摘要：目的建立临床化学发光免疫检验方法学性能验证方案和实验方法。方法参考美国临床和实验室标准化协会(CLSI)系列文件和相关文献,结合工作实际,设计验证方案,并对 BayerCentaur 240化学发光免疫检测系统测定血清 AFP 的精密度、准确度、分析灵敏度、分析测量范围、临床可报告范围和生物参考区间6大分析性能进行验证和评价,并将实验结果与厂家(德国拜尔公司)提供的分析性能或公认的质量指标进行比较。结果 AFP 含量在77.4、168.0 ng/ml 时,日间不精密度分别为5.70%和4.84%,与厂商日间不精密度(4.9%和5.0%)基本一致;4个浓度校准品检测结果与靶值的相对偏倚均<5%,5份室间质评控制品检测结果与靶值的相对偏倚在-3.4%～11.9%之间;检测低限为1.04 ng/ml,略低于厂商的检测低限(1.30 ng/ml),生物检测限在2.65～3.53 ng/ml之间,功能灵敏度为3.53 ng/ml;分析测量范围为3.53～912.00 ng/ml(厂商线性范围1.3～1000.0ng/ml),临床可报告范围为3.53～182 400.00 ng/ml;生物参考区间验证结果为0.6～7.7 ng/ml(厂商参考区间<8.1 ng/ml)。结论 Bayer Centaur 240化学发光免疫检测系统检测 AFP 的分析性能符合临床要求,验证方案和实验方法简便易行。本研究对规范医学实验室建设和实验室认可,提高化学发光免疫检验质量有重要意义。

摘要：目的了解健康教育对慢性肾脏病患者饮食知识掌握程度的影响,探讨可能有效的饮食健康教育方式。方法采用自行设计的肾病饮食知识调查表,对75例慢性肾脏病患者进行抽样调查,分析其饮食知识掌握程度与接受健康教育之间的关系。结果慢性肾脏病患者回答饮食知识调查表中问题的正确率普遍较低;接受过健康教育者在6道题目的正确率较未接受过健康教育者明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性肾脏病患者对肾脏病饮食知识的掌握程度普遍较低,而接受过健康教育者相对有所改善,提示现行的健康教育方式具有一定成效,但仍需要完善并广泛推行。

摘要：目前小儿推拿临床研究中存在研究目的不明确、缺乏对现代科学研究方法的合理选择和运用的问题,使其在国内及国际范围的发展及推广受到一定程度的制约。评价小儿推拿治疗的特异性和整体性效应是小儿推拿临床研究面临的两大主要问题。基于小儿推拿的自身特点及其临床研究的特殊性,结合其临床研究可能的难点,从试验设计类型、盲法、对照组及疗效评价指标的选择等方面进行探讨和分析,为小儿推拿临床研究提供方法学思路。

摘要：随着人口老龄化加重,膝关节骨关节炎的患者日益增多,而单髁置换术手术技巧的提升及假体设计的优化使其成为治疗膝关节内侧间室病变的主流选择。既往的研究表明,单髁置换术后的下肢力线对于膝关节外侧间室病变的进展、假体使用年限、患者功能活动及舒适度存在重要的影响。因此关于影响单髁置换术后下肢力线的因素及术后最佳力线的研究应运而生,但少有系统总结及综述单髁置换术后下肢力线相关研究进展的文献。

摘要：背景:骨髓间充质干细胞在不同条件下可以分别分化为成骨细胞、软骨细胞、成肌细胞、脂肪细胞、神经胶质细胞、血管内皮细胞等。目的:与成骨细胞共培养的条件下,观察大鼠骨髓间充质干细胞Ⅰ型胶原的表达。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-01/08在广州中医药大学附属骨伤科医院细胞室完成。材料:3月龄SPF级SD大鼠6只用于骨髓间充质干细胞的分离与扩增,1d龄以内清洁级SD乳鼠10只用于成骨细胞的分离与扩增。方法:贴壁法分离骨髓间充质干细胞,扩增后以流式细胞仪检测其均一性及细胞表型。采用酶消化法分离培养成骨细胞,以磷酸酶染色观察细胞分泌情况。利用Transwell培养板将成骨细胞和骨髓间充质干细胞在培养液以及其中的大分子蛋白可以相互交流而细胞间不相互接触的培养板内培养,以采用普通培养板单独培养的骨髓间充质干细胞为对照。主要观察指标:观察骨髓间充质干细胞的形态学变化及矿化能力,20d后半定量RT-PCR方法检测骨髓间充质干细胞Ⅰ型胶原的表达,茜素红染色后显微镜下计数钙化结节。结果:流式细胞仪检测结果显示细胞均一性较好,2代细胞均一性在90%以上,CD34、CD45表达为阴性,CD44表达阳性。成骨细胞原代培养20d时出现不透光的钙化结节,生长期细胞分裂相多见,细胞突起相互连接,汇合时呈铺路石状。茜素红染色矿化结节呈现酒红色,骨碱性磷酸酶染色可见胞质内出现黑色颗粒或块状沉淀。共培养的骨髓间充质干细胞形成的钙化结节数高于对照组(P<0.05);与成骨细胞共培养的骨髓间充质干细胞Ⅰ型胶原表达量明显高于对照组(P<0.01)。结论:与成骨细胞共培养的骨髓间充质干细胞Ⅰ型胶原的表达量高,成骨能力强。

