摘要：目的探讨吐根碱通过胰高血糖素样肽-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor,GLP-1R)促进离体大鼠胰岛组织胰岛素分泌作用。方法分离大鼠胰岛组织进行胰岛素分泌实验,根据实验设计使用不同浓度的吐根碱(2、10、50μmol·L^(-1))、不同浓度葡萄糖(2.8、11.1、16.7 mmol·L^(-1))以及特异性GLP-1R拮抗剂Exendin(9-39)孵育胰岛组织。酶联放射免疫的检测方法测定每组上清液胰岛素分泌量。使用SYBYL-X2.0软件将小分子化合物与GLP-1R(PDB代码:5NX2)进行对接。结果胰岛素分泌实验结果显示在高糖(11.1 mmol·L^(-1))条件下,胰岛素分泌量在吐根碱作用下明显升高,且具有剂量依赖性。低糖(2.8 mmol·L^(-1))条件下,胰岛素分泌量在吐根碱干预下没有明显变化,但在高糖(11.1、16.7 mmol·L^(-1))条件下,胰岛素分泌量在吐根碱作用下明显升高,具有类似GLP-1R激动剂葡萄糖浓度依赖性促胰岛素分泌特点。吐根碱与GLP-1R对接打分是Total Score=6.82,C Score=5,表明吐根碱与GLP-1R有良好的亲和力。当GLP-1R被Exendin(9-39)阻断后,吐根碱促胰岛素分泌作用明显降低。结论吐根碱通过激活GLP-1R发挥促离体大鼠胰岛组织胰岛素分泌作用。

摘要：目的研究多柔比星(DOX)对大鼠离体胸主动脉和颈总动脉血管环的作用及其机制。方法采用离体血管环恒温灌流系统,通过累积加药法每10 min加入DOX依次使其终浓度递增为1,3,10,30和100μmol·L-1,观察其对基础状态、去氧肾上腺素(PE,1μmol·L-1)和氯化钾(KCl,60 mmol·L-1)预收缩的胸主动脉及颈总动脉血管环的作用,并采用左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)、4-氨基吡啶(4-AP)、溴化四乙铵(TEA)、氯化钡(BaCl2)、格列苯脲(Gli)、吲哚美辛(Indo)和普萘洛尔预处理探讨其对血管作用的可能机制。结果 DOX对基础状态下及KCl预收缩的胸主动脉和颈总动脉血管环张力无明显影响;DOX可浓度依赖性地舒张PE预收缩的内皮完整胸主动脉和颈总动脉环(P<0.05),且其对去内皮胸主动脉血管环也有舒张作用,但舒张程度弱于内皮完整组(P<0.05);一氧化氮合酶抑制剂L-NAME 0.1 mmol·L-1、电压依赖性钾通道(KV)抑制剂4-AP 1 mmol·L-1、钙敏感性钾通道(KCa)抑制剂TEA 1 mmol·L-1和内向整流型钾通道(KIR)抑制剂BaCl21 mmol·L-1均可明显抑制DOX的舒血管作用(P<0.05),环氧化酶抑制剂Indo 0.01 mmol·L-1、ATP敏感性钾通道抑制剂Gli 0.01 mmol·L-1和β肾上腺素能受体阻滞剂普萘洛尔0.01 mmol·L-1对DOX舒血管作用无明显影响;DOX 1,10和100μmol·L-1可浓度依赖性减弱无钙液中PE诱发的血管收缩,并可使氯化钙量效曲线右移。结论 DOX对大鼠离体胸主动脉和颈总动脉血管环有浓度依赖性舒张作用,其舒血管机制可能与血管内皮细胞一氧化氮/cGMP途径、KV、KCa、KIR、血管平滑肌细胞内钙释放和外钙内流有关。

