摘要：目的:以《国际功能、残疾和健康分类(ICF)》为理论框架,开发一款用于脊髓损伤患者延续护理的移动应用程序(APP)。方法:APP的设计和开发包括三个步骤:(1)经3轮Delphi国内专家调查,形成《脊髓损伤延续护理ICF组合》;(2)经专家咨询,从《脊髓损伤延续护理ICF组合》中确定可纳入延续护理随访APP的ICF类目,明确其评定方法和标准化指导方案;(3)软件工程师依据前期工作,使用Java语言开发APP。结果:该APP已初步开发完成,可实现医护人员对SCI患者出院后的远程评估、标准化健康指导、专科转介、信息交互和随访管理五大核心功能。结论:这款基于ICF的随访APP具有全面性、延续性、协调性、合作性、智能化和标准化的特点,能够满足脊髓损伤患者延续护理的需求。

摘要：目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建MLH1基因敲除的微卫星不稳定鼠源性结肠癌细胞Mc38和鼠源性乳腺癌细胞4T1,为研究微卫星不稳定肿瘤在抗肿瘤免疫治疗过程中的作用机制提供细胞模型。方法:设计2条特异性靶向MLH1基因的SgRNA序列,构建lentiCRISPRv2-SgRNA重组质粒载体,经PCR、测序鉴定;将lentiCRISPRv2-SgRNA重组质粒载体分别和慢病毒包装骨架质粒pMD2.G、psPAX2共转染293T细胞构建lentiCRISPRv2-SgRNA慢病毒载体;利用lentiCRISPRv2-SgRNA慢病毒载体分别感染Mc38、4T1细胞,经嘌呤霉素和96孔板流式分选筛选出阳性单克隆细胞后PCR、Western Blot和测序鉴定;MLH1-/-Mc38细胞、MLH1-/-4T1细胞连续培养约70 d,经荧光PCR-毛细管电泳进行微卫星状态检测,筛选MLH1基因敲除的微卫星不稳定Mc38、4T1细胞。结果:测序结果表明成功构建lentiCRISPRv2-SgRNA重组质粒载体;PCR、Western Blot和测序结果表明成功构建MLH1-/-Mc38细胞、MLH1-/-4T1细胞;荧光PCR-毛细管电泳结果表明成功构建MLH1基因敲除的微卫星不稳定Mc38、4T1细胞。结论:本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建MLH1基因敲除的微卫星不稳定鼠源性结肠癌细胞Mc38和鼠源性乳腺癌细胞4T1,为后续深入研究微卫星不稳定肿瘤在抗肿瘤免疫治疗过程中的作用机制奠定了基础。

摘要：目的观察siRNA(Small interference RNA,siRNA)介导survivin基因对肺癌细胞凋亡作用。方法设计、合成针对survivin的siRNA并构建相应载体,转染对数生长期肺癌细胞A549,对比阴性对照组和空白对照组;半定量RT-PCR检测survivin mRNA的表达,MTT法检测细胞生长,流式细胞仪检测肺癌细胞的凋亡。结果转染siRNA组survivin mRNA表达明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。MTT法检测各组细胞生长曲线阴性对照组与空白对照组相比,转染后24,48,96小时及1周时细胞生长未受影响,siRNA组在转染后24,48小时细胞生长未受明显影响,而96小时及一周时明显抑制。转染siRNA组的细胞的凋亡率与阴性对照组与空白对照组相比显著增加(14.94%±1.60%vs 3.23%±0.46%,4.22%±0.34%,P<0.05)。结论本实验提示siRNA沉默survivin基因能促进肺癌细胞的凋亡,survivin siRNA基因治疗有可能成为肺癌治疗的新靶点。

