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牛结节性皮肤病病毒GPCR基因荧光定量PCR检测方法的建立: 收藏
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引用; 《中国兽医学报》2021年第9期41卷 1729-1733页; 作者：原耀贤孙铭澮黄伟楠李康健何威付强马春全刘全马骏佛山科学技术学院生命科学与工程学院广东佛山528225 广东省揭阳市惠来县溪西畜牧兽医站广东揭阳515235 广州市微生物研究所有限公司广东广州510700; 为了更好地进行牛结节性皮肤病的临床检测,根据GenBank登录的牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的GPCR基因序列,设计并合成1对特异性引物,建立一种基于染料法的实时荧光定量PCR(qPCR)方法。本研究进一步对此检测方法进行了敏感性试验、特异性试...; 为了更好地进行牛结节性皮肤病的临床检测,根据GenBank登录的牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的GPCR基因序列,设计并合成1对特异性引物,建立一种基于染料法的实时荧光定量PCR(qPCR)方法。本研究进一步对此检测方法进行了敏感性试验、特异性试验、重复性试验,随后用模拟临床样品进行了验证。结果显示,该方法至少可以检测出的病毒序列含量为7.11×102拷贝/μL;仅对LSDV有特异性扩增;批内重复和批间重复的Cq值变异系数均小于1.5%。模拟临床样品检测结果显示,建立的qPCR方法在临床采集的牛皮肤结节、肛拭子、泪拭子中,能特异性检测出LSDV的序列片段。结果表明,本研究建立的LSDV的qPCR检测方法敏感性高、特异性强、重复性好,能应用于临床诊断。; 来源：详细信息评论

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