摘要：非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的一种高度传染性和致死性疫病,近年来给我国生猪产业的健康发展造成了沉重打击。ASFV庞大的基因组导致人们难以及时掌握流行毒株的全基因组序列。本研究旨在利用Nanopore三代测序技术建立一种简便可靠的ASFV全基因组测序方法。设计覆盖ASFV全基因组的31对引物并分为4个引物池对样本进行扩增,通过Nanopore测序技术对扩增产物进行测序,进一步优化相关生物信息学分析方法,最终成功建立了ASFV全基因组测序方法。应用该方法成功从某环境拭子样本中获取一株全长为189 416 bp的ASFV全基因组测序。经一代测序验证表明,在B646L、EP402R、E183L、MGF_360-12L、MGF_505-3R和I177L等关键基因及部分变异位点上,本方法结果与一代测序结果一致性100%;在全基因组水平上,本方法结果与二代测序结果一致性为99.94%。此外,在这项研究中,采用Nanopore测序技术发现了NP1450L基因与NP419L基因间区存在56 bp的重复序列插入(通过一代测序技术进行了验证),但是二代测序未能发现这一显著的变异特征。本研究成功建立了基于Nanopore技术的ASFV全基因组测序方法,该方法具有良好的简便性和可靠性,为当前ASF的防控和分子流行病学研究提供了一个重要手段。

摘要：为科学、合理评价动物防疫条件审查中有关动物饲养场、养殖小区、动物隔离场、动物屠宰加工场、动物和动物产品无害化处理场(简称“五类场所”)选址的问题,运用OIE《陆生动物卫生法典》提供的风险分析方法,综合考虑场所周边屏障、动物疫病流行情况、动物分布、公路交通、设计规划、废弃物处理、无害化处理以及场所间的相互影响、对居民和环境的影响、沟通等方面因素,作出消除风险能力高低的判断,从而构建动物防疫条件审查选址风险评估体系,以期为落实农业农村部有关规定,实施动物防疫条件审查提供技术支持,也为相关企业兴办“五类场所”提供参考。

摘要：本研究根据猪塞尼卡病毒(SVA)VP1基因保守序列设计引物,通过优化反应条件,建立了实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对其进行特异性、敏感性和重复性的评价。结果显示,该检测方法特异性好,灵敏度达10 copies/uL,变异系数均小于2.0%,操作简单,耗时短。利用建立的检测方法对124份临床样本进行检测,结果,阳性率为3.2%。上述结果表明,本研究建立的荧光定量RT-PCR方法可用于猪原发性水泡病临床样品的快速检测和流行病学调查,具有良好的应用前景。

摘要：为建立非洲猪瘟病毒微滴式数字PCR方法,以非洲猪瘟病毒P72蛋白编码基因为靶基因设计引物和探针,利用正交试验方法优化反应体系及扩增程序,建立了非洲猪瘟病毒微滴式数字PCR方法,并对其敏感性、特异性及稳定性进行评估。结果显示:建立的方法最低检出限为0.58 copies/μL,与荧光PCR方法相比更敏感;本方法与布鲁氏菌、猪伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型和猪瘟病毒无交叉反应;对10倍稀释的标准物质检测10次,变异系数为8.44%,重复性好。利用建立的方法对100份临床样品进行检测,结果均为阴性,与荧光PCR检测结果一致;对5份实验室间比对样品进行检测,检测出阳性样品4份,阴性样品1份,与实验室间比对给定的样品盘结果一致。结果表明,本研究建立的微滴式数字PCR方法的敏感性、特异性和稳定性符合要求,适于非洲猪瘟病毒临床检测。

摘要：2016年4月,广东省某养殖场饲养的黄羽肉鸡发生了一种以精神沉郁、潜伏期短、病死率高为主要特征,以心包积液且肝脏呈土黄色并分布有出血点为主要剖检病变的疾病。无菌采集病鸡的肝脏和心包积液,接种麦康凯琼脂平板和血平板均未见细菌生长。根据腺病毒Hexon基因设计引物,以病鸡肝脏提取的DNA为模板,经过PCR扩增及序列测定和分析,判定为FAdV-4型腺病毒。通过实验室诊断技术结合临床症状和流行病学等进行综合分析,将此次疫病确诊为FAdV-4型腺病毒感染。

