);miR-224-5p基因相对表达量分别为0.209±0.049、1.000±0.234(t=10.609,P<0.05)。转染后的293T细胞样本中,miRNA模拟物组与阴性对照组的NEDD4L mRNA相对表达量分别为0.236±0.062、1.000±0.024,差异有统计学意义(t=43.56,P<0.05)。NEDD4L蛋白在miRNA模拟物组中表达降低。双荧光素酶报告基因实验提示NEDD4L是miR-224-5p的直接靶基因。结论在肾透明细胞癌中,miR-224-5p靶向调节NEDD4L表达,这一机制可能与肾透明细胞癌的发生、发展有关。

摘要：肾细胞癌是泌尿系统常见的肿瘤之一。尽管肾细胞癌发病率在世界范围内一直居高不下,但是得益于腹腔镜技术的发展以及靶向药物的应用,癌症的控制和患者的生存率取得了一定的改善。最新研究证实肾细胞癌的进展与肿瘤免疫微环境中的细胞代谢相关。因此在现有手术、免疫治疗的基础上,探求靶向肿瘤细胞代谢途径、干扰肿瘤细胞微环境的新型代谢疗法会为肾细胞癌提供一种独特的治疗方案。

摘要：目的探讨基于生物信息学方法构建的肾透明细胞癌(ccRCC)预后相关的铜死亡相关差异长链非编码RNA(lncRNA)评分公式在患者临床诊断、预后预测以及治疗抉择中的价值。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库获取ccRCC患者的基因矩阵和临床数据(数据更新至2022年3月29日)。基因矩阵收录539例ccRCC组织和72例癌旁正常组织表达数据;临床数据收录530例ccRCC患者资料。采用Pearson相关性分析、Wilcoxon符合秩检验和单因素Cox比例风险模型分析筛选预后相关的铜死亡相关差异lncRNA。采用R软件将530例包含生存资料的ccRCC患者以近似1∶1的比例随机抽样分组,分为训练集(266例)和验证集(264例)。采用LASSO回归构建铜死亡相关差异lncRNA评分公式并进行交叉验证。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估铜死亡相关差异lncRNA评分公式的特异度和灵敏度,计算曲线下面积(AUC)。根据中位风险值将ccRCC患者分为低风险组和高风险组,采用Kaplan-Meier法分析高、低风险组患者总生存(OS)的差异。采用t检验分析不同临床病理特征患者的风险值差异。采用R包rms构建可以预测ccRCC患者1、3、5年OS率的列线图。采用R包pRRophetic预测ccRCC患者临床治疗中常见的靶向药物(如索拉菲尼、舒尼替尼等)的半数抑制浓度(IC50),采用Wilcoxon符号秩检验比较高、低风险组患者IC50值。收集山西医科大学第一医院2021年6月至12月行根治性肾切除术患者经病理检测确诊的20例ccRCC组织及其配对癌旁正常组织。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测ccRCC组织关键lncRNA的表达。结果基于TCGA数据库中ccRCC患者10个铜死亡基因(FDX1、LIAS、LIPT1、DLD、DLAT、PDHA1、PDHB、MTF1、GLS、CDKN2A)的表达矩阵,筛选出153个与预后相关的铜死亡相关差异lncRNA。LASSO回归分析,最终得到包含4个铜死亡相关差异lncRNA的评分公式:风险值=0.020×AC015912.3+0.011×AC026401.3+0.063×AC103706.1+(-0.076)×EPB41L4A-DT。根据中位风险值(0.76)将患者分为高风险组(≥0.76)和低风险组(0.05)。构建的列线图对于患者1、3、5年OS率具有较好的预后准确性。高风险组应用舒尼替尼、西罗莫司敏感性更高,低风险组应用阿昔替尼、索拉非尼、帕唑帕尼敏感性更高。qRT-PCR检测结果表明,ccRCC肿瘤组织与癌旁组织比较,AC015912.3基因相对表达量为1.00±0.04比0.68±0.24(t=6.37,P<0.01),AC026401.3基因相对表达量为1.00±0.05比0.64±0.22(t=7.29,P<0.01),AC103706.1基因相对表达值为1.00±0.04比0.64±0.20(t=7.49,P<0.01),EPB41L4A-DT基因相对表达量为1.00±0.06、0.73±0.10(t=10.68,P<0.01)。结论基于TCGA数据库构建的铜死亡相关差异lncRNA评分公式可作为ccRCC患者临床诊断、预后预测的新型指标,帮助指导患者的临床药物治疗,有助于精准诊疗。