摘要：目的研究乙酰异羟肟酸(AHA)降血压和舒张胸主动脉血管的作用及其机制。方法(1)动物实验:8周龄SD雄性大鼠,ip给予AHA 50和100 mg·kg^-1,每5 d给药1次,共5次。分别在给药前1 d、给药第13天和给药第26天测收缩压(SBP)和舒张压(DBP);HE染色观察大鼠胸主动脉血管组织形态变化。(2)离体实验:①累积浓度AHA(0.1,1,3,10,30和100μmol·L^-1)处理大鼠离体胸主动脉内皮完整血管环,检测血管环张力。②大鼠离体胸主动脉内皮完整和去内皮血管环用去甲肾上腺素(NE,1μmol·L^-1)和KCl(60 mmol·L^-1)预收缩,稳定后每10 min累积加入AHA(0.1,1,3,10,30和100μmol·L^-1),计算血管舒张百分比。③内皮完整血管环分为AHA组、AHA+左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)组和AHA+吲哚美辛(Indo)组。L-NAME(0.1 mmol·L^-1)或Indo(0.01 mmol·L^-1)孵育30 min后,加NE(1μmol·L^-1)预收缩,血管收缩稳定后,累积加入AHA(0.1,1,3,10,30和100μmol·L^-1),计算累积浓度AHA舒张血管百分比。④内皮完整血管环分为AHA组、AHA+4-氨基吡啶(4-AP,1 mmol·L^-1)、AHA+格列苯脲(Gli,0.01 mmol·L^-1)、AHA+澳化四乙胺(TEA,1 mmol·L^-1)和AHA+BaCl2(0.1 mmol·L^-1)组。4-AP,Gli,TEA和BaCl2孵育30 min后,加NE(1μmol·L^-1)预收缩,血管收缩稳定后,累积加入AHA(0.1,1,3,10,30和100μmol·L^-1),计算累积浓度AHA血管舒张百分比。⑤内皮完整血管环分为AHA 1,10和100μmol·L^-1组,实验组分别加入不同浓度的AHA,预孵30 min后,加入累积浓度的CaCl2(0.1,0.3,1,3和10 mmol·L^-1),计算AHA各实验组血管收缩百分比。⑥内皮完整血管环分为AHA 1,10和100μmol·L^-1组,实验组分别加入不同浓度的AHA,预孵30 min后加入NE(1μmol·L^-1),计算AHA各实验组血管收缩张力。结果(1)动物实验:与正常对照组相比,AHA 50和100 mg·kg^-1组大鼠SBP和DBP均显著降低(P<0.01);HE染色未见AHA组大鼠胸主动脉组织形态明显改变。(2)离体实验:①累积浓度AHA对静息状态的大鼠胸主动脉内皮完整血管环张力无明显影响;②累积浓度AHA对KCl预收缩的胸主动脉环张力无明显影响,而AHA可浓度依赖性地舒张NE预收缩胸主动脉环,且去内皮组舒张程度弱于内皮完整组(P<0.01);③L-NAME和Indo均可明显抑制AHA的舒血管作用(P<0.01);④钾离子通道阻滞剂TEA和BaCl2均可明显抑制AHA的舒血管作用(P<0.01),4-AP和Gli无明显影响;⑤AHA能降低NE预收缩下细胞外钙内流引起大鼠离体胸主动脉内皮完整血管环的收缩张力(P<0.01),并使氯化钙收缩作用曲线右移;⑥AHA能降低经NE预收缩、由细胞内钙释放引起的大鼠离体胸主动脉内皮完整血管环的收缩张力(P<0.01)。结论AHA具有降低正常大鼠血压和舒张胸主动脉血管环的作用,其机制可能与血管内皮、钙敏感性钾通道、内向整流型钾通道及细胞内钙释放和外钙内流有关。

摘要：目的研究辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对大鼠离体胸主动脉环的作用和舒张机制。方法采用离体大鼠胸主动脉环灌流,观察累积浓度SAHA(0.3、1、3、10和30μmol·L^(-1))对基础状态、KCl和NE预收缩的大鼠离体胸主动脉环的作用,同时使用工具药L-NAME、Indo、PMA和SP来研究其舒张血管的可能机制,并探讨SAHA在舒张血管过程中对Ca^(2+)的作用。结果SAHA能够舒张KCl和NE预收缩的大鼠离体胸主动脉(P<0.01),且对完整内皮胸主动脉作用强于去内皮胸主动脉(P<0.01),但对基础状态无明显影响;L-NAME、Indo和PMA可抑制SAHA的血管舒张作用(P<0.05),而SP能够促进其舒张血管(P<0.01);SAHA可抑制外钙内流和内钙释放而减弱CaCl 2和NE诱导的血管收缩作用(P<0.01)。结论SAHA舒张血管可能与增加内皮舒张因子NO和PGI 2生成,抑制PKC及外钙内流和内钙释放有关。

摘要：目的:探讨橙皮素在舒张大鼠冠状动脉(RCA)中的c AMP/PKA/Kv1. 2通路机制。方法:离体血管张力法记录RCA血管张力;从RCA急性分离动脉血管平滑肌,采用膜片钳技术测定其Kv电流。结果:Kv1. 2抑制剂Charybdotoxin (Ch TX)减弱橙皮素对RCA的舒张作用,而Kv1. 5抑制剂DPO-1、Kv2. 1抑制剂Guangxitoxin和Kv7抑制剂XE991对橙皮素的血管舒张作用无显著影响。膜片钳结果为,Ch TX显著减小橙皮素引起的Kv电流净增加,而DPO-1、Guangxitoxin和XE991对橙皮素所致的Kv电流净增加无显著性影响。蛋白激酶A(PKA)抑制剂Rp-cAMP减弱橙皮素对RCA的舒张作用,同时减小橙皮素所致的Kv电流增加。结论:橙皮素对大鼠RCA的舒张作用至少部分是通过增加c AMP/PKA/Kv1. 2活性而实现的。

