摘要：背景:慢性痛包括痛觉过敏和痛觉感觉异常,是患者感到难以忍受和临床缺乏治疗手段的一种病理现象。目的:探讨神经损伤即刻给予钠离子通道阻滞剂(布比卡因)对慢性痛症状产生的预防作用。设计:随机对照观察。单位:广州医学院病理教研室。材料:实验于2002-07在协和医学院基础研究所生理实验室完成。选用成年SD大鼠57只。方法:将慢性压迫性神经损伤(坐骨神经轻度结扎)模型大鼠随机分为对照组(14只)和实验组(43只)。实验组在坐骨神经轻度结扎后即刻于神经损伤区周围包埋布比卡因粉剂或胶溶剂,而对照组不给药。观察两组大鼠在行为学、电生理学和组织形态学上的差异。主要观察指标:①两组大鼠行为学实验结果。②两组大鼠电生理结果。③两组大鼠背根神经节荧光染色切片、摄片结果。结果:纳入大鼠57只,所有动物均存活到实验结束,均进入结果分析。①行为学测定:实验组大鼠始终未出现热痛过敏症状,而对照组大鼠出现了持续的热痛过敏症状。②电生理实验:实验组大鼠坐骨神经中枢端的神经纤维自发放电百分数显著低于对照组(6.79%,46.7%)。③背根神经节切片荧光染色结果:实验组6只大鼠损伤侧L4～5的全部背根神经节切片中看不到明显的交感节后神经纤维芽生,没找到篮状细胞,而在对照组2只大鼠损伤侧L4～5的全部背根神经节切片中可看到明显的交感节后神经纤维芽生,共找到篮状细胞41只。结论:神经损伤后即刻在损伤区给予钠离子通道阻滞剂布比卡因可降低损伤神经纤维的异位放电,并抑制损伤侧背根神经节内的交感芽生,通过这两方面的共同作用最终可预防慢性痛症状的发生。

摘要：背景:氧化型低密度脂蛋白可通过Ras/Raf/丝裂原活化蛋白激酶激酶/丝裂原活化蛋白激酶途径诱导血管平滑肌细胞增殖及细胞周期蛋白的表达。目的:观察胞外信号调节激酶是否参与了氧化型低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞周期推进以及周期素D1的表达。设计、时间及地点:对照观察细胞学实验,于2008-02/10在广州医学院完成。材料:人血浆低密度脂蛋白来自健康志愿者血清。SD大鼠由广州医学院实验动物中心提供。方法:采用超速离心法分离人低密度脂蛋白进行氧化修饰及鉴定。以酶消化法培养大鼠血管平滑肌细胞,采用免疫组织化学染色法鉴定。主要观察指标:在静止的血管平滑肌细胞中加入MEK1/2选择性抑制剂10μmol/LPD98059和/或50mg/L氧化型低密度脂蛋白,以CCK-8和细胞计数法测定细胞增殖,流式细胞术观察细胞周期,蛋白印迹检测周期素D1蛋白表达及胞外信号调节激酶的活性。结果:CCK-8和细胞计数法显示,氧化型低密度脂蛋白能明显诱导血管平滑肌细胞增殖,PD98059抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞增殖,并且呈时间依赖性。流式细胞术分析表明,经氧化型低密度脂蛋白处理24h后,血管平滑肌细胞从G0/G1期进入S期,S期细胞百分比明显增高(P<0.01),加入PD98059处理24h后,血管平滑肌细胞由G0/G1期向S期的推进受到抑制。蛋白印迹结果显示,氧化型低密度脂蛋白能明显诱导周期素D1蛋白表达及胞外信号调节激酶的磷酸化,PD98059抑制氧化型低密度脂蛋所诱导的周期素D1蛋白表达以及胞外信号调节激酶的磷酸化。结论:氧化型低密度脂蛋白能诱导血管平滑肌细胞增殖,促进细胞由G0/G1期向S期转换以及周期素D1表达,其作用部分是由胞外信号调节激酶所介导。

