摘要：丝状真菌表面展示技术是将表达的目的蛋白固定在丝状真菌细胞表面的一项新兴基因工程技术。丝状真菌具有极强的蛋白质分泌能力和良好的蛋白质翻译后加工能力,因而越来越多的丝状真菌表面展示技术得到开发和应用。本文就丝状真菌表面展示系统的研发和应用进展进行综述,并介绍与该系统构建密切相关的丝状真菌的细胞壁组成、锚定蛋白和遗传转化方法等技术。

摘要：Ca^(2+)是植物体内重要的第二信使,当植物受到各种环境刺激时,细胞内的Ca^(2+)浓度瞬间产生变化,并被Ca^(2+)信号效应器识别,通过与下游的靶蛋白结合并调节其活性,参与调控植物各种生理活动。钙调素结合蛋白以依赖Ca^(2+)或不依赖Ca^(2+)的方式结合钙调素。对目前已经鉴定的植物钙调素结合蛋白结构特点进行了综述,并着重介绍了钙调素结合蛋白是如何参与调节植物对生物胁迫和非生物胁迫的反应,为提高作物抗病抗逆能力研究提供理论基础。

摘要：独角金内酯(strigolactone,SLs)是一类新型植物激素,在植物生长发育的进程中发挥多种重要功能,包括调控植物的分枝,促进种子的萌发,以及影响根系建成等。MAX2(more axillary growth 2)是SL信号传导途径的关键调控因子,位于合成途径基因MAX1、MAX3和MAX4的下游,几乎影响独脚金内酯所控制的所有表型。近年来,MAX2多样化的功能逐步得到揭示,大量数据表明MAX2不仅仅是SL信号的重要组分,同时也参与SL和多种激素信号间的交叉互作,在植物生长发育的各个环节,以及抵御生物和非生物胁迫的反应中都发挥至关重要的作用,但具体调控机制还有待更加深入的研究。对目前已知的MAX2功能进行了总结和阐述,以期为全面揭示MAX2功能及其调控多种激素信号的交叉机制提供理论参考。

摘要：Tn5是一种细菌转座子。经改造的Tn5能够高效地切割DNA,同时连接上特定的接头序列,因而广泛应用于高通量二代测序文库构建中。CUT&Tag(Cleavage Under Target&Tagmentation)是一种改进的研究蛋白质与DNA互作的技术,具有重复性好、信噪比高及操作简便等优点。该技术采用pA(Protein A)或pG(Protein G)与Tn5形成融合蛋白,定位于特定抗体(用于识别目标蛋白),利用Tn5的特性,在目标位点附近打断DNA的同时引入测序接头,随后提取DNA,再进行PCR扩增即可获得测序文库。但不同类型的抗体与pA或pG的亲和力不同,因此限制了部分抗体在CUT&Tag技术中的应用。为克服这一局限,该文构建了pG与Tn5的融合蛋白表达载体,通过原核表达及亲和纯化的方式获得pG-Tn5重组蛋白;并以RNA聚合酶Ⅱ(PolⅡ)特异性抗体PolⅡSer5P(小鼠IgG1型抗体和兔IgG型抗体)为例,在模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)中评估pA-Tn5与pG-Tn5在不同类型抗体的CUT&Tag测序文库构建中的效果。结果表明,IgG1型抗体与p G-Tn5的亲和力更高,构建的文库质量更好,而IgG型抗体与2种酶的亲和力相当;同时,较低起始量的植物材料也能获得较好的效果,证明了CUT&Tag的应用优势。该研究优化了CUT&Tag技术,可为后续CUT&Tag实验中针对不同抗体时Tn5融合蛋白的选择提供参考。

摘要：盐胁迫是影响大豆生长发育和产量的重要环境因素之一。NAC转录因子家族是植物响应盐胁迫的重要基因家族,但在大豆中其功能尚未被完全解析。为了挖掘控制大豆耐盐的新基因,本研究首先利用全基因组分析和聚类分析,并结合盐胁迫下大豆植株的转录组数据,对大豆受盐胁迫诱导表达的NAC基因进行分析;其次,对在根中受盐胁迫诱导表达的NAC基因进行单倍型、耐盐指数和核酸多态性分析。结果显示:在大豆基因组中共鉴定出182个NAC基因,将其分成7个亚家族;18个NAC基因受盐胁迫诱导显著上调表达,其中有8个在根中表达水平较高,可能参与响应盐胁迫。我们鉴定到NAC23的一个优异单倍型Hap1,能够显著促进大豆对盐胁迫的耐性。同时,发现NAC23的Hap1单倍型在栽培大豆品种中受到了强烈的人工选择。以上研究结果为更加深入地解析NAC家族基因与大豆耐盐性之间的关系提供了新的见解,为培育高效抗逆大豆新品种提供基因资源和新的思路。