摘要：目的明确环状RNA-SEC31A(circSEC31A)在胰腺癌中的表达水平,探讨其对胰腺癌细胞侵袭、迁移能力的影响及潜在的分子机制。方法采用实时荧光定量PCR检测人正常胰腺细胞株HPDE及胰腺癌细胞株BXPC-3、PANC1、CaPan-2、SW1990 circSEC31A的表达水平,选用表达量较高的胰腺癌细胞株进行后续实验。针对circSEC31A设计两条siRNA(#1、#2),采用脂质体将siRNA转染胰腺癌细胞沉默circSEC31A表达(siR-circSEC31A组),以不针对circSEC31A设计的siRNA转染胰腺癌细胞为对照组(siR-NC组),Transwell实验及划痕实验检测circSEC31A对胰腺癌细胞侵袭、迁移能力的影响。采用circSEC31A探针及oligo阴性对照探针进行RNA Pull-down实验,筛选与circSEC31A结合的miRNA,并验证该miRNA对胰腺癌细胞侵袭、迁移的影响。荧光定量PCR检测沉默miR-200c-3p及circSEC31A对胰腺癌细胞PDK1 mRNA表达的影响。蛋白质印迹法检测circSEC31A沉默对PDK1蛋白及下游相关蛋白Akt、磷酸化Akt(p-Akt)表达量的影响。结果胰腺正常细胞株HPDE circSEC31A表达量(1.000±0.120)显著低于胰腺癌细胞株BXPC-3(1.920±0.130)、SW1990(2.93±0.528)、PANC1(4.557±0.692)和CaPan-2(5.247±0.194)的circSEC31A表达量,差异有统计学意义(P<0.001)。Transwell实验结果显示,与PANC1 siR-NC组穿膜细胞数(1301.3±94.6)个/100倍视野和CaPan-2 siR-NC组穿膜细胞数(1835.0±70.1)个/100倍视野比较,PANC1 siR-circSEC31A#1组、siR-circSEC31A#2组和CaPan-2 siR-circSEC31A#1组、siR-circSEC31A#2组穿膜细胞数显著下降,分别为(727.3±92.9)、(792.0±18.1)、(718.0±90.6)、(692.7±84.8)个/100倍镜视野;划痕实验结果显示,与PANC1 siR-NC组(55.000±4.359)%和CaPan-2 siR-NC组(69.000±3.606)%比较,PANC1 siR-circSEC31A#1组(20.667±3.215)%、siR-circSEC31A#2组(20.000±4.583)%和CaPan-2 siR-circSEC31A#1组(28.000±8.185)%、siR-circSEC31A#2组(29.667±5.686)%的划痕区细胞覆盖率显著降低;RNA Pull-down实验表明,与PANC1 oligo探针组(1.000±0.091)和CaPan-2 oligo探针组(1.000±0.153)比较,PANC1 circSEC31A探针组(2.237±0.175)和CaPan-2 circSEC31A探针组(2.166±0.156)miR-200c-3p富集量显著升高;与siR-NC组穿膜细胞数(939.3±57.0)、(786.7±51.5)个/100倍镜视野比较,PANC1、CaPan-2细胞siR-miR-200c-3p组穿膜细胞数增加到(1206.0±99.1)、(1838.0±105.7)个/100倍视野,而siR-miR-200c-3p+siR-circSEC31A组穿膜细胞数又下降到(932.7±116.4)、(785.3±58.8)个/100倍镜视野;与siR-NC组(1.000±0.103、1.000±0.107)比较,PANC1、CaPan-2细胞siR-miR-200c-3p组PDK1 mRNA表达量(1.898±0.159、2.102±0.337)显著升高,而siR-miR-200c-3p+siR-circSEC31A组PDK1 mRNA表达量又显著下降到(0.980±0.070、1.015±0.079);蛋白质印迹法结果显示,PANC1 siR-NC组、siR-circSEC31A#1组、siR-circSEC31A#2组PDK1蛋白表达量分别为0.767±0.086、0.281±0.191、0.333±0.062,CaPan-2各组PDK1蛋白表达量分别为0.712±0.038、0.353±0.061、0.308±0.018;PANC1各组p-Akt蛋白表达量分别为0.741±0.050、0.114±0.027、0.139±0.041,CaPan-2各组p-Akt蛋白表达量分别为0.823±0.052、0.141

