摘要：目的探讨RNA干扰靶向抑制磷脂酰肌醇3-激酶（P13K）P85α蛋白表达对结直肠癌细胞周期与细胞凋亡的影响。方法设计4条shRNA干扰载体及1条阴性对照载体．分别稳定转染结直肠癌SW480细胞。采用Western blot筛选出对P13K P85α蛋白抑制效率最高的shRNA干扰片段．然后通过PI标记法和Annexin V—FITC标记法分别检测干扰后SW480细胞周期和细胞凋亡情况。结果转染shRNA／324后．SW480细胞P13K P85α蛋白降低最为显著．抑制率为90％。选择该干扰片段进行后续实验。干扰组与对照组SW480细胞的G1期细胞数量分别占（62．4±2．7）％和（51．2±3．5）％；S期细胞数量占（23．9±1．7）％和（34．1±3．4）％；氟尿嘧啶所诱导的细胞凋亡率为（11．1±3．7）％和（1．4±0．6）％；上述差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论P13K P85α蛋白表达下降可引起结直肠癌SW480细胞周期阻滞，细胞凋亡增加：PI3K P85α可能成为结直肠癌基因治疗的新靶点。

摘要：背景:三维重建技术已经广泛应用于椎弓根螺钉置入前规划,但是就其预测参数的准确性目前尚未见直接的分析与报道。目的:基于CT三维重建技术应用于临床,对腰椎椎弓根螺钉置入前指导作用的精确性作初步分析。方法:在Mimics软件下,随机对30例行腰椎椎弓根螺钉内固定的患者共136个椎弓根行内固定前CT三维重建,并通过内固定前模拟模块预测钉长、直径、水平面角及矢状面角度并与内固定后实际数据进行统计学比较。结果与结论:内固定前通过Mimics软件对腰椎行三维重建,设计最佳钉道并模拟置钉,预测椎弓根螺钉长、直径、水平面角及矢状面角度与通过C型臂及内固定中导航系统等方式置钉后实际数据的差异无显著性意义(P>0.05),并且内固定后行CT扫描见置钉位置及长度均良好。说明通过Mimics软件对腰椎进行三维重建模拟置钉并制定置钉参数,能比较精确的指导内固定中实际置钉,提高椎弓根螺钉的置钉安全。

摘要：背景:目前国内外学者已经从人类或啮齿类等动物的皮肤、毛囊、角膜、口腔黏膜、肠道黏膜、牙齿断端、唾液腺等上皮组织中成功分离出干细胞,并应用于组织创伤修复的实验中,但人阴道黏膜干细胞的分离和应用的实验较少。目的:探讨人阴道黏膜干细胞的分离、筛选与适合的体外培养方法。设计:以细胞为对象的观察基础实验。单位:广州医学院第三附属医院(原广州市第二人民医院)妇产科。材料:实验于2004-10/2005-08在中山大学中山眼科中心实验室完成。实验室级别:卫生部眼科学重点实验室、广东省眼科视觉科学重点实验室、广东省教育厅眼科视觉科学重点实验室、广东省"五个一科教兴医工程"重点实验室。孕2周健康成年雌性昆明小鼠,由广州中医药大学实验动物中心提供。无细菌与病毒感染的患者的阴道黏膜标本5份,由广州医学院第三附属医院(原广州市第二人民医院)妇科提供。方法:采用胰酶、胶原酶混合消化法获得阴道黏膜细胞。将丝裂酶素C处理的小鼠成纤维细胞作滋养层细胞。采用Ⅳ型胶原快速黏附法筛选人阴道黏膜干细胞,并采用免疫细胞化学方法鉴定。将所筛选的人阴道黏膜干细胞与原代人阴道黏膜细胞分别用采用碘化丙啶一步荧光染色法、流式细胞仪分别检测其细胞周期。以4组方法体外培养原代人阴道黏膜干细胞:滋养层细胞+上皮细胞完全培养液、滋养层细胞+DMEM/F12(3∶1)、无滋养层细胞+上皮细胞完全培养液、无滋养层细胞+DMEM/F12(3∶1)。培养至12d,比较各组CK19、CK10阳性细胞比例、克隆形成率与凋亡前能传代的次数。主要观察指标:①所筛选的人阴道黏膜干细胞与原代人阴道黏膜细胞的G0/G1细胞比例、CK19、CK10阳性细胞的比例。②比较4种不同方法培养人阴道黏膜干细胞的CK19、CK10阳性的细胞比例、克隆形成率以及能传代的次数。结果:所筛选的人阴道黏膜干细胞与原代人阴道黏膜细胞的G0/G1细胞比例、CK19、CK10阳性的细胞比例均有统计学差异(P<0.05)。其中采用滋养层细胞+上皮细胞完全培养液培养人阴道黏膜干细胞12d,其克隆形成率与CK19阳性细胞比例最高,CK10阳性细胞比例最低,体外培养人阴道黏膜干细胞能稳定传15代以上。结论:①Ⅳ型胶原快速黏附法可有效筛选人阴道黏膜干细胞。②滋养层细胞+上皮细胞完全培养液为体外培养原代人阴道黏膜干细胞的较佳方法。