摘要：背景:既往研究倾向于分析骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,以及分化过程中的影响因素,涉及成骨细胞对骨髓间充质干细胞分化影响的报道较少。目的:在与成骨细胞共培养的条件下,观察大鼠骨髓间充质干细胞的成骨特性。设计、时间及地点:细胞学体外对比观察,于2007-01/08在广州中医药大学附属骨伤科医院细胞室完成。材料:1d龄清洁级SD乳鼠10只,购自中山大学动物实验中心;3月龄SPF级SD大鼠6只,购自广州中医药大学动物实验中心。Transwell双层细胞培养板为Corning公司产品。方法:取SD乳鼠颅盖骨,胰蛋白酶+胶原酶多次消化分离培养扩增成骨细胞。取SD大鼠股骨和胫骨,用DMEM培养液冲洗骨髓腔,冲出液体过滤后按l:1滴加于淋巴细胞分离液上层,离心吸取液面交界处的单个核细胞,调整骨髓间充质干细胞浓度为1×105/cm,接种后胰蛋白酶消化扩增。Transwell双层细胞培养板的隔膜孔径为0.4μm,共培养组于培养上室接种成骨细胞,对照组培养上室未接种细胞,两组培养下室均于预处理的盖玻片上接种骨髓间充质干细胞,培养20d。主要观察指标:酶联免疫吸附法检测培养上清中骨形态发生蛋白2含量、骨碱性磷酸酶活性、骨钙素含量及钙化结节数。结果:与对照组比较,第15天共培养组上清中骨形态发生蛋白2的含量显著升高(P<0.01),第20天共培养组上清中骨碱性磷酸酶含量、骨钙素含量及钙化结节数均明显升高(P<0.05或0.01)。结论:体外构建的成骨细胞-骨髓间充质干细胞共培养模型一定程度上模拟了体内成骨环境,与成骨细胞共培养的骨髓间充质干细胞成骨能力增强。

摘要：目的了解院内外规范化健康教育对哮喘患者疗效的影响。方法将80例被确诊为哮喘的住院患者随机分为观察组和对照组。观察组按照我科"哮喘患者健康教育规范"对其进行哮喘知识专门宣教及电话随访,并建立随访档案。对照组采用传统的健康教育方式。1年后对两组患者采用自行设计的问卷检测健康教育达标率;采用全院统一的门急诊患者满意度调查表调查护理工作满意度;并统计1年内哮喘复发住院2次以上患者数评价院内外规范化健康教育效果。结果观察组的健康教育达标率和护理工作满意度均显著高于对照组,对照组哮喘复发2次住院率明显高于观察组。结论院内外规范化健康教育对哮喘患者疗效的影响是非常显著的,能有效减轻和控制哮喘发作,提高患者的生活质量。

摘要：目的:观察热敏灸对高校教师心理亚健康状态的干预效果。方法:采用随机对照设计,纳入100例合格受试者。采用随机数字表法分为两组。试验组(n=50):艾灸探查心俞、百会、风池、命门、关元等穴位灸感,选取有热敏灸感的穴位施灸,艾灸时间以热敏灸感现象消失为度,每日1次,10次1疗程;对照组(n=50):常规心理健康教育,每周2次,每次2学时。两组干预周期均为4周。观察指标为简易CMI量表、症状自评量表(SCL-90)。结果:两组CMI总分、M^R总分、SCL-90总分比较均有统计学意义(P<0.05)。各项心理因子比较,两组在躯体化、抑郁、焦虑、敌对、偏执、紧张、精神病性、其他等方面均有统计学意义(P<0.05)抑郁、焦虑、紧张等方面均有统计学意义(P<0.05)。结论:与常规心理教育比较,热敏灸能有效改善高校教师心理亚健康状态,尤其是缓解抑郁、焦虑、紧张等不良心理状态效果更佳。

摘要：本文介绍我国目前药物临床试验中受试者损害补偿存在的问题和对策。提出应完善我国受试者的损害补偿相关法规,在知情同意书设计、执行和伦理审查委员审查时要明确补偿问题。呼吁建立补偿基金和相关的意外保险,并成立专门的机构进行分析和判定后予以适当的补偿,从而保证药物临床试验的顺利进行。