摘要：在前期研究基础上,笔者利用软件工程理论,结合骨关节炎专业知识和互联网,设计开发出新型多功能骨关节炎患者资料管理应用软件《骨关节炎资料管理系统》(网络版),该软件具有网络功能,操作方便,适合应用于骨关节炎防治社区信息化管理,可有效提高骨关节炎的诊治、科研及教学水平。

摘要：背景:研究发现经表面修饰过的聚合物纳米粒能通过血脑屏障,可以改善药物对中枢神经系统疾病的疗效。目的:以生物可降解材料聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚物制备高包封率的载神经生长因子的纳米粒,并初步探讨其对PC12细胞的体外诱导效果评价。方法:采用复乳化溶剂扩散法制备载牛血清白蛋白的聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒,用单因素分析及正交设计对工艺进行优化筛选;扫描电镜观察纳米粒形态;纳米粒分析仪测定平均粒径和分散指数;BCA法测定纳米粒包封率及载药量,并进一步研究纳米粒体外释放特性。得到最好的制备方案后,制备载神经生长因子的聚合物纳米粒,并以此处理PC12细胞,倒置荧光显微镜观察载神经生长因子的聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒对PC12细胞的体外诱导状况,对其诱导效果、毒性及缓释效果进行评价。结果与结论:最优处方制备的载牛血清蛋白的聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒呈球形、大小均匀,平均粒径(258.9±5.73)nm,包封率为(80.56±2.23)%,内水相中投药量10mg时载药量约(4.24±0.12)%,体外释放符合Higuchi方程,分初期突释释放和后期缓释释放2个阶段,0-56d的累积释放总量分别为76.61%(牛血清白蛋白)、62.34%(神经生长因子)。载神经生长因子的聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒可以诱导PC12细胞像神经元样分化效能,表现出良好的缓释性能及无毒性作用。提示制备的载神经生长因子的聚乙二醇-聚乳酸聚乙醇酸共聚物纳米粒理化性质优良,在体外有良好的缓释效能及无毒性作用。

摘要：背景:Neurturin对多巴胺能神经元、运动神经元、感觉神经元、交感神经元等多种神经元具有促进存活及保护作用的研究报道甚多,关于Neur-turin对胆碱能神经元的影响报道较少。目的:探讨神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)和Neurturin联合应用对体外培养的神经生长因子受体阳性神经元生长发育的影响。设计:以细胞为研究对象,重复测量,验证性研究。单位:一所大学的解剖学教研室。材料:实验于2001-09/2002-06在广州医学院人体解剖教研室完成。新生的SD大鼠,培养液采用DMEM/F12培养基,另加20g/L无血清添加剂,抽滤灭菌后备用。方法:实验分4组:NGF组,NTN组,NGF+NTN组及对照组。前3组分别加入NGF,NTN,NGF+NTN,使其各浓度达到100μg/L。对照组加培养液替代。神经元原代培养新生大鼠基底前脑胆碱能神经元,然后用免疫组化结合图像分析技术观察Neurturin,NGF对培养的新生大鼠基底前脑胆碱能神经元生长发育的作用。主要观察指标:培养4,8d时新生大鼠前脑的NGFR阳性神经元存活情况和生长情况。结果:培养4d时,NTN组的各项指标均与对照组有显著性差异(P0.05),NGF+NTN组各项指标仍然优于NGF组或NTN?