摘要：背景:胎盘和胎膜在母胎液体平衡过程中起着重要作用,而水穿过胎盘和胎膜运输的分子和细胞机制目前尚不十分清楚,推测母胎液体交换可能通过胎盘和胎膜上的水通道进行。目的:观察人正常妊娠晚期胎盘与胎膜组织中水通道蛋白8蛋白质水平的表达及其分布。设计、时间及地点:对比观察,于2005-07/12在广州医学院实验中心完成。材料:收集正常足月妊娠剖宫分娩的胎盘与胎膜组织样本各5例,产妇年龄(27±5)岁,实验方法获医院伦理委员会批准。方法:胎盘胎膜组织在分娩30min内取样,用无菌生理盐水漂洗干净去除血液,立即放入液氮中,转运至-80℃冰箱保存备用。主要观察指标:运用反转录-聚合酶链反应法、免疫组织化学法及Western印迹法检测水通道蛋白8在胎盘与胎膜组织中的表达与分布。结果:反转录-聚合酶链反应显示,水通道蛋白8mRNA在胎盘和胎膜组织中均有表达。水通道蛋白8 Western印迹检测胎盘和胎膜组织显示,一特异性条带在Mr45000左右。免疫组织化学结果显示,水通道蛋白8表达于胎盘合体滋养细胞、羊膜上皮细胞及平滑绒毛膜细胞滋养细胞。结论:在蛋白质水平显示,水通道蛋白8表达于胎盘的合体滋养细胞、羊膜上皮细胞及平滑绒毛膜细胞滋养细胞。

摘要：目的探讨糖尿病患者医院感染情况及其危险因素,为今后工作采取有效预防控制措施提供科学依据。方法通过设计医院感染个案调查表,对医院2006年6月-2009年6月259例糖尿病住院患者进行回顾性调查;采用SPSS软件进行单因素和多因素分析。结果糖尿病患者发生医院感染43例,感染率16.60%;感染部位以呼吸系统为主19例,占44.19%,其次为泌尿道11例,占25.58%,胃肠道7例,占16.28%;检出病原菌31株,以条件致病菌为主,其中革兰阴性菌19株,占61.29%;Logistic回归分析显示:年龄、住院天数、病程、空腹血糖、侵入性操作、抗菌药物使用是主要危险因素。结论糖尿病患者医院感染率高,应引起重视;须针对危险因素采取有效措施,降低感染率。

摘要：目的 调查广州地区孕产妇对分娩镇痛的认知度，根据反馈信息提出建议。方法 针对广州地区孕产妇对分娩镇痛认知度的不同设计调查问卷，于2006年7～9月分别对广东省妇幼保健院、广州市妇婴医院、广州市第一人民医院、广州医学院第二附属医院、广州医学院第三附属医院，广州市海珠区妇幼保健院、广州市越秀区妇幼保健院、广州市荔湾区妇幼保健院、广州市花都区妇幼保健院、广州从化市中心医院等十家不同级别医院的孕妇和产妇进行问卷调查，共发调查问卷1000份。结果 收回有效问卷982份（98.2％）。对分娩镇痛的认识程度：982位孕产妇中，5．4％对分娩镇痛十分清楚，22.1％对分娩镇痛有些了解，41．3％听说过分娩镇痛，但不清楚，31．2％从未听说过分娩镇痛。对分娩镇痛十分清楚的孕产妇最希望采用分娩镇痛方式分娩，其余孕产妇最希望不借助任何镇痛或手术而自然分娩。大部分产妇对分娩痛表示可以坦然对之或毫不畏惧，但有部分从未听说过或仅仅是听说过分娩镇痛的孕产妇对分娩痛有十分恐惧的心理。90％以上的产妇顾虑母婴安全问题。“亲戚朋友、医护人员、孕产妇手册”是各组孕产妇了解分娩镇痛的主要途径。对分娩镇痛十分清楚的孕产妇均能说出一两间提供分娩镇痛服务的医院，而对分娩镇痛不十分了解的孕产妇均不能说出。结论 广州地区大部分孕产妇对分娩镇痛的认知度较低，尤其是对其安全性的认识不足，推广分娩镇痛仍是一项艰巨的任务；应加大宣传力度，更新观念，让更多的产妇认识分娩镇痛的安全性及优越性，提高医护人员对开展分娩镇痛的奉献精神及对医护人员适当奖励，因地制宜成立专科麻醉小组，方有利于促进分娩镇痛新技术的开展。