摘要：目的比较分析无症状人群与发育性髋关节发育不良(developmental dysplasia of the hip,DDH)人群的髋臼三维朝向,为髋部疾病的鉴别诊断、手术规划、植入器械设计及术后评估等提供数据参考。方法回顾性收集符合选择标准的无症状人群骨盆CT 84例(无症状组)和DDH患者骨盆CT 47例(DDH组)。两组人群性别构成及年龄(包括男女亚组年龄)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。使用半自动测量软件MaxTHA测量3种定义下的前倾角和外展角,包括手术学外展角(operative inclination,OI)、影像学外展角(radiographic inclination,RI)、解剖学外展角(anatomic inclination,AI)、手术学前倾角(operative anteversion,OA)、影像学前倾角(radiographic anteversion,RA)和解剖学前倾角(anatomic anteversion,AA),并进行两人群间、不同Crowe分型亚组间、各性别亚组间及左右侧间的比较。结果无症状组与DDH组健、患侧间比较显示,无症状组与DDH组健侧的髋臼朝向各角度参数差异均无统计学意义(P>0.05);DDH组患侧的OI、RI、AI显著大于健侧和无症状组,AA显著小于健侧和无症状组,差异有统计学意义(P0.05);CroweⅡ、Ⅲ、Ⅳ型组OI、RI、AI显著大于正常组,CroweⅢ型组的OI、Ⅳ型组的RI和AI显著大于Ⅰ型组,Ⅳ型组的AI显著大于Ⅱ型组(P<0.05);CroweⅢ型组OA、RA、AA显著小于除Ⅰ型组外的各组(P<0.05)。无症状组女性的OA、RA、AA以及DDH组女性的OA、AI显著大于对应组男性,差异有统计学意义(P<0.05)。无症状组男性右侧髋臼的OI、RI、AI、OA以及女性右侧髋臼的RI、AI均显著大于左侧,差异有统计学意义(P<0.05)。结论髋臼朝向在无症状人群和DDH人群间存在人群差异,在不同Crowe分型亚组间存在组间差异,在各人群亚组内存在性别间差异,在无症状人群中存在双侧差异。

摘要：目的构建沉默小鼠RANK基因的真核表达载体pSuper-shRANK,筛选沉默RANK的最佳干扰序列。方法针对小鼠RANK基因设计并合成3对干扰序列,将其连接到真核表达载体pSuper上,酶切及测序鉴定正确后命名为pSuper-shRANK,后将其用脂质体瞬时转染小鼠骨髓巨噬细胞,用荧光显微镜观察转染情况,用Real-timePCR和Westernblot分析干扰效率。结果酶切分析与测序结果表明重组载体pSuper-shRANK构建成功,脂质体共转染后,Real-timePCR和Western blot分析结果显示shRANK-3干扰效果最好,干扰效率达88.7%,筛选出shRANK-3为最佳干扰序列。结论成功构建了沉默小鼠RANK基因的真核表达载体pSuper-shRANK;筛选出了沉默小鼠RANK的最佳干扰序列,为研究抑制该基因在破骨细胞分化及活化作用机制中奠定了基础。

摘要：目的拟建立以荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测前列腺特异性膜抗原(PSMA)及其变异体5(PSMA5)DNA的定量方法。方法自行设计三对引物,自制PC3.0-T-PSMA及PC3.0-T-PSMA5质粒作为标准品,采用FQ-RT-PCR检测前列腺癌LNCap细胞中PSMA及PSMA5 DNA的含量。结果标准曲线的斜率为-0.29,相关系数为0.995,成功地扩增出前列腺癌LNCap细胞中PSMA及PSMA5基因的目标DNA片段。结论应用自行设计的引物及标准品的FQ-RT-PCR能对前列腺癌细胞株中PSMA及变异体PSMA5的DNA进行定量PCR检测。

摘要：远程医疗协作服务平台符合国家新医改政策和医疗卫生未来发展的方向,文章建设“资源共享、互联互通、强化监管”的“互联网+”分级诊疗协作服务体系,将服务平台建设成国内领先的区域性互联网远程医疗信息示范项目,落实分级诊疗制度。通过对医联体远程协作服务平台进行设计分析,以实现互联网分级诊疗目标,医疗资源优化配置,更好地满足全民医疗需求。

摘要：目的 设计一种基于数字图像视觉特征的超声图像中胎儿双顶径(BPD)、头围(HC),以及股骨骨干长度(FL)的自动测量方法.方法 自动测量方法包括胎儿超声图像增强、连通域提取、目标测量共3个主要步骤.将自动测量结果与人工标注结果进行比较,记录最大误差值.结果 试验测试图像155例,其中头围、双顶径图像75例,股骨图像80例.自动检测方法对头围的定位准确率大于90%,对股骨的定位准确率大于95%.对胎儿头围的测量误差小于5 mm,对双顶径的测量误差小于2 mm,对股骨骨干长度的测量误差小于0.3 mm. t检验概率分别为PHC=0.15,PBPD=0.13,PFL=0.09,α=0.05.试验结果表明利用计算机自动测量技术对双顶径、头围,以及股骨骨干长度的自动评估结果与人工标注结果差异无统计学意义(均P>0.05).结论 采用数字图像视觉特征自动测量具有较高的准确性和计算效率,可以减少人工测量的主观性和随机性,提高超声筛查的准确性,减轻超声医务人员的工作量.

