摘要：目的研究特异性载体介导的小干扰RNA（siRNA）对小鼠巨噬细胞株表达肿瘤坏死因子（TNF）-α基Ⅲ的抑制作用。方法设计两段靶向TNF-α基因的特异性siRNA。合成相应寡核苷酸。插入载体H1启动子下游，构建表达干扰性发央状RNA（shRNA）载体pHS-A和pHS-B，转染小鼠巨噬细咆株（RAW264．7）。用实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附法检测siRNA对TNF-amRNA和蛋白表达的抑制作用。结果内毒素脂多糖（LPS）刺激后6h。巨噬细胞表达TNF-α mRNA和合成的TNF-α量均增加。于9-12h达高峰。PHS-A转染后。LPS刺激巨噬细胞的TNF-α mRNA为0．00356±0．00187，TNF-α蛋白表达为（149．93±21．02）Pg／ml，比未转染组[分别为0．02134±0．00960、（1922．30±149．05）pg／m1]显著减少（P〈O．01），抑制率达83．3％。pHS-B及阴性对照组对基因及蛋白表达均无影响。结论LPS可刺激小鼠巨噬细胞合成TNF-α,pHS-A可抑制小鼠巨噬细胞TNF-α表达。