摘要：目的研究新型磷酸二酯酶抑制药MS23对糖尿病大鼠冠状动脉(RCA)肌原性反应及其平滑肌电位依赖性钾通道(Kv)电流的影响。方法腹腔注射链脲霉素60 mg·kg^(-1)建立大鼠糖尿病模型;第四周将建模成功的糖尿病大鼠随机分为模型组、低、高2个剂量实验组,另取正常大鼠为对照组。MS23低、高剂量实验组分别予以灌胃MS23 0.3,1.0 mg·kg^(-1);对照组和模型组予以灌胃等量0.9%NaCl。4组大鼠每天给药1次,共8周。用离体血管张力法记录RCA肌原性反应;用膜片钳测定冠状动脉平滑肌(RCASMC)Kv电流。结果对照组、模型组和低、高剂量实验组RCA对乙酰胆碱的最大舒张率分别为(74.45±6.30)%,(56.84±5.51)%,(77.52±5.27)%和(86.33±8.88)%,对硝普钠的最大舒张率分别为(88.50±5.81)%,(56.65±8.62)%,(80.50±7.85)%和(91.60±5.97)%,RCASMC Kv最大电流密度分别为(53.69±4.02)p A·p F^(-1),(28.25±3.69)p A·p F^(-1),(38.78±4.55)p A·p F^(-1)和(63.35±4.57)p A·p F^(-1),模型组分别与对照组和低、高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。30μmol·L^(-1)MS23对1μmol·L^(-1)U46619所致糖尿病RCA收缩的最大舒张率为(70.69±12.72)%,Kv通道选择性抑制药4-AP(3 mmol·L^(-1)预孵处理后其最大舒张率为(34.47±10.08)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MS23可舒张糖尿病RCA,增加其RCASMC Kv电流。

摘要：目的研究橙皮素(HSP)对高糖(44 mmol·L^(-1))诱导的血管舒张功能障碍和血管内皮细胞损伤的影响及其作用机制。方法将大鼠冠状动脉(RCA)血管环和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分为6组:正常对照组(生理盐溶液)、高渗对照组(甘露醇44 mmol·L^(-1))、模型组(葡萄糖44 mmol·L^(-1))和低、中、高3个剂量实验组(在模型组基础上分别加橙皮素10,30,100μmol·L^(-1))。血管张力法测定HSP对RCA舒张功能的影响,微孔板法检测HUVECs的丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、乳酸脱氢酶(LDH)释放量、超氧化物歧化酶(SOD)及一氧化氮合酶(NOS)活性。结果以血栓素A2受体激动药U46619 (1μmol·L^(-1))预收缩RCA时,正常对照组、高渗对照组、模型组和低、中、高3个剂量实验组对乙酰胆碱的最大舒张率分别为(83.45±6.31)%,(85.60±4.50)%,(52.30±5.87)%,(68.92±8.88)%,(71.60±5.30)%和(81.60±6.39)%;这6组的LDH释放量分别为(332±88),(345±92),(856±113),(568±102),(485±96)和(469±73) U·L^(-1);SOD活性分别为(56.6±7.6),(53.3±5.9),(28.7±6.3),(33.6±4.8),(45.3±7.7)和(52.6±6.5) kU·L^(-1);NOS活性分别为(11.3±0.48),(12.6±0.22),(5.8±0.31),(6.6±0.52),(9.8±0.29)和(12.6±0.51) kU·g^(-1)。模型组与正常对照组相比,或中、高2个剂量实验组与模型组相比,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0.05)。结论 HSP减轻高糖所致的RCA内皮依赖性舒张功能障碍,其机制可能与HSP抗氧化作用及增加NOS活性有关。