摘要：目的:探讨长链酰基辅酶A合成酶3(ACSL3)对肾透明细胞癌(ccRCC)细胞增殖、迁移、侵袭及脂质合成的影响。方法:使用肿瘤基因组图谱数据库分析ccRCC中ACSL3基因的表达情况。选取山西医科大学第一医院2021年10月至2022年10月手术切除的60对ccRCC和癌旁组织作为研究对象,利用荧光定量聚合酶链反应和免疫组织化学方法检测ccRCC组织中ACSL3表达水平;采用转染获得过表达ACSL3基因的细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、平板克隆形成实验验证细胞的增殖能力;采用划痕实验和Transwell实验验证细胞的迁移、侵袭能力;采用流式细胞术检测细胞的凋亡能力;采用油红O实验检测细胞的脂质合成能力。两组间计量资料比较采用t检验,多组间比较采用方差分析。结果:ACSL3在ccRCC中的表达水平显著低于正常肾组织(0.42±0.20比1.01±0.16,t=17.946,P<0.05)。CCK-8结果显示转染96 h后,h-ACSL3组细胞吸光度(A)值显著低于对照组(1.095±0.047比1.295±0.025,t=8.393,P<0.05)。h-ACSL3组细胞形成的细胞集落数显著小于对照组[(309.00±93.30)个比(499.00±53.66)个,t=3.947,P<0.05]。h-ACSL3组划痕愈合率显著低于对照组[48 h:(45±7)%比(66±2)%,t=5.253,P<0.05]。h-ACSL3组穿过基底膜细胞数少于对照组[(1445.33±107.75)个比(1963.00±294.28)个,t=2.861,P<0.05]。h-ACSL3组细胞凋亡率高于对照组[(7.28±1.95)%比(3.53±0.24)%,t=-3.305,P<0.05]。h-ACSL3组细胞脂滴积累减少。结论:ACSL3在ccRCC中表达降低,ACSL3过表达会抑制ccRCC的增殖、迁移、侵袭能力,促进细胞凋亡,影响癌细胞中脂滴聚集。

摘要：目的比较前列腺动脉栓塞术(PAE)与经尿道前列腺电切术(TURP)治疗良性前列腺增生的疗效与安全性,为前列腺增生症适宜治疗方案的选择提供理论依据。方法通过检索PubMed、EMBASE、Cochrane Library、CNKI、CBM、维普和万方等数据库,筛选出符合要求的PAE和TURP对比研究,并对所有纳入文献进行质量评价和资料提取,最后应用统计学软件Rev Man 5.3进行Meta分析,比较PAE与TURP治疗良性前列腺增生的优劣势。结果本研究最终共纳入9篇文献,共计675例患者。Meta分析结果显示:①临床疗效方面,术后3个月,TURP组优于PAE组,疗效指标IPSS、QOL、Qmax、PVR、PV的改善差异有统计学意义;术后12个月,TURP组改善情况优于PAE组,虽然指标IPSS、PVR的改善差异无统计学意义,但其余指标QOL、Qmax、PV的改善差异具有统计学意义;术后24个月,PAE组与TURP组治疗效果相近,指标IPSS、QOL、Qmax、PVR、PV的改善差异无统计学意义;PAE组失败率(4.4%)大于TURP组(0.5%);②安全性方面,PAE组比TURP组术中出血量少[MD=-98.25,95%CI:-105.51^-91.00,P<0.00001]、留置导尿时间短[MD=-1.61,95%CI:-2.31^-0.90,P<0.0006]、住院时间短[MD=-3.07,95%CI:-4.40^-1.74,P<0.00001];两组手术时间差异无统计学意义[MD=17.28,95%CI:-15.92~50.48,P=0.31];PAE组并发症(21.6%)少于TURP组(33.7%)。结论PAE治疗良性前列腺增生短期疗效(3个月)不及TURP;但中长期疗效(24个月)与TURP相近。总体来说,PAE较TUPR安全性高,具有术中出血量少,留置导尿时间短、住院时间短、并发症少的优点,对于不能耐受麻醉及TURP者可选择PAE治疗良性前列腺增生。但PAE手术失败率相对较高,其疗效的稳健性相对较差,目前尚没有足够的证据认定PAE优于TURP。未来随着更大样本、更多中心以及设计精良的随机对照试验出现,PAE用于治疗前列腺增生的疗效可以得到进一步的论证。

