摘要：丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)是引起慢性肝炎的重要病因之一,严重危害公众健康。目前临床HCV感染常采用干扰素联合病毒唑进行治疗,然而应答率不高且易反复。因此,探索新型抗HCV治疗策略及药物显得尤为迫切。针对HCV核心基因的序列,设计与之互补的引导序列(Guide Sequence,GS),通过PCR的方法将其共价连接于大肠杆菌核糖核酸酶P(RNase P)催化性亚基(M1 RNA)的3?末端,成功构建了一种靶向性M1GS核酶(M1GS-HCV/C141)。经体外切割试验、胞内反义效应及胞内毒性研究,结果表明:M1GS-HCV/C141核酶不仅能够在体外对靶RNA片段产生特异性切割,在HCV感染的Huh7.5.1细胞中,也能显著抑制病毒核心蛋白的表达,进而使HCV RNA的拷贝数减少约1 000倍。因此,文中构建的M1GS-HCV/C141核酶在体外具有显著的抗HCV活性,这为HCV治疗研究提供了一条新的潜在途径。

摘要：【目的】丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)是引起病毒性肝炎的重要病原。目前临床HCV感染多采用干扰素联合病毒唑进行治疗,但其应答率低且感染易反复,探索新型抗HCV治疗策略与药物具有紧迫的现实意义。【方法】基于大肠埃希菌来源的核糖核酸酶P(RNase P),针对HCV核心基因的序列,设计一小段与之互补的外部引导序列(Guide Sequence,GS),通过PCR将其共价连接至大肠埃希菌RNase P催化性亚基(M1 RNA)的3'末端,从而构建一种靶向性的核酶——M1GS。【结果】构建的M1GS-HCV/C52核酶在体外可对靶RNA片段产生特异性切割;在HCV感染的Huh7.5.1细胞,该人工核酶也能够显著抑制HCV核心基因的表达,并使培养上清中HCV RNA的拷贝数减少约1500倍。【结论】本研究构建的M1GS-HCV/C52核酶具有显著的体外抗病毒活性,从而为HCV的治疗研究提供了一条潜在途径。

摘要：目的基于大肠埃希菌核糖核酸酶P的催化性RNA亚基(M1 RNA),人工构建一种抗丙肝病毒(HCV)的新型靶向性核酶,并进一步鉴定其胞外靶向切割活性及胞内抗病毒作用。方法首先采用计算机软件对HCV基因组保守区———5'非翻译区(5'UTR)的序列与结构进行分析,以确定候选靶位。针对靶位的侧翼序列,设计与之互补的引导序列(GS),然后通过PCR将其共价连接至M1 RNA的3'末端,从而构建靶向性的M1GS核酶。结果针对HCV 5'UTR第67位的胞嘧啶成功构建了一种M1GS核酶———M1GS-HCV/C67。该人工核酶不仅在体外可对靶RNA片段产生特异性切割,在HCV感染的宿主细胞内也能够显著抑制HCV核心蛋白的表达(P<0.05),并使上清液HCV RNA的拷贝数减少约800倍(P<0.01)。结论 M1GS-HCV/C67这种新型靶向性核酶具有良好的体外抗HCV活性,其成功构建为HCV感染的治疗研究提供了另一种潜在途径。

摘要：微生物学与免疫学是医药院校必不可少的基础课,为了让学生更好地学习与掌握医学基础知识,小组合作学习模式在免疫学课堂教学尝试的基础上,进一步扩展到微生物学的课堂教学。通过与传统教学模式比较,获得了初步的成效。文章对小组合作学习模式设计与实施方法、期末与总评成绩分析结果以及初步体会作一探讨。

摘要：目的构建对HCV基因组具有特异切割作用的新型靶向性核酶-M1GS。方法针对HCV基因组的保守区（5′UTR）设计并合成一段引导序列,通过PCR扩增直接将该引导序列连接于大肠杆菌核糖核酸酶P的催化亚基（M1 RNA）的3′末端,从而构建一类靶向性M1GS核酶。结果体外切割实验表明,所构建的核酶（M1GS-HCV/C67）对HCV5′UTR具有明显的切割作用,切割的位点在靶序列67~68 nt之间,属于特异性切割。结论构建了一种对HCV5′UTR具有靶向切割活性的M1GS核酶,为胞内反义效应及动物模型内抗病毒效应的评价提供了实验材料,为新型抗HCV药物的研究奠定了基础。

摘要：微生物实验是药学专业重要的基础实验课程之一,传统的教师为主导、学生被动接受的教学模式,已不能满足社会对药学专业人才的要求。为了改变这一现状,通过建立项目驱动综合设计互动实训平台,对药学微生物学实验教学进行了改革尝试。实践表明,药学微生物学项目驱动综合设计互动实训平台的建立,符合"学生为主体、教师为主导"的教学指导思想,充分调动了学生的主观能动性,增强了学生理论知识的运用和总结问题的能力,并培养了学生的科研思维。

摘要：目的构建对HCV基因组具有特异切割作用的新型靶向性核酶-M1GS。方法针对HCV基因组的保守区（5′UTR）设计并合成一段引导序列,通过PCR扩增直接将该引导序列连接于大肠杆菌核糖核酸酶P的催化亚基（M1 RNA）的3′末端,从而构建一种靶向性M1GS核酶。结果胞内切割实验表明,所构建的核酶（M1GS-HCV/C76）对HCV 5′UTR具有明显的切割作用,切割的位点在靶序列77~89 n t之间,属于特异性切割,具有胞内抗病毒活性。结论构建了一种对HCV 5′UTR具有靶向切割活性的M1GS核酶,且具有胞内抗病毒活性,为动物模型内抗病毒效应的评价提供了实验材料,为新型抗HCV药物的研究奠定了基础。

摘要：目的:使用低温高压差提取与多级膜分离浓缩结合技术,提取中药复方活性成分,观察其对脱发模型小鼠毛发生长的影响。方法:在前期的工作基础上,设计中药复方2组,并使用低温高压差提取与多级膜分离浓缩结合技术提取其活性成分。以纯净水为阴性对照,以5%米诺地尔为阳性对照,将复方活性成分,涂擦小鼠脱毛区,记录小鼠新生毛发生长时间,并观察小鼠毛囊组织学变化。结果:与阴性对照(纯净水)相比,2组中药复方活性成分可加快小鼠生发进程,并且在毛囊数目上存在统计学差异。2组中药复方活性成分均可达到阳性对照相似效果。结论:葛根、桑叶、苦参、何首乌、侧柏、甘草、黄芪、女贞子、以及X成分按一定比例所组成的复方合剂,可促进脱发模型小鼠毛发的生长。