摘要：目的探讨吐根碱通过胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R)促进离体大鼠胰岛组织胰岛素分泌作用。方法分离大鼠胰岛组织进行胰岛素分泌实验,根据实验设计使用不同浓度的吐根碱(2、10、50μmol·L^(-1))、不同浓度葡萄糖(2.8、11.1、16.7 mmol·L^(-1))以及特异性GLP-1R拮抗剂Exendin(9-39)孵育胰岛组织。酶联放射免疫的检测方法测定每组上清液胰岛素分泌量。使用SYBYL-X2.0软件将小分子化合物与GLP-1R(PDB代码:5NX2)进行对接。结果胰岛素分泌实验结果显示在高糖(11.1 mmol·L^(-1))条件下,胰岛素分泌量在吐根碱作用下明显升高,且具有剂量依赖性。低糖(2.8 mmol·L^(-1))条件下,胰岛素分泌量在吐根碱干预下没有明显变化,但在高糖(11.1、16.7 mmol·L^(-1))条件下,胰岛素分泌量在吐根碱作用下明显升高,具有类似GLP-1R激动剂葡萄糖浓度依赖性促胰岛素分泌特点。吐根碱与GLP-1R对接打分是Total Score=6.82,C Score=5,表明吐根碱与GLP-1R有良好的亲和力。当GLP-1R被Exendin(9-39)阻断后,吐根碱促胰岛素分泌作用明显降低。结论吐根碱通过激活GLP-1R发挥促离体大鼠胰岛组织胰岛素分泌作用。

摘要：本文通过三维定量构效关系(3D-QSAR)建模、分子对接和分子动力学模拟,探讨了41个N-取代马来酰亚胺类衍生物与人单酰甘油脂肪酶(hMGL)的相互作用,并构建了相关模型。其中,比较分子力场分析模型(CoMFA、q^(2)=0.541、r^(2)=0.972)和比较分子相似性指数分析模型(CoMSIA、q^(2)=0.588、r^(2)=0.919)具有较好的预测能力。QSAR模型等势图阐明了该系列化合物生物活性与结构的关系,并依此设计了系列衍生物。采用分子对接和分子动力学模拟探讨了高活性化合物36、46与hMGL(PDB ID:3PE6)的结合模式和稳定性,结果表明二者主要通过氢键和疏水相互作用与hMGL结合并且形成了稳定的复合物。随后对pIC_(50)预测值优于文献报道中最高活性化合物36的8个衍生物进行分子对接和ADMET预测,选择2个衍生物进行分子动力学模拟,结果表明2个衍生物分别与hMGL形成的复合物结合构象稳定。本研究为新型N-取代马来酰亚胺类hMGL抑制剂的开发提供了理论依据。

摘要：目的以不同取代的苯乙酸为原料设计合成一系列苯乙酰胺衍生物,并考察化合物对棕榈酸(palmitate acid,PA)诱导的胰岛细胞损伤的保护作用。方法培养Min6细胞,分为B空白对照组、PA处理组、PA+化合物组,采用CCK-8法检测细胞活性;通过Western blot观察细胞TXNIP、NLRP3的蛋白表达;MDA、SOD试剂盒检测MDA含量以及SOD活性;胰岛素试剂盒检测Min6细胞胰岛素的分泌量。结果共设计合成10个苯乙酰胺衍生物,结构经1H NMR、ESI-MS确证;药理活性研究表明,大多数化合物对胰岛细胞有保护作用,化合物LY-6和LY-8相较PA模型组(细胞活力为61.4%)保护作用较强,其中LY-6细胞活力最高,达到104.9%;与PA组相比,LY-6和LY-8组TXNIP和NLRP3蛋白表达降低,MDA含量减少,SOD活性增加,胰岛素分泌量增加。结论LY-6和LY-8可通过抑制TXNIP的表达,减少对NLRP3炎性小体的激活,减少MDA的产生、增加SOD的活性,最终减少胰岛β细胞的凋亡,增加胰岛素的分泌量。故化合物LY-6可以作为潜在的抗糖尿病新化学实体。

