摘要：基于活性亚单元拼接原理,将查尔酮分子片段拼接到香豆素结构中,设计并合成了一系列新型含查尔酮结构的香豆素衍生物;以苯乙酮和对甲基苯甲醛为原料,经克莱森-施密特缩合、溴代、环合、消除等反应制备得到24个目标化合物;化合物结构经1H NMR、ESI-MS确证。采用MTT法评价了化合物对HepG2、DU145及A549肿瘤细胞的抗增殖作用。结果表明,部分化合物对肿瘤细胞具有较好抗增殖作用,其中Ⅰc,Ⅱb,Ⅱc和Ⅱd对HepG2和A549的抗增殖作用较强,IC50分别为2.05-9.16 mol/L和3.48-10.81 mol/L,在此基础上初步探讨了此类化合物的构效关系。

摘要：应用生物电子等排原理,设计并合成了两类共24个含芳基哌嗪的苯并噻唑衍生物。采用MTT法评价了化合物对4种癌细胞和2种正常细胞的抗增殖作用。结果表明,大部分化合物对于癌细胞的增殖都有一定程度的抑制作用,其中化合物II2、II3、II6和II7对HepG2和HeLa229细胞具有较强的抗增殖作用,其IC50值分别为1.6～4.5μmol.L 1和2.5～5.3μmol.L 1;苯环对位引入氰基的化合物(Ι4、Ι8、Ι12、II4、II8、II12)对AsPC-1细胞具有较好的抗增殖作用,IC50值为5.2～11.3μmol.L 1,在此基础上初步探讨了此类化合物的构效关系。

摘要：新型冠状病毒肺炎(COVID-19)爆发后,如何利用热点效应服务于免疫学的教学是值得探索的方向。本文通过举例设计理论知识点与COVID-19的结合教学,从不同切入点充分利用新冠疫情,为学生的学习注入持续动力,在改善理论教学效果的同时激发学生的科研热情。

摘要：基于生物电子等排及活性单元拼接原理,将Schiff碱、芳香氮芥药效基团N,N-二(2-氯乙基)胺基拼接到香豆素结构中,设计合成了系列新型含Schiff碱芳香氮芥的香豆素衍生物(7a^7v),结构经1H NMR、MS及元素分析确证。采用MTT法评价了化合物对HepG2、DU145及MCF7肿瘤细胞的抗增殖作用。结果表明,部分化合物对肿瘤细胞的增殖具有较好的抑制作用,其中化合物7c、7f、7g、7h和7q对DU145和MCF7的抑制作用优于或相当于阳性对照,值得进一步研究。

摘要：为揭示烟草糖基转移酶的活性及生物学功能,从烟草栽培品种中克隆了烟草糖基转移酶基因NtGT5a,基于GenBank的烟草糖基转移酶基因NtGT5a的核苷酸序列(GenBank登录号AB176523),设计并合成特异性引物,以红花大金元叶片总RNA为模板,通过RT-PCR方法获得了烟草糖基转移酶基因NtGT5a的cDNA片段。序列分析表明,该基因编码区为1458 bp,编码485个氨基酸残基,推测的蛋白分子量为54.21 kDa,理论等电点为5.41。通过构建重组表达载体pCold-SUMO-NtGT5a,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在15Ⅲ下经0.2 mmol/L IPTG诱导22 h表达产生了SUMO-NtGT5a重组蛋白。重组蛋白部分以包涵体形式存在,部分以可溶性蛋白形式存在。将重组蛋白的可溶性组分经过Ni-NTA柱层析纯化和凝胶过滤层析,用SUMO蛋白酶切除SUMO标签,再用镍柱纯化获得了高纯度的NtGT5重组蛋白。