摘要：为了解广东省育肥猪群猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)携带情况,2019年在广东省43个生猪屠宰场,采集临床健康生猪淋巴结样品840份,运用商品化荧光定量RT-PCR试剂盒进行PRRSV核酸检测。设计PRRSV ORF5基因引物,选取部分阳性样品进行RT-PCR,测序后进行基因序列分析。结果显示:840份样品的PRRSV阳性率为17.02%,其中美洲型为14.29%,欧洲型为2.73%;成功获得15份样品的ORF5基因序列,其中12株为美洲型,3株为欧洲型;美洲型毒株中包含:JXA1-like毒株5株,GM2-like毒株3株,NADC30-like和VR2332毒株各2株;美洲型毒株基因相似度为87.5%~99.6%,欧洲型为90.2%~90.4%。对美洲型毒株的ORF5基因编码的氨基酸进行分析,发现检测到的不同亚群毒株各个功能区存在广泛的、显著的变异。结果表明,广东省屠宰场猪群的PRRSV隐性带毒率较高,且毒株复杂多样,以美洲型毒株为主,且已存在欧洲型毒株。建议落实并强化规模化猪场生物安全措施,加强流行病学监测,继续推动PRRSV净化工作。

摘要：在构成渔业的养殖、捕捞和加工三大细分产业中,养殖是中坚,其中以池塘养殖可控式养殖模式为之最.“半亩方塘一鉴开,天光云影共徘徊;问渠哪得清如许？为有源头活水来.”这是南宋朱熹作的一首题为《观书有感》的七言绝句.水产养殖是一门专业更是一门艺术,半亩方塘就是一口池塘.

摘要：近年来,我国肉鸡产业发展迅速,呈现规模化、集约化与智能化趋势,与此同时,肉鸡的屠宰福利问题对屠宰加工次品率以及肉质的影响较大,越来越受到人们的关注。我国目前已制定出相关标准,但对于家禽屠宰福利方面的研究相对较少。文章通过对宰前禁食、禁水、运输、静养、抓捕、吊挂、致晕、分割和分拣等现代肉鸡屠宰过程中的福利问题及其对肉质的影响进行综述,并对人工智能在肉鸡福利屠宰中的应用进行展望,以加强对福利屠宰的认识,促进福利屠宰智能化,提高我国肉鸡生产的国际竞争能力。

摘要：60头杜长大仔猪(9.8±0.1)kg随机分为2个处理,每个处理3个重复,每个重复10头,对照组饲喂含钙0.62%、磷0.49%的基础日粮,试验组饲喂在基础日粮中添加500U/g植酸酶的日粮。试验期为4周,进行饲养试验。在饲养试验结束时分别从各组每个重复栏中选择1头接近其组平均体重的仔猪进行屠宰,取出其掌骨测定相关指标。另外,选取4头体重相似的生长猪(31±0.6)kg按2×2交叉设计进行消化代谢试验,测定两种试验日粮的相关养分利用率。结果表明:(1)植酸酶组仔猪的鲜掌骨重、脱脂干骨重、脱脂干骨灰分含量、脱脂干骨钙含量和脱脂干骨磷含量分别较对照组提高了9%(P0.05),但其钙和磷的表观消化率、钙和磷的存留率均显著高于对照组(P<0.05),分别提高了20%、11%、12%和12%。耐热植酸酶在低钙磷日粮中的添加可促进仔猪对钙磷的利用,从而促进仔猪骨骼发育。

摘要：设计一种适用于羊等动物的颈静脉采血教学实验模型,为颈静脉采血教学提供可操作实验模型,通过实验模型实操互动提升学生的学习兴趣,从而提高教学效果。在教学过程中通过不断模拟和体验,结合受众反馈的意见进行改进,最终设计出包括山羊模型、模拟血液流动的置于动物模型皮下的静脉管、外置于动物模型的循环装置。为羊等动物的颈静脉采血教学过程提供一种可在模拟与动物体内静脉中血液流动相同的压力与流速的情况下进行对动物进行采血的教学实验模型,可以显著提升学生的学习兴趣和教学质量。通过模型教学有利于学生更好地掌握动物静脉采血方法。