摘要：目的构建人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(h OGG1)左右臂载体敲除质粒对。方法针对OGG1基因,设计左臂识别序列3个,右臂识别序列2个,应用转录激活子样效应因子核酸酶技术(TALEN)一步法进行构建。结果成功将左右臂识别序列接入相应的表达载体中,构建出5个TALEN质粒,形成3X2组合模式。结论成功构建了敲除h OGG1基因的TALEN质粒对。

摘要：最近在我国南海沿岸一带发现两种新的牡蛎物种湛江牡蛎(C. Zhanjiangensis)和电白牡蛎(C. Dianbaiensis)。除了对条形码基因测序外,这两种牡蛎很难用以往的物种鉴定方法区分。本研究拟开发一种基于高分辨率熔解曲线(HRM)的新的区分这两种新牡蛎物种的方法。设计引物扩增该两种牡蛎条形码基因COI(细胞色素C氧化酶I基因)序列显著差异片段,并利用HRM技术对扩增片段进行精细区分从而区分物种信息。结果我们筛选到一组引物能够有效区分这两种牡蛎新物种。经验证该方法精确有效,简单易行,是一般实验室或水产生产单位易于掌握推广的方法。为进一步研究牡蛎物种遗传信息和牡蛎养殖具有重要意义。

摘要：由细菌生物膜造成的耐药是感染性疾病的临床挑战,严重危害人类健康。细菌定植在机体后产生胞外基质形成生物膜,其具有结构致密、高黏附性、药物低渗等特征,是临床传统药物治疗感染性疾病失败的关键原因。因此,亟待开发抗细菌生物膜感染的新型治疗策略,应对日益严峻的耐药感染。纳米生物材料具有特异靶向、智能递送、载药量高、毒副性低、穿透性强等优势,被广泛用于细菌生物膜相关感染的治疗。本文阐述了细菌生物膜的生物学特性及其耐药分子机制,介绍了纳米生物材料通过破坏成熟生物膜、阻断细菌通信、抑制细菌代谢和增强生物膜渗透等策略治疗细菌感染的进展,并展望了纳米材料生物治疗的发展趋势与转化前景。

摘要：目的:构建心脏阿霉素反应蛋白(CARP)基因重组慢病毒过表达和RNA干扰载体并进一步包装慢病毒,为研究CARP在阿霉素(ADR)心肌病中的作用及机制奠定基础。方法:将PCR扩增的大鼠CARP基因序列和设计合成的短发夹RNA(shRNA)序列分别插入GV-358和GV-248表达载体,行DNA测序鉴定。采用重组CARP过表达和shRNA表达穿梭载体与Helper 1.0和Helper 2.0辅助包装质粒共转染人胚肾细胞HEK293T,进行病毒包装和扩增,采用终点稀释法测定病毒滴度。采用重组慢病毒感染HEK293T细胞,荧光显微镜观察绿色荧光强度。采用重组慢病毒感染H9C2细胞,分为对照组、Scramble RNA组、CARP过表达组和shRNA CARP组,Western blotting法检测各组细胞中CARP蛋白表达水平。结果:基因测序,CARP过表达及shRNA载体序列与原设计序列完全相符。载体转染HEK293T细胞后,在荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达。包装的CARP过表达及shRNA病毒感染H9C2细胞后,与对照组比较,CARP过表达组细胞中CARP蛋白表达水平升高5.3倍(P=0.01),shRNA CARP组细胞中CARP蛋白表达水平降低53%(P=0.02)。结论:成功构建了CARP过表达和特异性shRNA慢病毒表达载体并获得高感染效率的过表达和RNA干扰慢病毒,后者在H9C2细胞中能够干预CARP表达。

摘要：目的构建含糖尿病相关锚定重复序列蛋白(DARP)基因的重组腺病毒过表达及RNA干扰载体。方法应用PCR技术扩增大鼠DARP基因序列,设计并合成shRNA序列,分别插入表达载体GV-314和GV-119,经基因测序鉴定。用重组DARP过表达和shRNA表达穿梭载体与辅助包装质粒pBHGloxΔE1共转染人胚肾细胞HEK293,进行病毒包装、出毒和扩增,采用终点稀释法测定病毒滴度。用重组腺病毒感染大鼠H9c2细胞,荧光显微镜观察绿色荧光强度,Western Blot检测DARP蛋白表达。结果基因测序显示DARP过表达及shRNA载体序列与原设计序列完全相符,转染HEK293细胞包装成功。DARP过表达和shRNA腺病毒明显影响H9c2细胞中DARP蛋白表达水平。结论成功构建了大鼠DARP过表达及特异性shRNA腺病毒表达载体。