摘要：[目的]探讨提高护理本科生科研能力的教学方法。[方法]选择2006年和2007年实习的23名护理本科生为对照组,2008年实习的24名护理本科生为实验组,实验组采用"护理导师-助教-学生"三位一体的教学方法进行科研教学,对照组采用常规的"导师制"教学方法进行教学。[结果]实验组学生对科研选题、科研设计和数据处理3方面的自我评价比对照组学生高(P<0.05);实验组学生完成的论文在科研选题的创新性得分和论文的总分高于对照组学生(P<0.01)。[结论]"护理导师-助教-学生"三位一体的教学模式可有效提高护理学生的科研能力。

摘要：[目的]探讨在职护理人员学习专业英语口语的目的、方式及影响因素等,以便提高护理人员专业英语口语的交流能力。[方法]自行设计问卷,调查广州医学院第三附属医院的在职护理人员。[结果]在职护理人员72.8%为交流而学,76.1%为充实自身能力,50.0%为交班;76.1%认为学习专业英语口语很重要,63.9%对学习专业英语口语有兴趣;82.8%表示只会读个别英语单词,61.1%表示英语口语发音不准,46.3%表示根本不会发音;43.0%选择辅导班,65.0%选择英语角,59.8%选择情景模拟。[结论]在职护理人员学习专业英语口语为自我提升的目的明确,学习存在的主要问题是发音不准和不会发音,在意个别单词的发音,忽视培养语感。建议医院应举办各类辅导班,在辅导班内举办英语角及情景模拟,适应在职护理人员专业英语口语学习的现状和需求。

摘要：目的:设计针对A组β溶血性链球菌M1和M12蛋白的复合多肽;构建含M蛋白基因(emm基因)1型和12型特异性抗原决定簇基因及其保守区J14肽基因的GST标签的重组表达载体;并诱导和优化GST融合蛋白的表达。方法:在NCBI Genebank和Oligo 6引物设计软件中选择分别编码M蛋白emm基因1型和12型信号肽后35个氨基酸及其相同的保守区14肽基因序列(全长270 bp),通过重叠PCR(Overlap PCR)合成所需的核苷酸序列,经测序确定序列完全和设计的相匹配后,将该重组片段克隆到pGEX-4T-1表达载体中,阳性克隆经双酶切和测序鉴定正确后建立稳定表达该重组质粒的大肠杆菌BL21株系(pE/B);通过聚丙烯酰胺凝胶的考马斯亮蓝染色和Western blot来检测在不同时间(0、2、6、8、18和24小时)和温度(25℃、30℃和37℃)以及不同浓度(0.01、0.1、1 mmol/L)异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导GST融合蛋白(GST/emm)表达情况,并对诱导表达的GST/emm切胶进行质谱分析鉴定。结果:成功构建含有emm1和emm12抗原决定簇及M蛋白保守区J14肽基因的原核表达载体;并诱导其稳定表达,在1 mol/L IPTG诱导6～8小时达高峰,不同温度下均有过量表达;质谱检测诱导蛋白GST/emm条带结果正确。结论:成功构建A组β溶血性链球菌的emm1型和emm12型原核表达载体,并稳定诱导GST/emm表达,为下一步研究GST/emm的纯化、酶切以及免疫原性的鉴定和疫苗研制打下夯实的基础。

摘要：目的了解老年慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,C0PD)患者正确使用吸入剂的情况。方法采用自行设计的吸入药物使用情况调查表及操作程序评分表对老年COPD患者进行调查。了解患者正确使用吸入剂的情况。结果正确掌握干粉制剂吸入操作方法的占46.9%,正确掌握气雾吸入剂操作方法的占86.2%;呼吸困难时能正确区分使用药物种类先后顺序的占46.7%,不能正确区分的占53.3%;随身携带救急吸入剂的占66.7%;未随身携带救急吸入剂的占33.3%。结论老年COPD患者对正确使用吸入剂方法及知识掌握不足,应做好患者应用吸入剂药物知识健康教育,使患者能有效、规范地、正确地使用药物,从而减少药物的不良反应,达到最好的治疗效果。