摘要：目的探讨腹腔镜胆总管探查术治疗胆总管合并胆囊结石的微创意义和可行性。方法回顾性分析86例胆总管合并胆囊结石患者行腹腔镜胆总管探查术的临床资料。结果86例患者中有79例顺利完成手术,其中3例经胆囊管途径完成腹腔镜胆总管探查术,6例行胆总管一期缝合手术。所有患者随访至今,仅1例患者残余胆总管结石,术后用胆道镜经T管取石治愈。结论腹腔镜胆总管探查术治疗胆囊合并胆总管结石安全、可行,微创意义明显。

摘要：目的探讨肝硬化门静脉高压症手术预后的危险因素。方法对本院近10年收治的161例肝硬化门静脉高压症手术患者资料，按预先设计的表格对24项临床及实验室指标进行收集、登记和统计分析。每项指标又设2～3个不同的量化亚组进行比较。结果筛选出7项指标与手术预后有明显关系：术后30h内创面出血（B0．356，P=0．000），出血量〉2I．被评为3分；肝脏体积（B=0．160，P=0．000），重度肝萎缩（hi肝前后径≤55mm、右肝斜径≤110mm）被评为3分；血液pH（B0．141，P=0．000），pH〈7．35被评为2分；剩余碱（BE）（B=0．123，P=0．000），〈-3mmol／I。被评为2分；血小板（PLT）减少（B0．065，P=0．015），〈3×10^9／L被评为2分；术中创面出血（B0．062，P=0．014），出血量〉2L被评为2分；红细胞减少（B0．053，P=0．024），〈3g／L被评为1分。治愈好转组147例，除1例总分为4分外，其余病例均≤3分；死亡组14例，除1例总分为4分外，其余病例均≥5分。结论术后创面大出血、肝脏重度萎缩、血液pH值〈7．35，BE〈3mmol／L、PIT下降、术中创面大出血，红细胞减少是手术预后的危险因素。总分5～6分手术有死亡可能；总分≥8分应列为手术禁忌。要降低死亡率，术前应积极治疗，将总分控制在4分以内。

摘要：目的研究基于64排螺旋CT胰腺和脾脏扫描数据的三维重建和可视化仿真手术。方法采集胰腺和脾脏CT的扫描数据,通过自适应区域生长法对CT序列图像进行程序分割和提取,再采用自行开发的医学图像处理软件对分割后的图像数据进行三维重建,然后利用FreeForm Modeling System和PHANTOM软件进行胰腺和脾脏的可视化仿真手术。结果利用自适应区域生长法对胰腺和脾脏CT图像进行程序分割速度快、效果好。用自行设计的图像处理软件进行三维重建,图像结构清晰,可真实再现胰腺和脾脏的解剖结构。通过Freeform Modeling System和PHANTOM可以进行和实际手术过程一样的可视化仿真手术。结论基于螺旋CT数据的三维重建和可视化仿真手术,对胰腺和脾脏等腹部脏器的个体化手术方案制定、风险评估、临床教学训练等方面都有很大的应用价值。

摘要：目的:探讨抗CⅡTA核酶对肝细胞表面MHCⅡ类分子表达的抑制作用。方法:设计并克隆针对CⅡTA第134、218及464位点的核酶(分别为Rz134、Rz218、Rz464)及其相应的CⅡTA靶基因,分别插入pGEM-T载体,进行细胞外切割活性筛选。将切割作用明显的Rz464亚克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP(pIRES2-EGFP-Rz464,pRz464)进行细胞内切割分析。pRz464稳定转染人胎肝细胞,流式细胞术检测MHCⅡ(HLA-DR、HLA-DP、HLA-DQ)类抗原表达,RT-PCR分析CⅡTAmRNA水平。结果:pRz464肝细胞表面HLA-DR、HLA-DP、HLA-DQ的诱导型表达分别为(1.01±0.51)%、(4.37±1.28)%和(1.98±0.42)%,与对照组比较分别下调90.65%、89.11%及65.32%;同时CⅡTA的诱导型mRNA含量明显减少(P<0.01)。结论:抗CⅡTA核酶-Rz464降低了CⅡTA的mRNA含量,从而阻止其调控的MHCⅡ类分子的表达。