摘要：目的观察不同浓度胰岛素对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)形态和细胞活性的影响,用以筛选内皮细胞胰岛素抵抗模型。方法应用含不同浓度胰岛素(50,40,30,20,10,1,0.1,0.01U/L)的DMEM培养基与HUVEC共同培养6、12、24、36、48、72h;观察细胞形态学变化;四甲基偶氮唑盐比色法(tet-razolium colormetric assay,MTT)测定细胞活性。结果①细胞形态学变化:当胰岛素浓度小于10U/L,HUVEC生长加速;当胰岛素浓度为30U/L时,HUVEC出现核固缩;当胰岛素浓度达到50U/L时,HUVEC出现核碎裂和核溶解。②MTT法测定细胞活性:与0.01U/L组比较,当胰岛素浓度为50U/L时,细胞活性显著下降(P0.05)。当作用时间超过36h,残留细胞数明显下降,细胞活性显著降低(P<0.01)。③析因设计资料的方差分析结果:不同胰岛素剂量组间差异有统计学意义(P<0.01);不同用药时间(胰岛素作用时间)组间差异有统计学意义(P<0.01);胰岛素剂量和用药时间之间交互效应有统计学意义(P<0.01);模型拟合效果理想,R2=0.928。交互效应轮廓图也提示胰岛素给药剂量和作用时间存在交互效应。结论胰岛素对人脐静脉内皮细胞的生长发育具有双向调控作用,胰岛素浓度30U/L、作用时间48h的有可能成为血管内皮细胞胰岛素抵抗的细胞模型。