摘要：背景:国内开展人工全膝关节置换较迟,有关对后稳定型膝关节假体近、远期疗效评估国内报道不多。目的:观察后稳定型全膝关节假体置换后材料与宿主的生物相容性及膝关节功能恢复情况。设计、时间及地点:回顾性病例分析,于1999-06/2004-12在广州医学院第一附属医院完成。对象:选择采用后稳定型假体置换治疗晚期老年膝骨关节炎患者58例,男16例,女42例;年龄59～81岁,平均66.42岁。单膝关节置换52例,双膝同时置换6例,共64膝。方法:根据膝关节内翻或外翻情况进行内侧或外侧软组织松解。测量股骨髁的前后径,切除前后十字韧带,先后行股骨远端、股骨髁前后方、胫骨平台截骨,去除髌股关节软骨。安装试模,复位后反复检查髌骨股骨轨迹,并作相应调整,尽量使关节被动屈伸达到正常。选择相应后稳定假体并以骨水泥固定,完成假体置入。主要观察指标:①膝关节活动功能。②材料与宿主的生物相容性。结果:所有患者均获随访,平均随访37个月。膝活动度由置换前平均67.4°,改善到置换后平均93.8°。HSS评分置换前平均(38.00±8.24)分,置换后平均(84.00±8.23)分。1例术后皮肤表浅坏死,2例(3膝)置换后2个月发生膝关节疼痛,但无红肿、压痛,活动度基本正常,X射线片示假体位置良好。置换后血栓栓塞性静脉炎5例。均经保守治疗治愈。无感染、松动及脱位病例。结论:后稳定型假体全膝人工关节置换治疗晚期老年骨关节炎近期随访结果较好,无特殊生物相容性反应。

摘要：背景:对白血病患儿在白血病细胞获得耐药、抗凋亡特性的过程中机制的研究目前甚少,多数研究集中在正常骨髓间充质干细胞和已建系的基质细胞,而未重视患儿骨髓间充质干细胞与白血病细胞之间的相互作用。目的:课题创新性提出白血病患儿骨髓间充质干细胞可能对白血病细胞株K562/AO2生长增殖及凋亡产生影响的理论假设。设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2007-12/2008-08在广州医学院第一附属医院儿科实验室完成。材料:骨髓间充质干细胞来源于广州医学院第一附属医院住院的30例白血病患儿,其中急性淋巴细胞白血病患儿22例,急性粒细胞白血病8例,患儿家属对实验均签署知情同意书。K562/AO2细胞株由天津血液病研究所提供。方法:Ficoll密度梯度法分离培养白血病患儿骨髓间充质干细胞。设立2组:K562/AO2细胞组单独悬浮培养处于对数生长期的K562/AO2细胞;K562/AO2细胞+骨髓间充质干细胞共培养组在骨髓间充质干细胞贴壁呈融合状态时,加入1×108L-1处于对数生长期的K562/AO2细胞,24h后去除未黏附的K562/AO2细胞。主要观察指标:白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562/AO2细胞生长的影响,AnnexinV-FITC法检测阿霉素对K562/AO2细胞凋亡的影响,流式细胞仪测定不同条件培养下的K562/AO2细胞周期,Taqman-MGB探针实时荧光定量PCR检测不同条件培养下耐药基因mdr1的表达。结果:与单独悬浮培养的K562/AO2细胞比较,K562/AO2细胞+骨髓间充质干细胞共培养组的K562/AO2细胞生长较为缓慢,无明显的对数生长期;早期凋亡细胞数明显减少(P0.05)。结论:体外细胞学实验结局证实,白血病患儿骨髓间充质干细胞诱导的K562/AO2细胞耐药与mdr1基因无关,而是通过黏附作用改变K562/AO2细胞周期,进而逃避药物的促凋亡作用。

摘要：目的:介绍各种不同椎间融合器在材料上的特点,以及不同椎间融合器的临床应用效果。方法:主要选择被Medline收录的外文文献和在国内核心杂志上发表的有关椎间融合器的文献,就其内容进行分析、分类、归纳及总结。结果:共检索到36篇文献,其中21篇从发展历史、材料等方面介绍了椎间融合器逐渐适应神经根、椎间隙、脊柱等压力的进程;证实了椎间融合器能够治愈多种脊椎疾病;15篇关于椎间融合器在使用后的效果及手术并发症。最后有10篇文章列为参考文献。结论:随着材料学发展和设计的进步,椎间融合器已能成功的缓解椎间隙、神经根、脊柱等的压迫,生物型、可吸收型椎间融合器将是未来发展的主流。但是,由于此类融合器的随访时间尚短,更多的相关研究还有待进行。