摘要：【背景】前期工作中筛选出一株产α-L-鼠李糖苷酶的细菌,经分子生物学方法鉴定为鸟肠球菌(Enterococcus avium)。α-L-鼠李糖苷酶能够从天然类黄酮化合物中特异性切割末端鼠李糖,在食品生产、医药加工和化工等方面具有极大的开发前景和应用价值。【目的】克隆、表达鸟肠球菌中α-L-鼠李糖苷酶基因,进一步对重组蛋白的酶学性质进行研究。【方法】以鸟肠球菌(Enterococcus avium)strain 352基因组中推定的α-L-鼠李糖苷酶基因序列为基础,设计特异性引物扩增其编码区序列。以p ET-28a(+)为载体构建重组表达质粒,将重组蛋白在Escherichia coli BL21(DE3)感受态细胞中进行诱导表达。使用镍亲和层析纯化重组蛋白,以p NPR为底物测定重组蛋白的酶学性质。【结果】重组蛋白Ea Rha1分子量大小约为130 k Da。以p NPR为底物,Ea Rha1最适p H是7.0,最适温度为50℃,在p H 5.0-8.0稳定性较好,在40℃以下能保持较高酶活。金属离子对Ea Rha1有不同程度的促进或抑制作用。甲醇对Ea Rha1有抑制作用,并且抑制作用随着甲醇浓度的增大而增强。酶动力学常数K_(max)和V_(max)分别为0.35 mmol/L和4.2μmol/(mg·min)(R^(2)=0.999)。Ea Rha1能催化水解新橙皮苷、柚皮苷和芦丁。【结论】通过对重组蛋白Ea Rha1酶学性质的研究,确定了该蛋白对黄酮类化合物的水解特性,为黄酮类化合物的生物转化奠定了理论基础。

摘要：目的:优选山楂叶总黄酮脂质体制备工艺,为山楂叶中医食疗产品开发提供制剂基础。方法:以山楂叶总黄酮为原料,采用薄膜分散⁃超声法,以包封率为评价指标,在单因素试验基础上,选取影响较大的因素做4因素3水平正交试验设计,优化制备工艺。结果:脂质体最佳制备工艺为卵磷脂与胆固醇质量比5∶1、卵磷脂浓度30 mg/mL、卵磷脂与山楂叶总黄酮质量为10∶1、吐温80添加量占卵磷脂质量比为10%,在该条件下制备的脂质体呈淡黄色,包封率、粒径及Zeta电位分别为(73.25±2.13)%、(132.2±2.85)nm、(-9.29±0.34)mV。贮藏稳定性结果显示在4℃条件下稳定性较好。结论:山楂叶总黄酮脂质体有良好的理化性质,在4℃条件下贮藏稳定性较好,可为产品开发提供依据。

摘要：目的:基于成分含量和体外降糖活性优选麦冬、山药、五味子配伍比例及提取工艺。方法:以配伍比例、甲醇浓度、溶剂倍数、提取时间为因素,以麦冬皂苷D(OPD)、麦冬皂苷D′(OPD′),麦冬甲基二氢高异黄酮A(MA)、麦冬甲基二氢高异黄酮B(MB),五味子醇甲(SA),尿囊素(DA)含量及体外HepG2细胞糖代谢改善、STZ损伤NS-1细胞修复等为指标,运用星点设计-效应面法结合G1-熵权法优化麦冬山药五味子配伍比例及提取工艺。结果:麦冬、山药、五味子体外降糖最佳配伍比例为麦冬20~28 g、山药5~15 g、五味子10~14 g;最佳提取工艺参数范围为甲醇浓度>85%、溶剂倍数>8、提取时间>90 min。其中,麦冬15 g、山药7 g、五味子6 g配伍后,用6倍91%甲醇提取60 min,所得提取物对HepG2细胞试验组上清葡萄糖消耗量较少,平均为2.13 mmol·L^(-1);对INS-1细胞活力增殖较低,吸收度A平均为1.12。麦冬25 g、山药25 g、五味子6 g配伍后,用10倍91%甲醇提取120 min,所得提取物对HepG2细胞试验组上清葡萄糖含量消耗较多,平均为3.24 mmol·L^(-1),对INS-1细胞活力增殖较高,吸收度A平均为1.97。配伍比例优化试验拟合方程为Y=0.155+0.14X_(1)+0.013X_(2)+0.096X_(3)+0.12X_(1)X_(1)+0.10X_(2)X_(2)+0.082X_(3)X_(3)+0.054X_(1)X_(2)-0.15 X_(1)X_(3)-0.20X_(2)X_(3)(R-Sq=96.59%);提取工艺优化实验拟合方程为Y′=0.63-0.010X′_(1)+0.11X′_(2)+0.12X′_(3)-0.099X′_(1)X′_(1)-0.075X′_(2)X′_(2)-0.069X′_(3)X′_(3)+0.054X′_(1)X′_(2)+0.12X′_(1)X′_(3)+0.011X′_(2)X′_(3)(R-Sq=94.86%)。在此条件下,分别进行3次验证试验,试验数据组间无明显差异。结论:基于网络药理学数据,从麦冬、山药、五味子主要降糖成分和体外降糖活性情况考虑,明确配伍比例及提取工艺范围,为麦冬的“酸甘化阴”配伍中降糖活性组分研究提供参考。麦冬、山药、五味子配伍可促进细胞对上清液中葡萄糖的摄取,同时,可不同程度增加STZ致INS-1细胞损伤增殖的活力,促进细胞修复。