摘要：基于NCBI数据库中本氏烟(Nicotiana benthamiana)的烟草八氢番茄红素脱氢酶PDS基因(ABE99707)的核苷酸序列,设计并合成特异性引物,以烟草栽培品种红花大金元叶片总RNA为模板,通过PCR方法获得了烟草NtPDS基因的cDNA片段。序列分析表明,该基因编码区为1749 bp,编码582个氨基酸,推测该蛋白等电点为7.53,理论分子量为65.04 kD。通过构建融合表达载体pET-32a-NtPDS,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在37℃下经1 mmol/L IPTG诱导4 h表达后,产生了以可溶性蛋白形式存在的NtPDS融合蛋白,并通过Western blotting验证融合蛋白获得表达。利用半定量RT-PCR技术进行组织表达模式分析发现,该基因在烟草的叶片、花和茎中均有表达,在根中没有表达。该结果为进一步研究烟草八氢番茄红素脱氢酶NtPDS的活性和生物学功能奠定了基础。

摘要：目的针对乙型肝炎病毒(HBV)prec/c区构建shRNA表达载体,观察shRNA表达载体对HBV抗原表达的抑制作用,为运用RNA干扰(RNAi)技术治疗乙型肝炎奠定基础。方法运用基因重组技术构建shRNA表达载体,经酶切,测序鉴定确认后,与1.5倍HBV真核表达质粒pHBV1.5共转染Hela细胞,并于转染后72 h,用微粒子酶免疫实验(MEIA)分别检测细胞上清液和细胞裂解液中HBsAg和HBeAg表达水平;用半定量PCR检测prec/c mRNA的转录情况;分析shRNA表达载体对HBe/HBs抗原表达的抑制情况。结果成功构建了针对HBV prec/c区的shRNA表达载体psiHBV4、psiHBV5、psiHBV6及无关shRNA表达载体psiC;筛选到对HBeAg有明显的抑制作用的psiHBV4载体,同时其对HBsAg的表达有促进作用;psiHBV5和psiHBV6对HBeAg的抑制作用相对较弱,其对HBsAg的表达也有不同程度的促进作用;无关干扰对照psiC对HBV两种抗原的表达均无显著抑制作用。结论成功构建带U6启动子的shRNA表达载体并初步筛选到可显著抑制HBeAg表达的psiHBV4;本研究设计的3个靶向序列中,只有一个序列有大约70%的抑制率,而另外两个序列的抑制率相对较小,说明RNA干扰作用有较强的序列依赖性;无关干扰序列psiC几乎无干扰作用,说明siRNA产生的干扰作用具有高度的特异性。以上结果为应用RNAi治疗乙型肝炎奠定了一定的基础。

摘要：目的:建立快速准确的半夏和掌叶半夏分子标记鉴定方法。方法:通过RAPD随机引物的筛选,获得半夏特异的RAPD分子标记片段,经克隆、测序,重新设计特异性引物转化形成稳定的SCAR标记。结果:获得1条稳定扩增的半夏特异片段T350,根据该特异片段序列设计1对特异引物,分别对半夏和掌叶半夏DNA进行扩增,引物可从半夏DNA中扩增获得约330bp的片段,而掌叶半夏未扩增出该片段。结论:T350成功转化为SCAR分子标记,可对半夏和掌叶半夏进行快速有效的鉴定。

摘要：随着高等医学教育教学不断深化改革,各大医学院校为提高医学实践机会举办各类实验技能比赛已成为提高医学生综合素质有效途径。本教研室抓住契机,连续三年举办人体寄生虫学文艺作品设计与创新比赛,受到广大师生的好评。本文将从大赛准备、方案设计与实施、比赛成果、特色与创新及赛后总结与反思等方面进行分享与交流以期更好培养医学生实践能力及自主创新能力,促进人体寄生虫学教学的改革与发展。

摘要：在细胞遗传学实验教学中,为了加强学生科研素质的培养,引导学生为开展科研活动做好充分准备,以科学史、专业英语、统计学处理以及实验操作技能等为突破口,培养学生的科研兴趣与科研意识,提升专业英语、文献利用、实验设计等科研基本知识技能综合应用能力,使细胞遗传学实验向培养科研素质的综合实践课程转变,促进教师和学生科研素质共同提高。