摘要：目的通过对上前牙全瓷桥的抗折性进行正交试验研究,探讨上前牙全瓷桥的合理设计方案。方法根据正交表L16(42×29)对全瓷材料、连接体宽度、粘固材料与底层冠舌侧设计四个因素进行搭配制作16个三单位上前牙全瓷桥,在电子万能测试仪上进行断裂试验,对其断裂力值进行极差分析及正交试验的方差分析。结果全瓷材料对断裂力值的影响最大,连接体宽度与底层冠舌侧设计其次,粘固材料影响最小。四种全瓷材料的抗折强度由大到小依次为:氧化钇部分稳定型氧化锆(YZ)、纯氧化铝(AL)、玻璃渗透氧化铝(ICA)、易美压铸陶瓷(***)。ICA、AL、YZ三种材料上前牙全瓷桥一侧连接体断裂,***全瓷桥两侧连接体均断裂。选用YZ制作三单位固定桥,而且桥体两侧的连接体宽度均为3.0mm,底层冠舌侧厚度为1.0mm时,全瓷桥的断裂力值最大。结论 ICA、AL、YZ均可满足前牙区正常咀嚼力的需要,临床根据实际情况来选择制作全瓷桥。为增强上前牙三单位全瓷桥的抗折性,推荐全瓷桥双侧连接体面积均不小于4.0mm×3.0mm;双侧基牙的底层冠舌侧厚度达到1.0mm。

摘要：目的了解沉默β-catenin基因对肝癌耐药细胞HepG2的影响。方法实验分为5组:正常肝细胞(LO2)组、HepG2组、HepG2/ADM组、SiNC-HepG2/ADM阴性转染组和Siβ-cateninHepG2/ADM转染组;细胞免疫荧光技术检测各组β-catenin的表达情况;设计并筛选出抑制效率最高的Siβ-catenin;Western-blot及RT-PCR技术检测各组β-catenin、P-gp、MRP1的mRNA和蛋白的表达水平;MTT法观察各组对阿霉素(ADM)、氟尿嘧啶(5-FU)、环磷腺苷(VCR)和奥沙利铂(OHP)的敏感性;流式细胞仪检测各组细胞凋亡。结果 50 mol/L的ctnnb1-001在HepG2/ADM中抑制效率最高:78.86%(P<0.05),选其为Si-β-catenin;细胞免疫荧光显示HepG2/ADM中β-catenin荧光最强,转染Si-β-catenin后荧光显著减弱;β-catenin、P-gp和MRP1 mRNA和蛋白在HepG2/ADM组表达较高,mRNA表达分别为:0.92±0.03、7.98±0.43和4.56±0.12(P<0.05),蛋白表达分别为:1.128±0.214、1.678±0.344和1.405±0.212(P<0.05);转染Siβ-catenin至HepG2/ADM中,β-catenin、P-gp和MRP1在mRNA及蛋白水平均不同程度表达减少,mRNA表达分别为:0.47±0.03、0.66±0.054和0.74±0.03(P<0.05),蛋白表达分别为:0.787±0.032、0.797±0.055和1.390±0.050(P<0.05);Siβ-catenin-HepG2/ADM转染组较HepG2/ADM组对ADM、5-FU、VCR和OHP的耐药系数(RI)分别为0.61、0.55、0.30、0.55,对化疗药物敏感性显著增强(P<0.05);Siβ-catenin-HepG2/ADM转染组凋亡率(28.05±0.35)%,较其他组明显增加(P<0.05)。结论 Wnt/β-catenin通路在HepG2中异常激活,其中β-catenin可能正性调控肝癌耐药基因P-gp和MRP1,Si-β-catenin能一定程度阻断Wnt通路,并能一定程度逆转肝癌细胞株HepG2的耐药性和增强化疗敏感性,增加凋亡。