摘要：目的构建含过表达及干扰人APE1的重组腺病毒。方法应用PCR技术扩增人APE1基因序列,设计并合成shRNA序列,分别插入pDC315-EGFP和pDC316-EGFP-U6表达载体,经基因测序鉴定。用重组APE1过表达和shRNA表达穿梭载体与辅助包装质粒p BHGdelta E1lox3Cre共转染人胚肾细胞HEK293A,进行病毒包装、出毒和扩增,采用终点稀释法测定病毒滴度。用重组腺病毒感染人AC16心肌细胞,荧光显微镜观察绿色荧光强度,Western blot检测APE1蛋白表达。结果基因测序显示APE1过表达及shRNA载体序列与原设计序列完全相符,转染HEK293A细胞包装成功。APE1过表达和shRNA腺病毒明显影响人AC16心肌细胞中APE1蛋白表达水平。结论成功构建了人APE1过表达及特异性shRNA腺病毒表达载体。

摘要：目的:报告宁夏回族自治区精神卫生流行病学调查设计、现场调查实施及主要调查结果,为该地区精神障碍的防治提供科学数据。方法:按照中国精神卫生调查的现况研究设计,采用多阶段抽样方案抽取5390名18岁及以上常住居民,应用复合性国际诊断交谈表完成计算机辅助访谈,以美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-Ⅳ)为疾病诊断标准,事后分层加权法计算12月患病率和终生患病率。结果:4085名居民完成调查,任何一类精神障碍12月患病率为9.4%,终生患病率为15.1%。农村居民患病率高于城市(10.9%vs.7.9%,P<0.01);女性焦虑障碍和心境障碍患病率高于男性(5.3%vs.2.9%,4.9%vs.3.3%,均P<0.05);男性物质使用障碍和冲动控制障碍患病率高于女性(2.5%vs.0.2%,2.3%vs.1.5%,均P<0.05);任何一类精神障碍患病率随年龄增长呈下降趋势。满足任何一类精神障碍诊断标准的受访者中93.4%从未寻求帮助,寻求帮助者中57.5%未得到有效帮助。结论:精神卫生问题已经成为宁夏地区重要的公共卫生问题,应该有针对性地采取防治措施。

摘要：复杂的肿瘤微环境导致抗肿瘤药物在肿瘤组织内递送效率低下,严重阻碍了药物对浅表肿瘤的治疗效果。生物相容透皮给药微针凭借较高的机械强度,刺穿皮肤角质层,将微针内的药物递送至浅表肿瘤组织内,提高生物利用度,改善静脉注射、口服给药的肝肾毒性等问题。本文介绍了生物相容透皮给药微针的设计及其在癌症化疗、光动力治疗、光热治疗、免疫治疗、基因治疗等领域的研究进展,对浅表肿瘤的微创、局部递药和精准、高效治疗具有重要指导意义。

摘要：目的探讨汉族精神分裂症患者发生代谢综合征(MS)的危险因素。方法采用回顾性巢式病例对照设计,选取汉族精神分裂症患者162例为随访队列,平均随访1.4年。在随访期间共诊断新发MS患者15例,为病例组。按照1∶1的比例,从随访队列中选取没有发生MS的15例被试作为对照组。登记患者的性别、年龄等人口学信息,血压、腰围等生理指标,用药情况,病程,吸烟情况以及空腹血脂、血糖等生化指标。并通过基因直接测序法确定两组血浆纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)基因-675位点的基因型。运用logistic回归判断上述指标是否是精神分裂症患者发生MS的危险因素。结果 PAI-1位于-675 bp处的4G/5G基因多态性(OR=5.98,95%CI 2.00～17.88)和病程(OR=7.03,95%CI为1.98～24.98)可影响精神分裂症患者中MS的发生。结论 PAI-1在-675 bp处的4G/4G基因型和长病程,都是精神分裂症患者伴发MS的危险因素。

摘要：调节性T细胞(Tregs)是一类机体发挥免疫调节功能的T淋巴细胞亚群,能够高效、安全、可控地调节机体免疫,在自身免疫疾病及器官移植术后免疫排斥等炎症疾病的治疗应用中发挥关键作用。然而,治疗脱靶和功能表型不稳定给Tregs的临床应用带来巨大挑战。生物医学工程改造策略不仅能够促进Tregs主动靶向与炎症趋化,还可维持Tregs叉头盒蛋白p3(Foxp3)在炎症环境中的表达稳定性,持续发挥机体免疫调节功能。本文详述Tregs的免疫调节机制,并对生物医学工程化改造的Tregs在自身免疫疾病、器官移植等炎症疾病中的应用进行展望,旨在启发和促进Tregs免疫过继疗法的临床应用研究。