摘要：背景:三维重建技术已经广泛应用于椎弓根螺钉置入前规划,但是就其预测参数的准确性目前尚未见直接的分析与报道。目的:基于CT三维重建技术应用于临床,对腰椎椎弓根螺钉置入前指导作用的精确性作初步分析。方法:在Mimics软件下,随机对30例行腰椎椎弓根螺钉内固定的患者共136个椎弓根行内固定前CT三维重建,并通过内固定前模拟模块预测钉长、直径、水平面角及矢状面角度并与内固定后实际数据进行统计学比较。结果与结论:内固定前通过Mimics软件对腰椎行三维重建,设计最佳钉道并模拟置钉,预测椎弓根螺钉长、直径、水平面角及矢状面角度与通过C型臂及内固定中导航系统等方式置钉后实际数据的差异无显著性意义(P>0.05),并且内固定后行CT扫描见置钉位置及长度均良好。说明通过Mimics软件对腰椎进行三维重建模拟置钉并制定置钉参数,能比较精确的指导内固定中实际置钉,提高椎弓根螺钉的置钉安全。

摘要：背景:目前国内外学者已经从人类或啮齿类等动物的皮肤、毛囊、角膜、口腔黏膜、肠道黏膜、牙齿断端、唾液腺等上皮组织中成功分离出干细胞,并应用于组织创伤修复的实验中,但人阴道黏膜干细胞的分离和应用的实验较少。目的:探讨人阴道黏膜干细胞的分离、筛选与适合的体外培养方法。设计:以细胞为对象的观察基础实验。单位:广州医学院第三附属医院(原广州市第二人民医院)妇产科。材料:实验于2004-10/2005-08在中山大学中山眼科中心实验室完成。实验室级别:卫生部眼科学重点实验室、广东省眼科视觉科学重点实验室、广东省教育厅眼科视觉科学重点实验室、广东省"五个一科教兴医工程"重点实验室。孕2周健康成年雌性昆明小鼠,由广州中医药大学实验动物中心提供。无细菌与病毒感染的患者的阴道黏膜标本5份,由广州医学院第三附属医院(原广州市第二人民医院)妇科提供。方法:采用胰酶、胶原酶混合消化法获得阴道黏膜细胞。将丝裂酶素C处理的小鼠成纤维细胞作滋养层细胞。采用Ⅳ型胶原快速黏附法筛选人阴道黏膜干细胞,并采用免疫细胞化学方法鉴定。将所筛选的人阴道黏膜干细胞与原代人阴道黏膜细胞分别用采用碘化丙啶一步荧光染色法、流式细胞仪分别检测其细胞周期。以4组方法体外培养原代人阴道黏膜干细胞:滋养层细胞+上皮细胞完全培养液、滋养层细胞+DMEM/F12(3∶1)、无滋养层细胞+上皮细胞完全培养液、无滋养层细胞+DMEM/F12(3∶1)。培养至12d,比较各组CK19、CK10阳性细胞比例、克隆形成率与凋亡前能传代的次数。主要观察指标:①所筛选的人阴道黏膜干细胞与原代人阴道黏膜细胞的G0/G1细胞比例、CK19、CK10阳性细胞的比例。②比较4种不同方法培养人阴道黏膜干细胞的CK19、CK10阳性的细胞比例、克隆形成率以及能传代的次数。结果:所筛选的人阴道黏膜干细胞与原代人阴道黏膜细胞的G0/G1细胞比例、CK19、CK10阳性的细胞比例均有统计学差异(P<0.05)。其中采用滋养层细胞+上皮细胞完全培养液培养人阴道黏膜干细胞12d,其克隆形成率与CK19阳性细胞比例最高,CK10阳性细胞比例最低,体外培养人阴道黏膜干细胞能稳定传15代以上。结论:①Ⅳ型胶原快速黏附法可有效筛选人阴道黏膜干细胞。②滋养层细胞+上皮细胞完全培养液为体外培养原代人阴道黏膜干细胞的较佳方法。