摘要：目的构建基于铜代谢相关基因和临床病理学特征的新型肾透明细胞癌(ccRCC)预后模型。方法2022年6月至2023年1月从基因集数据库(MSigDB)5.1版整理出铜代谢相关基因,应用癌症基因组图谱(TCGA)中ccRCC数据对获取的铜代谢相关基因进行生物信息学分析,得到32个铜代谢相关差异基因;用单因素比例风险回归(Cox)分析铜代谢基因,筛选出具有预后价值的60个铜代谢相关基因,两者取交集,得到14个关键基因,对其进行基因本体论(GO)分析、京都基因和基因组数据库(KEGG)通路分析及关联性分析。之后对关键基因进行套索回归分析(LASSO),结果显示有3个基因被纳入模型,计算公式为:风险分数=HAMP×0.205+TMPRSS6×0.097−CCND1×0.033。分别应用TCGA数据和基因表达综合数据库(GEO)中的ccRCC数据集GSE22541进行内部模型验证和外部模型验证;利用乘积极限法(Kaplan-Meier)生存曲线验证模型预后价值;利用受试者操作特征曲线(ROC曲线)下面积验证模型预测的准确性。结果生存状态图表明,高风险组死亡病例数多于低风险组;ROC曲线表明风险评分模型具备较好的预测能力,曲线下面积(AUC)均大于0.6;Kaplan-Meier生存分析显示,高风险组总体生存率低于低风险组(P<0.05)。结合临床病理学特征(年龄、肿瘤分级、肿瘤分期),构建诺莫(Nomogram)列线图,对病人预后具有较好的预测效果。结论基于铜代谢相关基因的预后风险评分模型可用于ccRCC的预后预测,针对铜代谢相关基因设计靶点可能是治疗ccRCC的一种新选择。

摘要：儿童/青少年性腺功能减退的病因多种多样,且由于在各阶段患儿自身情况不同,使得诊断更加困难。对于性腺功能减退,睾酮替代治疗在多种情况下是唯一的治疗方法,但其在应用方面存有争议。因为儿童/青少年性腺功能减退的鉴别诊断比较困难,且性腺功能减退的治疗方案多为成人设计。对于儿童/青少年的性腺功能减退仍然缺乏标准化的诊断、治疗和监测方案,应根据其的预期治疗目标进行个体化治疗。本研究回顾相关文献并对儿童/青少年性腺功能减退的临床表现、诊断、治疗目的、治疗方式进行综述。

摘要：肾是人体最主要的排泄器官,它将体内的代谢废物通过形成的尿液排出体外,调节体内水及电解质的平衡,维持稳定机体内环境理化性质,同时还可以分泌多种生物活性物质[1]。近年来,随着肾肿瘤发病率及检出率不断提高,肾手术也逐渐增加。腹腔镜下行肾手术时,血管的损伤是最严重的并发症之一[2],肾血管的寻找及处理是手术的难点[3],且当肾血管存在变异时,会提高处理难度,增加血管损伤的几率[4]。