摘要：目的观察橙皮素对糖尿病大鼠肾内动脉(RIA)肌原性反应的改善作用并探讨其作用机制。方法按照体重将大鼠随机分为4组:正常组、模型组和低、高2个剂量实验组。腹腔注射链脲霉素65 mg·kg^(-1)建立大鼠糖尿病模型。造模2周后,低、高2个剂量实验组分别灌胃橙皮素50,100 mg·kg^(-1)·d^(-1),持续4周,正常组和模型组灌胃等量0. 1%羧甲基纤维素钠溶剂。用微血管张力法测定肾内动脉血管张力,用抑制剂实验观察橙皮素舒张肾内动脉与钾通道(Kv)的关系。结果正常组、模型组和低、高2个剂量实验组对苯肾上腺素(PE)的最大收缩率分别为(100. 00±0. 00)%,(147. 14±3. 81)%,(124. 18±3. 23)%和(107. 28±0. 78)%;模型组与正常组相比或者低、高剂量2个实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01)。PE预收缩时,这4组对乙酰胆碱(ACh)的最大舒张率分别为(71. 29±4. 92)%,(51. 50±4. 96)%,(58. 28±1. 85)%和(65. 29±2. 29)%;对硝普钠(SNP)的最大舒张率分别为(83. 28±0. 96)%,(71. 11±1. 42)%,(75. 43±1. 99)%和(78. 98±1. 10)%;模型组与正常组相比或者低、高剂量2个实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01)。结论橙皮素改善RIA肌原性反应,其机制可能与Kv通道有关。

摘要：目的探讨橙皮素(HSP)对离体大鼠肾内动脉(RIA)肌原性反应的影响,并分析其与蛋白激酶C(PKC)、内向整流钾通道(Kir)的相关性。方法将雄性SD大鼠断头处死后,取其肾脏放于生理盐溶液(PSS)中,显微镜下分离并剪取2 mm的RIA血管环用于微血管张力测定实验。血管环抑制收缩实验:将同一根RIA的不同段随机分为KCl收缩组、PE收缩组、VP收缩组、BaCl2收缩组(加入30μmol·L^(-1)HSP预孵30 min后分别加入60 mmol·L^(-1)KCl,10μmol·L^(-1)PE,3μmol·L^(-1)VP,0.3 mmol·L^(-1)BaCl24种收缩剂直至RIA达到收缩坪台);舒张机制实验:将同一根RIA的不同段随机分为KCl预收缩组、PE预收缩组、VP预收缩组、BaCl2预收缩组(预收缩组中加入上述相同浓度的4种收缩剂收缩RIA后,加入PKA、PKC抑制剂各1μmol·L-1预孵15 min,30μmol·L^(-1)HSP舒张RIA)。膜片钳实验:将RIA平滑肌细胞(SMCs)Kir电流密度分为BaCl2联合组、GO6983联合组;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR):将RIA分为对照组和HSP组(预孵30μmol·L^(-1)HSP 8h)。用血管环实验记录RIA血管张力的变化,用膜片钳实验记录RIA SMCs Kir电流密度的变化,用qRT-PCR检测Kir2.1和PKC-α、PKC-β基因表达水平。结果KCl收缩组,PE收缩组,VP收缩组,BaCl2收缩组RIA收缩百分率分别为(24.25±6.11)%,(20.09±12.67)%,(48.14±1.68)%,(15.26±6.66)%;KCl预收缩组,PE预收缩组,VP预收缩组,BaCl2预收缩组的舒张百分率分别为(21.35±5.55)%,(27.84±8.64)%,(23.30±12.01)%,(19.22±2.22)%;BaCl2联合组、GO6983联合组RIA SMCs Kir电流分别为(-4.29±0.26),(-10.65±1.10)pA/pF;Kir 2.1通道、PKC-α、PKC-β的mRNA相对表达量分别为1.91±0.23,0.52±0.29,0.69±0.14。组间比较,差异均有统计学差异(均P<0.05)。结论HSP有抑制RIA收缩的作用,且HSP该作用与舒张预收缩RIA的作用均可能与Kir通道的开放和PKC介导的通路有关。

摘要：目的探讨氯硝柳胺乙醇胺盐(niclosamide ethanolamine,NEN)对离体大鼠冠状动脉(rat coronary artery,RCA)的舒张作用及其机制。方法采用微血管张力法测定RCA血管张力,观察NEN对预收缩血管的舒张作用;通过抑制剂实验探讨NEN舒张RCA与钾通道和MAPK信号通路的关系;通过观察NEN对血管收缩剂所致的在去钙和复钙液中收缩的影响,探讨NEN的作用与细胞内外钙的关系。结果 NEN(0.5~3.0μmol/L)对KCl或U46619所致的RCA收缩均具有浓度依赖性的舒张作用。MAPK抑制剂PD98059和SB239063减弱NEN的舒张作用,而钾通道阻断剂四乙胺、4-氨基吡啶、氯化钡和格列本脲对NEN的舒张作用无显著影响。NEN减弱KCl或U46619所致的细胞外钙内流依赖性RCA收缩,而对细胞内钙释放依赖性RCA收缩无显著影响。结论 NEN对离体RCA有显著的舒张作用,其机制可能与其激活MAPK信号通路、抑制细胞外钙内流有关。