摘要：目的:克隆人地中海贫血基因β41/42及调控系列LCR,构建该致病基因的体外真核表达体系,为该病基因治疗的研究提供理想模型。方法:抽提β41/42纯合子患者的DNA,PCR扩增出人β珠蛋白基因座控制区(LCR)和β41/42基因,将其串连克隆至真核稳定表达质粒pcDNA3.1-中,脂质体转染至小鼠红白血病细胞(MEL),DMSO诱导MEL细胞表达,逆转录PCR检测人β41/42基因在MEL中的表达。结果:成功构建了人β41/42突变基因的真核表达系统。结论:β41/42基因在MEL细胞中的表达情况与设计的表达完全一致,为该病的基因治疗研究提供了一个理想模型。

摘要：目的预测瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)的抗原表位特性,筛选合适的TRPC6氨基酸序列合成多肽,用于制备抗TRPC6合成肽单克隆抗体。方法根据TRPC6氨基酸序列,采用IEDB分析及蛋白质软件(Lasergene710WinInstall)分析,预测TRPC6表面性、抗原性、亲水性及可能的二级结构性质,以此筛选合成多肽序列。结果确定合成多肽为TRPC6的胞外段565-579氨基酸序列,其表露性预测值1.000;柔韧性预测值1.008;β-转角预测值1.022;抗原性预测1.034;亲水性预测2.043。结论所确定的TRPC6多肽序列表位预测符合要求,为TRPC6合成肽制备抗单克隆抗体提供了一条有效的途径。