摘要：目的评价肉碱治疗原发性弱精症的疗效和安全性。方法采用Cochrane系统评价方法,电子检索1995年1月至2006年12月期间MEDLINE、EMbase、Cochrane图书馆、CNKI等资料库,辅以手工检索及追查已纳入文献的参考文献。纳入肉碱治疗原发性弱精症的随机对照试验(RCT)。由2名评价者共同评价纳入研究的质量,对符合标准的研究采用RevMan4.2.10软件进行Meta分析。结果共纳入5个RCT,其中B级2个,C级3个,包括346例患者,排除失访人数后实际纳入307例进行Meta分析。Meta分析结果显示:①肉碱治疗3～6个月后,治疗组与对照组患者配偶的自然妊娠率差异有统计学意义[RR=2.46,95%CI(1.12,5.43),P=0.03];②肉碱治疗3个月和6个月后治疗组与对照组前向活动精子数差异均无统计学意义[WMD=9.16,95%CI(0.14,18.18),P=0.05;WMD=5.28,95%CI(-4.45,15.01),P=0.29)];③肉碱治疗3个月和6个月后治疗组与对照组前向活动精子率差异均无统计学意义[WMD=14.56,95%CI(-4.49,33.61),P=0.13;WMD=7.34,95%CI(-5.93,20.61),P=0.28];④肉碱治疗3个月和6个月后治疗组与对照组活动精子数差异均无统计学意义[WMD=15.32,95%CI(-1.34,31.98),P=0.07;WMD=6.20,95%CI(-3.00,15.39),P=0.19];⑤肉碱治疗3个月和6个月后治疗组与对照组精子总活动率差异均无统计学意义[WMD=2.97,95%CI(-5.75,11.69),P=0.50;WMD=4.48,95%CI(-9.17,18.14),P=0.52];⑥肉碱治疗3个月和6个月后治疗组和对照组精液量差异均无统计学意义[WMD=-0.12,95%CI(-0.55,0.30),P=0.57;WMD=0.03,95%CI(-0.38,0.45),P=0.87];⑦肉碱治疗3个月和6个月后治疗组与对照组精子密度差异均无统计学意义[WMD=7.92,95%CI(-2.85,18.68),P=0.15;WMD=1.02,95%CI(-5.09,7.14),P=0.74]。有3个研究报告治疗期间均无严重不良反应发生。结论现有证据显示,肉碱治疗可提高原发性弱精症导致不育患者配偶的自然妊娠率,但不能改善精液分析的各项指标,无明显不良反应。由于本系统评价纳入文献的数量及质量有限,目前尚不能肯定肉碱治疗能够改善原发性弱精症导致不育患者的预后。建议进行大样本、设计良好、指标全面的临床随机对照试验,以提供更佳证据。

摘要：目的通过生物信息学方法探讨肾透明细胞癌(cc RCC)中脂肪酸合酶(FASN)基因和蛋白的表达水平及其与肿瘤免疫细胞浸润的相关性。方法从癌症基因组图谱数据库检索FASN与cc RCC相关的表达谱数据,通过UALCAN数据库分析cc RCC中FASN基因表达水平及其与cc RCC患者临床病理分期、分级的相关性,使用基因表达谱动态分析网站分析FASN基因与cc RCC患者预后的相关性,使用人蛋白图谱数据库分析人组织中FASN蛋白表达水平,使用肿瘤免疫评估数据库和肿瘤微环境数据库分析FASN与肿瘤免疫的相关性,使用基因注释和分析数据库对FASN及相关基因进行功能富集分析。结果在不同病理分期、分级cc RCC中FASN基因表达水平均显著高于正常组织,FASN基因高表达的患者预后较差。FASN蛋白S207和S2198位点磷酸化水平在cc RCC中显著降低。FASN表达与cc RCC中CD8^(+)T免疫细胞浸润水平呈负相关,与调节性T细胞浸润水平呈正相关,免疫治疗会影响FASN与免疫细胞在cc RCC中共定位。FASN主要参与细胞脂质代谢、甾醇调节元件结合转录因子1激活基因表达、过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路、脂肪酸生物合成等生物功能。结论FASN在cc RCC中高表达,且与cc RCC患者临床预后、肿瘤免疫细胞浸润相关。