摘要：背景:严重急性呼吸道综合征(severe acuterespi ratory syndrome,SARS)是由SARS相关冠状病毒感染引起的急性传染性疾病。但目前其康复期患者细胞免疫状态仍有待进一步研究。目的:观察SARS患者康复期淋巴细胞功能状态和T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族表达的格局。设计:前后对照观察。单位:广东省中医院中心实验室。对象:选择2003-01/04在广州中医药大学第二附属医院收治的76例治愈的SARS患者,全部病例均符合"非典型肺炎的临床诊断标准"、"非典型肺炎重症病例诊断标准、出院标准"及《中医临床诊疗术语证候部分》的诊断标准,男30例,女46例,平均(32±11)岁。选择10名同期健康到院体检者,女5名,男5名,平均(32±7)岁,所有受试对象对检测项目知情同意。方法:①TCRVβ24个亚家族的表达检测:取受试对象全血2mL,用EDTA-K2抗凝管抗凝。在流式细胞术检测专用管中,分别加入各种荧光素标记的mAb:抗CD3、抗CD4、抗CD8、抗CD25、抗CD28、抗HLA-DR、PC5-抗CD3mAb、TCRVβ1(PE+FITC)、Vβ2(PE+FITC)、Vβ3(FITC)、Vβ4(PE+FITC)、Vβ5.1(PE+FITC)、Vβ5.2(PE)、Vβ5.3(PE)、Vβ7.1(PE+FITC)、Vβ7.2(FITC)、Vβ8(FITC)、Vβ9(PE)、Vβ11(PE)、Vβ12(FITC)、Vβ13.1(PE)、Vβ13.2(PE)、Vβ13.6(PE+FITC)、Vβ14(FITC)、Vβ16(FITC)、Vβ17(PE+FITC)、Vβ18(PE)、Vβ20(FITC)、Vβ21.3(FITC)、Vβ22(PE+FITC)和Vβ23(PE)10μL,然后加入抗凝血50μL。混匀后,于室温避光孵育15min,再加入溶血素溶血、洗涤。最后将沉淀溶在300μLPBS中,用CoulterESP流式细胞仪进行检测。②T细胞亚群,T、B细胞的活化状态及Ts细胞和Tc细胞百分率的检测:每次收集5000个细胞,用仪器所带软件分别计算T细胞亚群(CD3、CD4和CD8)、活化的T、B细胞(CD3+/CD25+、CD3+/HLA-DR+、和CD3-/HLA-DR+)、Ts细胞和Tc细胞(CD8+/CD28+、CD8+/CD28-)的百分率。主要观察指标:①T细胞亚群(CD3、CD4和CD8)的表达。②活化的T、B细胞(CD3+/CD25+、CD3+/HLA-DR+、和CD3-/HLA-DR+)的表达。③Ts细胞和Tc细胞(CD8+/CD28+、CD8+/CD28-)的百分率。④TCRVβ24个亚家族的表达。结果:所有受试对象均进入TCRVβ24个亚家族检测结果分析,74例SARS患者及健康对照者10名均进入其余检测结果分析。①T细胞亚群的检测结果:CD4+细胞的百分率均数低于参考值[(33.33±6.64)%,(43±9)%,P<0.01],CD8+细胞的百分率高于参考值[(34.07±6.40)%,(30±9)%,P<0.01]。②活化的T、B细胞表达检测:表达HLA-DR的T、B细胞增加,而表达CD25的T细胞减少。有53例CD25+细胞的百分率低于正常参考值,有64例CD3+/CD25+T细胞的百分率低于正常参考值。只有CD3+/HLA-DR+和CD3-/HLA-DR+细胞的百分率高于正常参考值,其中表达CD3+/HLA-DR+的T细胞增加36例,表达CD3-/HLA-DR+的T细胞增加30例。③Ts细胞和Tc细胞的百分率:Ts细胞(CD8+/CD28-)的百分率较参考值增高[(28.75±7.31)%,(15.99±5.1)%,P<0.01];Tc细胞(CD8+/CD28+)的百分率则低于参考值[(5.99±3.60)%,(13.2±4.1)%,P<0.01]。其中有39例Tc细胞的百分率降低,有48例Ts细胞的百分率升高,CD4+与CD8+T细胞的比值均在正常参考值范围内。④TCRVβ24个亚家族表达:康复期SARS患者TCRVβ24个亚家族表达中,TCRVβ14的表达最高,TCRVβ5.3、和23表达次之,出现TCRVβ24个亚家族表达的不同。正常对照组中只有TCRVβ14表达最高,与SARS患者的结果相一致,但TCRVβ24个亚家族的分布格局不同。两组进行比较,Vβ1、Vβ5.2、Vβ5.3、Vβ7.2、Vβ9、Vβ11、Vβ13.1、Vβ13.2、Vβ17、Vβ18、Vβ22和Vβ23的表达差异显著,康复期SARS患者组均高于正常对照组(P<0.05-0.01)。结论:康复期SARS患者CD8+CD28-T细胞数的升高可导致CD8+T细胞数升高;而Ts细胞数的增加,因其分泌的抑制因子增