摘要：为了提高右旋布洛芬的载药量,并探索载药复合物在不同释放介质中的释放规律,本文以盐酸改性蒙脱土为药物载体,用溶液插层法将右旋布洛芬负载于酸化后的蒙脱土上,制得右旋布洛芬/酸改性蒙脱土复合物[S（＋）-IBU/acid-MMT],利用XRD、BET、SEM对蒙脱土及S（＋）-IBU/acid-MMT进行了结构表征,筛选出最佳酸处理质量分数;采用透析法对S（＋）-IBU/acid-MMT进行了体外释放实验。结果表明：经酸改性后蒙脱土的结构发生了改变,当盐酸质量分数为15%时,蒙脱土的比表面积达到最大值246 m2/g,比改性前提高了10.7倍。上载右旋布洛芬后,蒙脱土的载药量最大可达352.4 mg/g,比改性前提高了1.1倍,体外释放实验表明,S（＋）-IBU/acid-MMT的累积释药量受p H影响：在12 h内,当p H为1.2和6.8时,其累积释药量分别为18.6%和89.3%。

摘要：光动力疗法(PDT)作为一种迅速发展的传统替代疗法,在抗癌治疗中显示出巨大的潜力。为增强靶向性和提高光催化杀伤效率,本研究设计了一种新型光敏剂Fe_3O_4-Ti O_2磁性纳米粒。在不同外磁场下,考察其在可见光和紫外光激发下对肝癌细胞的杀伤效应。同时利用流式细胞术检测纳米Fe_3O_4-Ti O_2对肝癌细胞凋亡率、细胞周期和线粒体膜电位的影响。根据纳米Fe_3O_4-Ti O_2和肝癌细胞的作用方式探讨其抗癌机制。结果表明,可见光激发纳米Fe_3O_4-Ti O_2可以杀伤癌细胞,且其杀伤效率与紫外光激发下无明显差别。此外,Fe_3O_4-Ti O_2比Ti O_2具有更高的细胞摄取率,从而使其具有更高的选择性和光催化杀伤效率。其作用机制是光催化纳米Fe_3O_4-Ti O_2产生活性氧ROS抑制癌细胞,然后通过阻滞细胞周期G_0/G_1期,降低线粒体膜电位,线粒体去极化,最终诱导细胞凋亡。

摘要：内螺纹是零件中的重要部分,加工失败或精度降低均无法实现无间隙的完美装配。径向中径差作为评价内螺纹质量的重要参数,对内螺纹的加工质量影响很大。在实际生产中,由于攻丝生产条件恶劣,难以准确控制螺纹的径向中径差。本文基于正交试验设计分析了钝圆半径、主轴转速、切削锥长度三个因素对Al7075攻丝时径向中径差的影响,并通过极差分析法和方差分析法确定了获得最小径向中径差的参数组合和各因素对径向中径差影响的显著性。试验结果表明:对螺纹径向中径差影响最大的因素为主轴转速,其次为钝圆半径和切削锥长度;获得最小螺纹径向中径差的参数组合为钝圆半径10μm、主轴转速150m/min和切削锥长度2pitches。

摘要：以右旋布洛芬为原料,酸化蒙脱土为药物载体,制得右旋布洛芬/酸改性蒙脱土S（＋）-IBU/acid-MMT干混悬剂。通过星点设计-效应面法优化右旋布洛芬/酸改性蒙脱土干混悬剂的制备工艺。以蒙脱土的载药量为考察指标,采用三因素五水平星点设计考察了盐酸浓度、酸化时间、酸化温度对干混悬剂制备工艺的影响,并对结果进行了二元多项式线性回归方程拟合,经效应面法预测最佳处方;借助XRD和SEM技术对干混悬剂进行了结构表征。结果表明,右旋布洛芬/酸改性蒙脱土干混悬剂最佳制备条件为：盐酸浓度3.3 mol/L,酸化时间5.2 h,酸化温度54℃,在该条件下,干混悬剂载药量可达443.7 mg/g,较优化前（352.4 mg/g）提高了25.9%。星点设计-效应面法适用于右旋布洛芬/酸改性蒙脱土干混悬剂制备工艺优化,以该方法建立的数学模型具有良好的预测性,所得干混悬剂具有更高的载药量。